এডিস ইজিপ্টি (ডিপ্টেরা: কুলিসিডে) এর বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্ক প্রতিকার হিসেবে উদ্ভিদের অপরিহার্য তেলের উপর ভিত্তি করে টারপিন যৌগের সংমিশ্রণ

Nature.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজারটি ব্যবহার করছেন তার সংস্করণে সীমিত CSS সাপোর্ট রয়েছে। সেরা ফলাফলের জন্য, আমরা আপনাকে আপনার ব্রাউজারের একটি নতুন সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্যতা মোড অক্ষম করুন)। ইতিমধ্যে, চলমান সহায়তা নিশ্চিত করার জন্য, আমরা স্টাইলিং বা জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই সাইটটি দেখাচ্ছি।
উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত কীটনাশক যৌগের সংমিশ্রণ কীটপতঙ্গের বিরুদ্ধে সহনশীল বা বিরোধী মিথস্ক্রিয়া প্রদর্শন করতে পারে। এডিস মশা দ্বারা বাহিত রোগের দ্রুত বিস্তার এবং ঐতিহ্যবাহী কীটনাশকের প্রতি এডিস মশার সংখ্যা বৃদ্ধির কারণে, এডিস এজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ের বিরুদ্ধে উদ্ভিদের অপরিহার্য তেলের উপর ভিত্তি করে টারপেন যৌগের আঠাশটি সংমিশ্রণ তৈরি এবং পরীক্ষা করা হয়েছিল। পাঁচটি উদ্ভিদ অপরিহার্য তেল (EOs) প্রাথমিকভাবে তাদের লার্ভানাশক এবং প্রাপ্তবয়স্কদের ব্যবহারের কার্যকারিতার জন্য মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং GC-MS ফলাফলের উপর ভিত্তি করে প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল। প্রধান চিহ্নিত যৌগগুলি কেনা হয়েছিল, যথা ডায়ালাইল ডাইসালফাইড, ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইড, কারভোন, লিমোনিন, ইউজেনল, মিথাইল ইউজেনল, ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল এবং মশার আলফা-পিনেন। এরপর এই যৌগগুলির বাইনারি সংমিশ্রণগুলি সাবলেথাল ডোজ ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং তাদের সহনশীল এবং বিরোধী প্রভাব পরীক্ষা এবং নির্ধারণ করা হয়েছিল। ডায়ালিল ডাইসালফাইডের সাথে লিমোনিন মিশিয়ে সবচেয়ে ভালো লার্ভিসাইডাল কম্পোজিশন পাওয়া যায় এবং কার্ভোনকে লিমোনিনের সাথে মিশিয়ে সবচেয়ে ভালো প্রাপ্তবয়স্ক কম্পোজিশন পাওয়া যায়। বাণিজ্যিকভাবে ব্যবহৃত সিন্থেটিক লার্ভিসাইড টেমফোস এবং প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য ওষুধ ম্যালাথিয়ন পৃথকভাবে এবং টেরপেনয়েডের সাথে বাইনারি সংমিশ্রণে পরীক্ষা করা হয়েছিল। ফলাফলে দেখা গেছে যে টেমেফোস এবং ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ সবচেয়ে কার্যকর ছিল। এই শক্তিশালী সংমিশ্রণগুলি এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে ব্যবহারের সম্ভাবনা রাখে।
উদ্ভিদের অপরিহার্য তেল (EOs) হল বিভিন্ন জৈব-সক্রিয় যৌগ ধারণকারী গৌণ বিপাক এবং কৃত্রিম কীটনাশকের বিকল্প হিসেবে ক্রমশ গুরুত্বপূর্ণ হয়ে উঠছে। এগুলি কেবল পরিবেশবান্ধব এবং ব্যবহারকারী-বান্ধবই নয়, বরং বিভিন্ন জৈব-সক্রিয় যৌগের মিশ্রণও, যা ওষুধ প্রতিরোধের বিকাশের সম্ভাবনাও হ্রাস করে। GC-MS প্রযুক্তি ব্যবহার করে, গবেষকরা বিভিন্ন উদ্ভিদের অপরিহার্য তেলের উপাদানগুলি পরীক্ষা করেছেন এবং 17,500টি সুগন্ধযুক্ত উদ্ভিদ থেকে 3,000টিরও বেশি যৌগ সনাক্ত করেছেন, যার বেশিরভাগই কীটনাশক বৈশিষ্ট্যের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং কীটনাশক প্রভাব রয়েছে বলে জানা গেছে 3,4। কিছু গবেষণায় হাইলাইট করা হয়েছে যে যৌগের প্রধান উপাদানের বিষাক্ততা তার অপরিশোধিত ইথিলিন অক্সাইডের সমান বা তার চেয়ে বেশি। কিন্তু পৃথক যৌগের ব্যবহার আবার প্রতিরোধের বিকাশের জন্য জায়গা ছেড়ে দিতে পারে, যেমন রাসায়নিক কীটনাশকের ক্ষেত্রে 5,6। অতএব, বর্তমান ফোকাস কীটনাশক কার্যকারিতা উন্নত করতে এবং লক্ষ্যবস্তু পোকামাকড়ের জনসংখ্যার প্রতিরোধের সম্ভাবনা কমাতে ইথিলিন অক্সাইড-ভিত্তিক যৌগগুলির মিশ্রণ প্রস্তুত করার উপর। EO-তে উপস্থিত পৃথক সক্রিয় যৌগগুলি EO-এর সামগ্রিক কার্যকলাপকে প্রতিফলিত করে সংমিশ্রণে সিনার্জিস্টিক বা বিরোধী প্রভাব প্রদর্শন করতে পারে, যা পূর্ববর্তী গবেষকদের দ্বারা পরিচালিত গবেষণায় ভালভাবে জোর দেওয়া হয়েছে7,8। ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচিতে EO এবং এর উপাদানগুলিও অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। কিউলেক্স এবং অ্যানোফিলিস মশার উপর অপরিহার্য তেলের মশা-নাশক কার্যকলাপ ব্যাপকভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে। সামগ্রিক বিষাক্ততা বৃদ্ধি এবং পার্শ্ব প্রতিক্রিয়া হ্রাস করার জন্য বিভিন্ন উদ্ভিদের সাথে বাণিজ্যিকভাবে ব্যবহৃত সিন্থেটিক কীটনাশক একত্রিত করে কার্যকর কীটনাশক তৈরির চেষ্টা করা হয়েছে9। কিন্তু এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে এই জাতীয় যৌগগুলির গবেষণা বিরল। চিকিৎসা বিজ্ঞানের অগ্রগতি এবং ওষুধ ও টিকা উন্নয়ন কিছু ভেক্টর-বাহিত রোগের বিরুদ্ধে লড়াই করতে সহায়তা করেছে। কিন্তু এডিস ইজিপ্টি মশা দ্বারা প্রেরিত ভাইরাসের বিভিন্ন সেরোটাইপের উপস্থিতি টিকাদান কর্মসূচির ব্যর্থতার দিকে পরিচালিত করেছে। অতএব, যখন এই জাতীয় রোগ দেখা দেয়, তখন রোগের বিস্তার রোধ করার জন্য ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচিই একমাত্র বিকল্প। বর্তমান পরিস্থিতিতে, এডিস ইজিপ্টির নিয়ন্ত্রণ অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ কারণ এটি বিভিন্ন ভাইরাস এবং তাদের সেরোটাইপগুলির একটি মূল বাহক যা ডেঙ্গু জ্বর, জিকা, ডেঙ্গু হেমোরেজিক জ্বর, হলুদ জ্বর ইত্যাদি সৃষ্টি করে। সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য বিষয় হল যে মিশরে প্রতি বছর এবং বিশ্বব্যাপী প্রায় সমস্ত ভেক্টর-বাহিত এডিস-বাহিত রোগের সংখ্যা বৃদ্ধি পাচ্ছে। অতএব, এই প্রেক্ষাপটে, এডিস ইজিপ্টির জনসংখ্যার জন্য পরিবেশবান্ধব এবং কার্যকর নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থা বিকাশের জরুরি প্রয়োজন। এই ক্ষেত্রে সম্ভাব্য প্রার্থীরা হলেন EO, তাদের উপাদান যৌগ এবং তাদের সংমিশ্রণ। অতএব, এই গবেষণায় এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে কীটনাশক বৈশিষ্ট্যযুক্ত পাঁচটি উদ্ভিদের (যেমন, পুদিনা, পবিত্র তুলসী, ইউক্যালিপটাস দাগযুক্ত, অ্যালিয়াম সালফার এবং মেলালেউকা) মূল উদ্ভিদ EO যৌগগুলির কার্যকর সমন্বয়মূলক সংমিশ্রণ সনাক্ত করার চেষ্টা করা হয়েছে।
নির্বাচিত সকল EO-তে Aedes aegypti-র বিরুদ্ধে সম্ভাব্য লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ দেখা গেছে, যার 24-h LC50 0.42 থেকে 163.65 ppm পর্যন্ত। সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পেপারমিন্ট (Mp) EO-এর ক্ষেত্রে রেকর্ড করা হয়েছে যার LC50 মান 0.42 ppm, এবং তারপরে রসুন (As) -এর ক্ষেত্রে LC50 মান 16.19 ppm, 24 ঘন্টা (সারণী 1)।
Ocimum Saintum, Os EO বাদে, অন্য চারটি স্ক্রিন করা EO-তে স্পষ্ট অ্যালার্জিক প্রভাব দেখা গেছে, 24 ঘন্টার এক্সপোজার সময়কালে LC50 মান 23.37 থেকে 120.16 ppm পর্যন্ত ছিল। থাইমোফিলাস স্ট্রিয়াটা (Cl) EO প্রাপ্তবয়স্কদের হত্যা করার ক্ষেত্রে সবচেয়ে কার্যকর ছিল যাদের LC50 মান 24 ঘন্টার এক্সপোজারের মধ্যে 23.37 ppm ছিল, তারপরে ইউক্যালিপটাস ম্যাকুলাটা (Em) ছিল যার LC50 মান 101.91 ppm ছিল (সারণী 1)। অন্যদিকে, Os-এর জন্য LC50 মান এখনও নির্ধারণ করা হয়নি কারণ সর্বোচ্চ মাত্রায় 53% সর্বোচ্চ মৃত্যুহার রেকর্ড করা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র 3)।
প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান উপাদান যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং NIST লাইব্রেরি ডাটাবেস ফলাফল, GC ক্রোমাটোগ্রাম এরিয়া শতাংশ এবং MS স্পেকট্রা ফলাফলের উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছিল (সারণী 2)। EO As-এর জন্য, চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি ছিল ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড; EO Mp-এর জন্য চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি ছিল কারভোন এবং লিমোনিন, EO Em-এর জন্য চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি ছিল ইউডেসমল এবং ইউক্যালিপটল; EO Os-এর জন্য, চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি ছিল ইউজেনল এবং মিথাইল ইউজেনল, এবং EO Cl-এর জন্য, চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি ছিল ইউজেনল এবং α-পিনেন (চিত্র 1, পরিপূরক চিত্র 5-8, পরিপূরক সারণী 1-5)।
নির্বাচিত অপরিহার্য তেলের (A-ডায়ালিল ডাইসালফাইড; বি-ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড; সি-ইউজেনল; ডি-মিথাইল ইউজেনল; ই-লিমোনিন; এফ-অ্যারোমেটিক সেপেরোন; জি-α-পিনেন; এইচ-সিনোল; আর-ইউডামল) প্রধান টারপেনয়েডের ভর স্পেকট্রোমেট্রির ফলাফল।
মোট নয়টি যৌগ (ডায়ালিল ডাইসালফাইড, ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইড, ইউজেনল, মিথাইল ইউজেনল, কারভোন, লিমোনিন, ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল, α-পিনেন) কার্যকর যৌগ হিসেবে চিহ্নিত করা হয়েছিল যা EO-এর প্রধান উপাদান এবং লার্ভা পর্যায়ে এডিস এজিপ্টির বিরুদ্ধে পৃথকভাবে জৈব পরীক্ষা করা হয়েছিল। 24 ঘন্টা এক্সপোজারের পরে ইউডেসমল যৌগের সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ ছিল যার LC50 মান 2.25 ppm ছিল। ডায়ালাইল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইড যৌগগুলির সম্ভাব্য লার্ভিসাইডাল প্রভাবও পাওয়া গেছে, যার গড় সাবলেথাল ডোজ 10-20 ppm এর মধ্যে। 63.35 ppm, 139.29 ppm এর LC50 মান সহ ইউজেনল, লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল যৌগগুলির জন্য আবার মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পরিলক্ষিত হয়েছিল। এবং যথাক্রমে 24 ঘন্টা পরে 181.33 পিপিএম (সারণী 3)। তবে, সর্বোচ্চ মাত্রায়ও মিথাইল ইউজেনল এবং কারভোনের কোনও উল্লেখযোগ্য লার্ভিসাইডাল সম্ভাবনা পাওয়া যায়নি, তাই LC50 মান গণনা করা হয়নি (সারণী 3)। 24 ঘন্টার এক্সপোজারের সময় এডিস এজিপ্টির বিরুদ্ধে সিন্থেটিক লার্ভিসাইড টেমেফোসের গড় প্রাণঘাতী ঘনত্ব 0.43 পিপিএম ছিল (সারণী 3, পরিপূরক সারণি 6)।
সাতটি যৌগ (ডায়ালিল ডাইসালফাইড, ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইড, ইউক্যালিপটল, α-পিনেন, ইউডেসমল, লিমোনিন এবং কারভোন) কার্যকর EO-এর প্রধান যৌগ হিসেবে চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং প্রাপ্তবয়স্ক মিশরীয় এডিস মশার বিরুদ্ধে পৃথকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল। প্রোবিট রিগ্রেশন বিশ্লেষণ অনুসারে, ইউডেসমলের সর্বোচ্চ সম্ভাবনা পাওয়া গেছে যার LC50 মান 1.82 ppm, তারপরে ইউক্যালিপটলের LC50 মান 17.60 ppm 24 ঘন্টা এক্সপোজার সময়ে। পরীক্ষিত বাকি পাঁচটি যৌগ LC50s প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য মাঝারিভাবে ক্ষতিকারক ছিল 140.79 থেকে 737.01 ppm (সারণী 3)। সিন্থেটিক অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়ন ইউডেসমলের চেয়ে কম শক্তিশালী এবং অন্য ছয়টি যৌগের চেয়ে বেশি ছিল, 24 ঘন্টা এক্সপোজার সময়কালে LC50 মান 5.44 ppm ছিল (সারণী 3, পরিপূরক সারণি 6)।
সাতটি শক্তিশালী সীসা যৌগ এবং অর্গানোফসফরাস টেমফোসেটকে তাদের LC50 ডোজের বাইনারি সংমিশ্রণ তৈরি করার জন্য 1:1 অনুপাতে নির্বাচন করা হয়েছিল। মোট 28টি বাইনারি সংমিশ্রণ প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং এডিস এজিপ্টির বিরুদ্ধে তাদের লার্ভিসাইডাল কার্যকারিতা পরীক্ষা করা হয়েছিল। নয়টি সংমিশ্রণ সিনারজিস্টিক, 14টি সংমিশ্রণ বিরোধিতামূলক এবং পাঁচটি সংমিশ্রণ লার্ভিসাইডাল ছিল না। সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণের মধ্যে, ডায়ালাইল ডাইসালফাইড এবং টেমোফোলের সংমিশ্রণ সবচেয়ে কার্যকর ছিল, 24 ঘন্টা পরে 100% মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয়েছিল (সারণী 4)। একইভাবে, ডায়ালাইল ডাইসালফাইডের সাথে লিমোনিন এবং থাইমেটফসের সাথে ইউজেনলের মিশ্রণগুলি 98.3% পর্যবেক্ষণ করা লার্ভা মৃত্যুর হার সহ ভাল সম্ভাবনা দেখিয়েছিল (সারণী 5)। বাকি ৪টি সংমিশ্রণ, যেমন ইউডেসমল প্লাস ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল প্লাস লিমোনিন, ইউকেলিপটল প্লাস আলফা-পিনেন, আলফা-পিনেন প্লাস টেমেফোস, উল্লেখযোগ্য লার্ভিসাইডাল কার্যকারিতা দেখিয়েছে, পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে যে মৃত্যুর হার ৯০% ছাড়িয়ে গেছে। প্রত্যাশিত মৃত্যুহার ৬০-৭৫% এর কাছাকাছি। (সারণী ৪)। তবে, α-পিনেন বা ইউক্যালিপটাস সহ লিমোনিনের সংমিশ্রণে বিরোধী প্রতিক্রিয়া দেখা গেছে। একইভাবে, টেমেফোসের সাথে ইউজেনল বা ইউক্যালিপটাস বা ইউডেসমল বা ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডের মিশ্রণে বিরোধী প্রভাব দেখা গেছে। একইভাবে, ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডের সংমিশ্রণ এবং ইউডেসমল বা ইউজেনলের সাথে এই যৌগগুলির যেকোনো একটির সংমিশ্রণ তাদের লার্ভিসাইডাল ক্রিয়ায় বিরোধী। ইউজেনল বা α-পিনেনের সাথে ইউডেসমলের সংমিশ্রণের সাথেও বিরোধীতা রিপোর্ট করা হয়েছে।
প্রাপ্তবয়স্কদের অ্যাসিডিক কার্যকলাপের জন্য পরীক্ষিত ২৮টি বাইনারি মিশ্রণের মধ্যে ৭টি সমন্বয়মূলক ছিল, ৬টির কোনও প্রভাব ছিল না এবং ১৫টি ছিল বিরোধী। ইউক্যালিপটাসের সাথে ইউডেসমল এবং কার্ভোনের সাথে লিমোনিনের মিশ্রণ অন্যান্য সমন্বয়মূলক সংমিশ্রণের তুলনায় বেশি কার্যকর বলে প্রমাণিত হয়েছে, যার মৃত্যুহার ২৪ ঘন্টায় যথাক্রমে ৭৬% এবং ১০০% (সারণী ৫)। লিমোনিন এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড ব্যতীত সকল যৌগের সংমিশ্রণের সাথে ম্যালাথিয়নের একটি সমন্বয়মূলক প্রভাব দেখা গেছে। অন্যদিকে, ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড এবং ইউক্যালিপটাস, বা ইউক্যালিপটল, বা কারভোন, বা লিমোনিনের সাথে তাদের যেকোনো একটির সংমিশ্রণের মধ্যে বিরোধ পাওয়া গেছে। একইভাবে, ইউডেসমল বা লিমোনিনের সাথে α-পিনেন, কারভোন বা লিমোনিনের সাথে ইউকেলিপটল এবং ইউকেলিপটল বা ম্যালাথিয়নের সাথে লিমোনিনের সংমিশ্রণে বিরোধী লার্ভিসাইডাল প্রভাব দেখা গেছে। বাকি ছয়টি সংমিশ্রণের ক্ষেত্রে, প্রত্যাশিত এবং পর্যবেক্ষণকৃত মৃত্যুহারের মধ্যে কোনও উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না (সারণী 5)।
সিনারজিস্টিক প্রভাব এবং সাবলেথাল ডোজের উপর ভিত্তি করে, বিপুল সংখ্যক এডিস এজিপ্টি মশার বিরুদ্ধে তাদের লার্ভিসাইডাল বিষাক্ততা চূড়ান্তভাবে নির্বাচন করা হয়েছিল এবং আরও পরীক্ষা করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে ইউজেনল-লিমোনিন, ডায়ালিল ডাইসালফাইড-লিমোনিন এবং ডায়ালিল ডাইসালফাইড-টাইমফস বাইনারি সংমিশ্রণ ব্যবহার করে পর্যবেক্ষণ করা লার্ভা মৃত্যুহার ছিল 100%, যেখানে প্রত্যাশিত লার্ভা মৃত্যুহার ছিল যথাক্রমে 76.48%, 72.16% এবং 63.4% (সারণী 6)। । লিমোনিন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ তুলনামূলকভাবে কম কার্যকর ছিল, 24-ঘন্টা এক্সপোজার সময়কালে 88% লার্ভা মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয়েছিল (সারণী 6)। সংক্ষেপে, চারটি নির্বাচিত বাইনারি সংমিশ্রণ বৃহৎ স্কেলে প্রয়োগ করার সময় এডিস এজিপ্টির বিরুদ্ধেও সিনারজিস্টিক লার্ভিসাইডাল প্রভাব প্রদর্শন করেছে (সারণী 6)।
প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টির বৃহৎ জনসংখ্যা নিয়ন্ত্রণের জন্য অ্যাডাল্টোসাইডাল বায়োঅ্যাসের জন্য তিনটি সিনেরজিস্টিক সংমিশ্রণ নির্বাচন করা হয়েছিল। বৃহৎ পোকামাকড়ের উপনিবেশগুলিতে পরীক্ষার জন্য সংমিশ্রণ নির্বাচন করার জন্য, আমরা প্রথমে দুটি সেরা সিনারজিস্টিক টারপিন সংমিশ্রণের উপর মনোনিবেশ করেছি, যথা কারভোন প্লাস লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল প্লাস ইউডেসমল। দ্বিতীয়ত, সিন্থেটিক অর্গানোফসফেট ম্যালাথিয়ন এবং টারপেনয়েডের সংমিশ্রণ থেকে সেরা সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণটি নির্বাচন করা হয়েছিল। আমরা বিশ্বাস করি যে ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ বৃহৎ পোকামাকড়ের উপনিবেশগুলিতে পরীক্ষার জন্য সেরা সংমিশ্রণ কারণ সর্বোচ্চ পর্যবেক্ষণ করা মৃত্যুহার এবং প্রার্থী উপাদানগুলির খুব কম LC50 মান রয়েছে। ম্যালাথিয়ন α-পিনেন, ডায়ালিল ডাইসালফাইড, ইউক্যালিপটাস, কারভোন এবং ইউডেসমলের সাথে সংমিশ্রণে সিনারজিজম প্রদর্শন করে। কিন্তু যদি আমরা LC50 মানগুলি দেখি, তাহলে ইউডেসমলের মান সর্বনিম্ন (2.25 ppm)। ম্যালাথিয়ন, α-পিনেন, ডায়ালিল ডাইসালফাইড, ইউক্যালিপটল এবং কারভোনের গণনা করা LC50 মান যথাক্রমে 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 এবং 140.79 পিপিএম ছিল। এই মানগুলি নির্দেশ করে যে ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ ডোজের দিক থেকে সর্বোত্তম সংমিশ্রণ। ফলাফলগুলি দেখায় যে কারভোন প্লাস লিমোনিন এবং ইউডেসমল প্লাস ম্যালাথিয়নের সংমিশ্রণে 100% পর্যবেক্ষণ করা মৃত্যুহার ছিল, যেখানে প্রত্যাশিত মৃত্যুহার 61% থেকে 65% ছিল। আরেকটি সংমিশ্রণ, ইউডেসমল প্লাস ইউক্যালিপটল, 24 ঘন্টা এক্সপোজারের পরে মৃত্যুর হার 78.66% দেখিয়েছে, যেখানে প্রত্যাশিত মৃত্যুহার 60% ছিল। প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে বৃহৎ পরিসরে প্রয়োগ করা হলেও নির্বাচিত তিনটি সংমিশ্রণই সিনারজিস্টিক প্রভাব প্রদর্শন করেছে (সারণী 6)।
এই গবেষণায়, নির্বাচিত উদ্ভিদ EO যেমন Mp, As, Os, Em এবং Cl এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে আশাব্যঞ্জক মারাত্মক প্রভাব দেখিয়েছে। Mp EO-এর লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ ছিল সর্বোচ্চ যার LC50 মান 0.42 ppm, তারপরে As, Os এবং Em EO-এর LC50 মান 24 ঘন্টা পরে 50 ppm-এর কম। এই ফলাফলগুলি মশা এবং অন্যান্য ডাইপ্টেরাস মাছি 10,11,12,13,14 এর পূর্ববর্তী গবেষণার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। যদিও Cl-এর লার্ভিসাইডাল ক্ষমতা অন্যান্য অপরিহার্য তেলের তুলনায় কম, 24 ঘন্টা পরে LC50 মান 163.65 ppm, এর প্রাপ্তবয়স্ক সম্ভাবনা সর্বোচ্চ যেখানে LC50 মান 24 ঘন্টা পরে 23.37 ppm। Mp, As এবং Em EOs-এরও ২৪ ঘন্টার এক্সপোজারে LC50 মান ১০০-১২০ ppm-এর মধ্যে থাকায় ভালো অ্যালার্জিনাশক সম্ভাবনা দেখায়, কিন্তু তাদের লার্ভিনাশক কার্যকারিতার তুলনায় তুলনামূলকভাবে কম ছিল। অন্যদিকে, EO Os সর্বোচ্চ থেরাপিউটিক ডোজেও একটি নগণ্য অ্যালার্জিনাশক প্রভাব প্রদর্শন করেছে। সুতরাং, ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে উদ্ভিদের প্রতি ইথিলিন অক্সাইডের বিষাক্ততা মশার বিকাশের পর্যায়ের উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হতে পারে15। এটি পোকামাকড়ের শরীরে EO-এর অনুপ্রবেশের হার, নির্দিষ্ট লক্ষ্য এনজাইমের সাথে তাদের মিথস্ক্রিয়া এবং প্রতিটি বিকাশের পর্যায়ে মশার ডিটক্সিফিকেশন ক্ষমতার উপরও নির্ভর করে16। বিপুল সংখ্যক গবেষণায় দেখা গেছে যে প্রধান উপাদান যৌগটি ইথিলিন অক্সাইডের জৈবিক কার্যকলাপের একটি গুরুত্বপূর্ণ উপাদান, কারণ এটি মোট যৌগের বেশিরভাগ অংশের জন্য দায়ী3,12,17,18। অতএব, আমরা প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ বিবেচনা করেছি। GC-MS ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডকে EO As এর প্রধান যৌগ হিসেবে চিহ্নিত করা হয়েছে, যা পূর্ববর্তী প্রতিবেদনের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ19,20,21। যদিও পূর্ববর্তী প্রতিবেদনগুলিতে ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছিল যে মেন্থল তার প্রধান যৌগগুলির মধ্যে একটি ছিল, কারভোন এবং লিমোনিন আবার Mp EO22,23 এর প্রধান যৌগ হিসেবে চিহ্নিত করা হয়েছিল। Os EO এর রচনা প্রোফাইল দেখায় যে ইউজেনল এবং মিথাইল ইউজেনল হল প্রধান যৌগ, যা পূর্ববর্তী গবেষকদের ফলাফলের অনুরূপ16,24। Eucalyptol এবং eucalyptol কে Em পাতার তেলে উপস্থিত প্রধান যৌগ হিসেবে রিপোর্ট করা হয়েছে, যা কিছু গবেষকের ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ25,26 কিন্তু Olalade et al.27 এর ফলাফলের বিপরীত। মেলালেউকা এসেনশিয়াল অয়েলে সিনোয়েল এবং α-পিনেনের প্রাধান্য লক্ষ্য করা গেছে, যা পূর্ববর্তী গবেষণার অনুরূপ28,29। বিভিন্ন স্থানে একই উদ্ভিদ প্রজাতি থেকে নিষ্কাশিত অপরিহার্য তেলের গঠন এবং ঘনত্বের মধ্যে আন্তঃনির্দিষ্ট পার্থক্য রিপোর্ট করা হয়েছে এবং এই গবেষণায়ও লক্ষ্য করা গেছে, যা ভৌগোলিক উদ্ভিদ বৃদ্ধির অবস্থা, ফসল কাটার সময়, বিকাশের পর্যায়, বা উদ্ভিদের বয়স দ্বারা প্রভাবিত হয়। কেমোটাইপের উপস্থিতি, ইত্যাদি।22,30,31,32। এরপর মূল চিহ্নিত যৌগগুলি ক্রয় করা হয়েছিল এবং তাদের লার্ভিসাইডাল প্রভাব এবং প্রাপ্তবয়স্ক এডিস এজিপ্টি মশার উপর প্রভাবের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে ডায়ালাইল ডাইসালফাইডের লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ অপরিশোধিত EO As এর সাথে তুলনীয় ছিল। কিন্তু ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইডের কার্যকলাপ EO As এর চেয়ে বেশি। এই ফলাফলগুলি কিম্বারিস এট আল দ্বারা কিউলেক্স ফিলিপাইনের উপর প্রাপ্ত ফলাফলের অনুরূপ। যাইহোক, এই দুটি যৌগ লক্ষ্য মশার বিরুদ্ধে ভাল অটোসাইডাল কার্যকলাপ দেখায়নি, যা টেনেব্রিও মলিটরের উপর প্লাটা-রুয়েদা এট আল 34 এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। Os EO এডিস এজিপ্টির লার্ভা পর্যায়ের বিরুদ্ধে কার্যকর, কিন্তু প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ের বিরুদ্ধে নয়। এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে যে প্রধান পৃথক যৌগগুলির লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ অশোধিত Os EO-এর তুলনায় কম। এটি অন্যান্য যৌগগুলির ভূমিকা এবং অশোধিত ইথিলিন অক্সাইডে তাদের মিথস্ক্রিয়া বোঝায়। শুধুমাত্র মিথাইল ইউজেনলের কার্যকলাপ নগণ্য, যেখানে শুধুমাত্র ইউজেনলের মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ রয়েছে। এই উপসংহার একদিকে নিশ্চিত করে, 35,36, এবং অন্যদিকে, পূর্ববর্তী গবেষকদের সিদ্ধান্তের বিরোধিতা করে37,38। ইউজেনল এবং মিথাইল্যুজেনলের কার্যকরী গোষ্ঠীর পার্থক্য একই লক্ষ্য পোকার জন্য বিভিন্ন বিষাক্ততার কারণ হতে পারে39। লিমোনিনের মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পাওয়া গেছে, যেখানে কারভোনের প্রভাব নগণ্য ছিল। একইভাবে, প্রাপ্তবয়স্ক পোকামাকড়ের প্রতি লিমোনিনের তুলনামূলকভাবে কম বিষাক্ততা এবং কারভোনের উচ্চ বিষাক্ততা পূর্ববর্তী কিছু গবেষণার ফলাফলকে সমর্থন করে40 কিন্তু অন্যদের বিরোধিতা করে41। ইন্ট্রাসাইক্লিক এবং এক্সোসাইক্লিক উভয় অবস্থানেই ডাবল বন্ডের উপস্থিতি লার্ভিসাইড হিসেবে এই যৌগগুলির সুবিধা বৃদ্ধি করতে পারে3,41, অন্যদিকে কার্ভোন, যা অসম্পৃক্ত আলফা এবং বিটা কার্বন সহ একটি কিটোন, প্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে বিষাক্ততার জন্য উচ্চ সম্ভাবনা প্রদর্শন করতে পারে42। তবে, লিমোনিন এবং কার্ভোনের স্বতন্ত্র বৈশিষ্ট্য মোট EO Mp (টেবিল 1, টেবিল 3) এর তুলনায় অনেক কম। পরীক্ষিত টেরপেনয়েডগুলির মধ্যে, ইউডেসমলের লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে সর্বাধিক কার্যকলাপ পাওয়া গেছে যার LC50 মান 2.5 ppm এর নিচে, এটি এডিস মশার নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি আশাব্যঞ্জক যৌগ। এর কার্যকারিতা সমগ্র EO Em এর তুলনায় ভালো, যদিও এটি চেং এট আল.40 এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ নয়। ইউডেসমল হল একটি সেসকুইটারপিন যার দুটি আইসোপ্রিন ইউনিট রয়েছে যা ইউক্যালিপটাসের মতো অক্সিজেনযুক্ত মনোটারপিনের তুলনায় কম উদ্বায়ী এবং তাই কীটনাশক হিসেবে এর সম্ভাবনা বেশি। ইউক্যালিপটলের লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ প্রাপ্তবয়স্কদের তুলনায় বেশি, এবং পূর্ববর্তী গবেষণার ফলাফল এটিকে সমর্থন এবং খণ্ডন উভয়ই করে37,43,44। শুধুমাত্র এই কার্যকলাপ সমগ্র EO Cl এর সাথে প্রায় তুলনীয়। আরেকটি সাইক্লিক মনোটারপিন, α-পিনেন, লার্ভিসাইডাল প্রভাবের তুলনায় এডিস এজিপ্টির উপর প্রাপ্তবয়স্কদের তুলনায় কম প্রভাব ফেলে, যা সম্পূর্ণ EO Cl এর প্রভাবের বিপরীত। টেরপেনয়েডের সামগ্রিক কীটনাশক কার্যকলাপ তাদের লাইপোফিলিসিটি, অস্থিরতা, কার্বন শাখা, প্রক্ষেপণ এলাকা, পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফল, কার্যকরী গোষ্ঠী এবং তাদের অবস্থান দ্বারা প্রভাবিত হয়45,46। এই যৌগগুলি কোষের সঞ্চয় ধ্বংস করে, শ্বাসযন্ত্রের কার্যকলাপকে বাধাগ্রস্ত করে, স্নায়ু আবেগের সংক্রমণকে বাধাগ্রস্ত করে ইত্যাদি কাজ করতে পারে। 47 সিন্থেটিক অর্গানোফসফেট টেমেফোসের সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পাওয়া গেছে যার LC50 মান 0.43 ppm, যা লেকের তথ্য -Utala48 এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য কৃত্রিম অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়নের কার্যকলাপ ৫.৪৪ পিপিএমে রিপোর্ট করা হয়েছে। যদিও এই দুটি অর্গানোফসফেট এডিস এজিপ্টির ল্যাবরেটরি স্ট্রেনের বিরুদ্ধে অনুকূল প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছে, তবুও বিশ্বের বিভিন্ন স্থানে এই যৌগগুলির বিরুদ্ধে মশার প্রতিরোধ ক্ষমতার রিপোর্ট পাওয়া গেছে। তবে, ভেষজ ওষুধের বিরুদ্ধে প্রতিরোধ গড়ে তোলার কোনও অনুরূপ রিপোর্ট পাওয়া যায়নি। সুতরাং, ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচিতে উদ্ভিদবিদ্যাকে রাসায়নিক কীটনাশকের সম্ভাব্য বিকল্প হিসাবে বিবেচনা করা হয়।
থাইমেটফসের সাথে শক্তিশালী টারপেনয়েড এবং টারপেনয়েড থেকে তৈরি ২৮টি বাইনারি সংমিশ্রণ (১:১) এর উপর লার্ভিসাইডাল প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং ৯টি সংমিশ্রণকে সিনারজিস্টিক, ১৪টি অ্যান্টাগোনিস্টিক এবং ৫টি অ্যান্টাগোনিস্টিক বলে প্রমাণিত হয়েছিল। কোনও প্রভাব ছিল না। অন্যদিকে, প্রাপ্তবয়স্কদের ক্ষমতার জৈব পরীক্ষায়, ৭টি সংমিশ্রণকে সিনারজিস্টিক, ১৫টি সংমিশ্রণকে সিনারজিস্টিক এবং ৬টি সংমিশ্রণকে কোনও প্রভাব ছিল না বলে জানা গেছে। নির্দিষ্ট সংমিশ্রণগুলি বিভিন্ন গুরুত্বপূর্ণ পথে একই সাথে মিথস্ক্রিয়াকারী যৌগগুলির কারণে, অথবা একটি নির্দিষ্ট জৈবিক পথের বিভিন্ন মূল এনজাইমের ক্রমিক বাধার কারণে সিনারজিস্টিক প্রভাব তৈরি করে। ডায়ালাইল ডাইসালফাইড, ইউক্যালিপটাস বা ইউজেনলের সাথে লিমোনিনের সংমিশ্রণ ছোট এবং বৃহৎ উভয় ক্ষেত্রেই সিনারজিস্টিক বলে প্রমাণিত হয়েছিল (সারণী ৬), যেখানে ইউক্যালিপটাস বা α-পিনেনের সাথে এর সংমিশ্রণ লার্ভার উপর বিরোধমূলক প্রভাব ফেলে বলে প্রমাণিত হয়েছিল। গড়ে, লিমোনিন একটি ভালো সিনার্জিস্ট বলে মনে হয়, সম্ভবত মিথাইল গ্রুপের উপস্থিতি, স্ট্র্যাটাম কর্নিয়ামে ভালো অনুপ্রবেশ এবং কর্মের একটি ভিন্ন প্রক্রিয়ার কারণে52,53। পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছে যে লিমোনিন পোকামাকড়ের কিউটিকল (সংস্পর্শের বিষাক্ততা) ভেদ করে বিষাক্ত প্রভাব ফেলতে পারে, পাচনতন্ত্রকে প্রভাবিত করে (অ্যান্টিফিডেন্ট), অথবা শ্বাসযন্ত্রকে প্রভাবিত করে (ধোঁয়াশা কার্যকলাপ), 54 যখন ইউজেনলের মতো ফিনাইলপ্রোপানোয়েড বিপাকীয় এনজাইমগুলিকে প্রভাবিত করতে পারে 55। অতএব, বিভিন্ন কর্ম প্রক্রিয়া সহ যৌগগুলির সংমিশ্রণ মিশ্রণের সামগ্রিক মারাত্মক প্রভাব বাড়িয়ে তুলতে পারে। ইউক্যালিপটল ডায়ালাইল ডাইসালফাইড, ইউক্যালিপটাস বা α-পিনিনের সাথে সমন্বয়মূলক বলে প্রমাণিত হয়েছে, তবে অন্যান্য যৌগের সাথে অন্যান্য সংমিশ্রণগুলি হয় অ-লার্ভিসাইডাল বা বিরোধী ছিল। প্রাথমিক গবেষণায় দেখা গেছে যে ইউক্যালিপটলের অ্যাসিটাইলকোলিনস্টেরেজ (AChE), সেইসাথে অক্টামিন এবং GABA রিসেপ্টরগুলিতে প্রতিরোধমূলক কার্যকলাপ রয়েছে56। যেহেতু চক্রীয় মনোটারপেন, ইউক্যালিপটল, ইউজেনল ইত্যাদির নিউরোটক্সিক ক্রিয়াকলাপের মতো একই ধরণের ক্রিয়া প্রক্রিয়া থাকতে পারে, 57 যার ফলে পারস্পরিক বাধার মাধ্যমে তাদের সম্মিলিত প্রভাব হ্রাস পায়। একইভাবে, ডায়ালিল ডাইসালফাইড, α-পিনেন এবং লিমোনিনের সাথে টেমেফোসের সংমিশ্রণটি সমন্বয়মূলক বলে প্রমাণিত হয়েছে, যা ভেষজ পণ্য এবং সিন্থেটিক অর্গানোফসফেটের মধ্যে সমন্বয়মূলক প্রভাবের পূর্ববর্তী প্রতিবেদনগুলিকে সমর্থন করে।
এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে ইউডেসমল এবং ইউক্যালিপটলের সংমিশ্রণে একটি সমন্বয়মূলক প্রভাব দেখা গেছে, সম্ভবত তাদের বিভিন্ন রাসায়নিক কাঠামোর কারণে তাদের কর্মপদ্ধতির ভিন্নতার কারণে। ইউডেসমল (একটি সেসকুইটারপিন) শ্বাসযন্ত্রের উপর প্রভাব ফেলতে পারে 59 এবং ইউক্যালিপটল (একটি মনোটারপিন) অ্যাসিটাইলকোলিনেস্টেরেজ 60 কে প্রভাবিত করতে পারে। দুই বা ততোধিক লক্ষ্যস্থলে উপাদানগুলির সহ-সংস্পর্শে সংমিশ্রণের সামগ্রিক মারাত্মক প্রভাব বৃদ্ধি পেতে পারে। প্রাপ্তবয়স্ক পদার্থের জৈব পরীক্ষায়, ম্যালাথিয়নকে কারভোন বা ইউক্যালিপটল বা ইউক্যালিপটল বা ডায়ালিল ডাইসালফাইড বা α-পিনিনের সাথে সমন্বয়মূলক বলে প্রমাণিত হয়েছে, যা ইঙ্গিত করে যে এটি লিমোনিন এবং ডাই যোগ করার সাথে সমন্বয়মূলক। অ্যালাইল ট্রাইসালফাইড বাদে টেরপিন যৌগের পুরো পোর্টফোলিওর জন্য ভাল সমন্বয়মূলক অ্যালার্জিক প্রার্থী। থাঙ্গাম এবং ক্যাথিরেসান 61 ভেষজ নির্যাসের সাথে ম্যালাথিয়নের সমন্বয়মূলক প্রভাবের অনুরূপ ফলাফলও রিপোর্ট করেছে। এই সমন্বয়মূলক প্রতিক্রিয়া পোকামাকড়ের ডিটক্সিফাইং এনজাইমের উপর ম্যালাথিয়ন এবং ফাইটোকেমিক্যালের সম্মিলিত বিষাক্ত প্রভাবের কারণে হতে পারে। ম্যালাথিয়নের মতো অর্গানোফসফেটগুলি সাধারণত সাইটোক্রোম P450 এস্টারেজ এবং মনোঅক্সিজেনেস 62,63,64 কে বাধা দিয়ে কাজ করে। অতএব, ম্যালাথিয়নকে এই ক্রিয়া প্রক্রিয়াগুলির সাথে এবং টারপেনগুলিকে বিভিন্ন ক্রিয়া প্রক্রিয়াগুলির সাথে একত্রিত করলে মশার উপর সামগ্রিক মারাত্মক প্রভাব বৃদ্ধি পেতে পারে।
অন্যদিকে, বিরোধিতা নির্দেশ করে যে নির্বাচিত যৌগগুলি প্রতিটি যৌগের তুলনায় সংমিশ্রণে কম সক্রিয়। কিছু সংমিশ্রণে বিরোধিতার কারণ হতে পারে যে একটি যৌগ শোষণ, বিতরণ, বিপাক বা নিঃসরণের হার পরিবর্তন করে অন্য যৌগের আচরণ পরিবর্তন করে। প্রাথমিক গবেষকরা এটিকে ওষুধের সংমিশ্রণে বিরোধিতার কারণ হিসাবে বিবেচনা করেছিলেন। অণু সম্ভাব্য প্রক্রিয়া 65। একইভাবে, বিরোধিতার সম্ভাব্য কারণগুলি একই ধরণের কর্ম প্রক্রিয়া, একই রিসেপ্টর বা লক্ষ্যস্থলের জন্য উপাদান যৌগের প্রতিযোগিতার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে। কিছু ক্ষেত্রে, লক্ষ্য প্রোটিনের অ-প্রতিযোগিতামূলক বাধাও ঘটতে পারে। এই গবেষণায়, দুটি অর্গানোসালফার যৌগ, ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড, বিরোধী প্রভাব দেখিয়েছে, সম্ভবত একই লক্ষ্যস্থলের জন্য প্রতিযোগিতার কারণে। একইভাবে, এই দুটি সালফার যৌগ বিরোধী প্রভাব দেখিয়েছে এবং ইউডেসমল এবং α-পিনেনের সাথে মিলিত হলে কোনও প্রভাব পড়েনি। ইউডেসমল এবং আলফা-পাইনিন প্রকৃতিতে চক্রাকার, যেখানে ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড প্রকৃতিতে অ্যালিফ্যাটিক। রাসায়নিক কাঠামোর উপর ভিত্তি করে, এই যৌগগুলির সংমিশ্রণ সামগ্রিক প্রাণঘাতী কার্যকলাপ বৃদ্ধি করা উচিত কারণ তাদের লক্ষ্যস্থলগুলি সাধারণত ভিন্ন হয়34,47, কিন্তু পরীক্ষামূলকভাবে আমরা বৈরিতা খুঁজে পেয়েছি, যা মিথস্ক্রিয়ার ফলে কিছু অজানা জীবের সিস্টেমে এই যৌগগুলির ভূমিকার কারণে হতে পারে। একইভাবে, সিনোল এবং α-পাইনিনের সংমিশ্রণ বিরোধী প্রতিক্রিয়া তৈরি করেছিল, যদিও গবেষকরা পূর্বে রিপোর্ট করেছিলেন যে দুটি যৌগের কর্মের বিভিন্ন লক্ষ্য রয়েছে47,60। যেহেতু উভয় যৌগই চক্রাকার মনোটারপেন, তাই কিছু সাধারণ লক্ষ্যস্থল থাকতে পারে যা বন্ধনের জন্য প্রতিযোগিতা করতে পারে এবং অধ্যয়ন করা সম্মিলিত জোড়ার সামগ্রিক বিষাক্ততাকে প্রভাবিত করতে পারে।
LC50 মান এবং পর্যবেক্ষণকৃত মৃত্যুহারের উপর ভিত্তি করে, দুটি সেরা সিনারজিস্টিক টারপিন সংমিশ্রণ নির্বাচন করা হয়েছিল, যথা কারভোন + লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল + ইউডেসমল, সেইসাথে টারপেনের সাথে সিন্থেটিক অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়ন। ম্যালাথিয়ন + ইউডেসমল যৌগের সর্বোত্তম সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণ একটি প্রাপ্তবয়স্ক কীটনাশক জৈব পরীক্ষায় পরীক্ষা করা হয়েছিল। এই কার্যকর সংমিশ্রণগুলি তুলনামূলকভাবে বড় এক্সপোজার স্পেসে বিপুল সংখ্যক ব্যক্তির বিরুদ্ধে কাজ করতে পারে কিনা তা নিশ্চিত করার জন্য বৃহৎ পোকামাকড়ের উপনিবেশগুলিকে লক্ষ্য করুন। এই সমস্ত সংমিশ্রণগুলি পোকামাকড়ের বৃহৎ ঝাঁকের বিরুদ্ধে একটি সিনারজিস্টিক প্রভাব প্রদর্শন করে। এডিস এজিপ্টি লার্ভার বৃহৎ জনসংখ্যার বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা একটি সর্বোত্তম সিনারজিস্টিক লার্ভিসাইডাল সংমিশ্রণের জন্য একই রকম ফলাফল পাওয়া গেছে। সুতরাং, এটি বলা যেতে পারে যে উদ্ভিদ EO যৌগের কার্যকর সিনারজিস্টিক লার্ভিসাইডাল এবং অ্যাডাল্টিসাইডাল সংমিশ্রণ বিদ্যমান সিন্থেটিক রাসায়নিকের বিরুদ্ধে একটি শক্তিশালী প্রার্থী এবং এডিস এজিপ্টি জনসংখ্যা নিয়ন্ত্রণে আরও ব্যবহার করা যেতে পারে। একইভাবে, মশাদের উপর থাইমেটফস বা ম্যালাথিয়নের মাত্রা কমাতে কৃত্রিম লার্ভিসাইড বা অ্যাডাল্টিসাইডের কার্যকর সংমিশ্রণ টারপেনের সাথেও ব্যবহার করা যেতে পারে। এই শক্তিশালী সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণগুলি এডিস মশার মধ্যে ওষুধ প্রতিরোধের বিবর্তনের উপর ভবিষ্যতের গবেষণার জন্য সমাধান প্রদান করতে পারে।
এডিস ইজিপ্টাইয়ের ডিম ডিব্রুগড়ের আঞ্চলিক চিকিৎসা গবেষণা কেন্দ্র, ইন্ডিয়ান কাউন্সিল অফ মেডিকেল রিসার্চ থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং গৌহাটি বিশ্ববিদ্যালয়ের প্রাণিবিদ্যা বিভাগে নিয়ন্ত্রিত তাপমাত্রা (২৮ ± ১ °সে) এবং আর্দ্রতা (৮৫ ± ৫%) এর অধীনে নিম্নলিখিত পরিস্থিতিতে রাখা হয়েছিল: আরিভোলি ইত্যাদি বর্ণনা করা হয়েছে। ডিম ফোটার পর, লার্ভাকে লার্ভা জাতীয় খাবার (কুকুরের বিস্কুটের গুঁড়ো এবং খামির ৩:১ অনুপাতে) খাওয়ানো হয়েছিল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের ১০% গ্লুকোজ দ্রবণ খাওয়ানো হয়েছিল। বের হওয়ার তৃতীয় দিন থেকে শুরু করে, প্রাপ্তবয়স্ক স্ত্রী মশাদের অ্যালবিনো ইঁদুরের রক্ত ​​চুষতে দেওয়া হয়েছিল। ফিল্টার পেপার একটি গ্লাস জলে ভিজিয়ে ডিম পাড়ার খাঁচায় রাখুন।
নির্বাচিত উদ্ভিদের নমুনা যেমন ইউক্যালিপটাস পাতা (Myrtaceae), পবিত্র তুলসী (Lamiaceae), পুদিনা (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) এবং allium bulbs (Amaryllidaceae)। গুয়াহাটি থেকে সংগৃহীত এবং গৌহাটি বিশ্ববিদ্যালয়ের উদ্ভিদবিদ্যা বিভাগ দ্বারা চিহ্নিত। সংগৃহীত উদ্ভিদের নমুনা (500 গ্রাম) 6 ঘন্টা ধরে একটি Clevenger যন্ত্র ব্যবহার করে হাইড্রোডিস্টিলেশনের শিকার হয়েছিল। নিষ্কাশিত EO পরিষ্কার কাচের শিশিতে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং আরও গবেষণার জন্য 4°C তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল।
লার্ভিসাইডাল বিষাক্ততা সামান্য পরিবর্তিত বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থার পদ্ধতি 67 ব্যবহার করে অধ্যয়ন করা হয়েছিল। DMSO কে ইমালসিফায়ার হিসাবে ব্যবহার করুন। প্রতিটি EO ঘনত্ব প্রাথমিকভাবে 100 এবং 1000 ppm পরীক্ষা করা হয়েছিল, প্রতিটি প্রতিলিপিতে 20 টি লার্ভা প্রকাশ করা হয়েছিল। ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, একটি ঘনত্বের পরিসর প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং 1 ঘন্টা থেকে 6 ঘন্টা (1 ঘন্টা ব্যবধানে) এবং 24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টা চিকিত্সার পরে মৃত্যুহার রেকর্ড করা হয়েছিল। 24, 48 এবং 72 ঘন্টা এক্সপোজারের পরে সাবলেথাল ঘনত্ব (LC50) নির্ধারণ করা হয়েছিল। প্রতিটি ঘনত্ব তিনটি প্রতিলিপিতে পরীক্ষা করা হয়েছিল, একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (শুধুমাত্র জল) এবং একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (DMSO-প্রক্রিয়াজাত জল) সহ। যদি পিউপেশন ঘটে এবং নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর 10% এর বেশি লার্ভা মারা যায়, তাহলে পরীক্ষাটি পুনরাবৃত্তি করা হয়। যদি নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীতে মৃত্যুর হার 5-10% এর মধ্যে হয়, তাহলে অ্যাবট সংশোধন সূত্র 68 ব্যবহার করুন।
রামার এট আল. 69 দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতিটি দ্রাবক হিসেবে অ্যাসিটোন ব্যবহার করে প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে জৈব পরীক্ষা করার জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রতিটি EO প্রাথমিকভাবে 100 এবং 1000 পিপিএম ঘনত্বে প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টি মশার বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা হয়েছিল। প্রতিটি প্রস্তুত দ্রবণের 2 মিলি হোয়াটম্যান নম্বরে প্রয়োগ করুন। ফিল্টার পেপারের 1 টুকরো (আকার 12 x 15 সেমি 2) এবং অ্যাসিটোনকে 10 মিনিটের জন্য বাষ্পীভূত হতে দিন। নিয়ন্ত্রণ হিসাবে মাত্র 2 মিলি অ্যাসিটোন দিয়ে প্রক্রিয়া করা ফিল্টার পেপার ব্যবহার করা হয়েছিল। অ্যাসিটোন বাষ্পীভূত হওয়ার পরে, প্রক্রিয়া করা ফিল্টার পেপার এবং নিয়ন্ত্রণ ফিল্টার পেপার একটি নলাকার নল (10 সেমি গভীর) মধ্যে স্থাপন করা হয়। 3 থেকে 4 দিন বয়সী দশটি অ-রক্ত-খাওয়া মশা প্রতিটি ঘনত্বের তিনটি প্রতিলিপিতে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল। প্রাথমিক পরীক্ষার ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, নির্বাচিত তেলের বিভিন্ন ঘনত্ব পরীক্ষা করা হয়েছিল। মশা ছাড়ার ১ ঘন্টা, ২ ঘন্টা, ৩ ঘন্টা, ৪ ঘন্টা, ৫ ঘন্টা, ৬ ঘন্টা, ২৪ ঘন্টা, ৪৮ ঘন্টা এবং ৭২ ঘন্টা পরে মৃত্যুহার রেকর্ড করা হয়েছে। ২৪ ঘন্টা, ৪৮ ঘন্টা এবং ৭২ ঘন্টার এক্সপোজার সময়ের জন্য LC50 মান গণনা করুন। যদি নিয়ন্ত্রণ লটের মৃত্যুর হার ২০% এর বেশি হয়, তাহলে পুরো পরীক্ষাটি পুনরাবৃত্তি করুন। একইভাবে, যদি নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে মৃত্যুর হার ৫% এর বেশি হয়, তাহলে অ্যাবটের সূত্র ব্যবহার করে চিকিত্সা করা নমুনার ফলাফল সামঞ্জস্য করুন68।
নির্বাচিত অপরিহার্য তেলের উপাদান যৌগ বিশ্লেষণের জন্য গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি (Agilent 7890A) এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি (Accu TOF GCv, Jeol) করা হয়েছিল। GC-তে একটি FID ডিটেক্টর এবং একটি কৈশিক কলাম (HP5-MS) ছিল। বাহক গ্যাস ছিল হিলিয়াম, প্রবাহ হার ছিল 1 মিলি/মিনিট। জিসি প্রোগ্রামটি অ্যালিয়াম স্যাটিভামকে ১০:৮০-১এম-৮-২২০-৫এম-৮-২৭০-৯এম এবং ওসিমাম সেন্টামকে ১০:৮০-৩এম-৮-২০০-৩এম-১০-২৭৫-১এম-৫ – ২৮০, পুদিনা ১০:৮০-১এম-৮-২০০-৫এম-৮-২৭৫-১এম-৫-২৮০, ইউক্যালিপটাসের ২০.৬০-১এম-১০-২০০-৩এম-৩০-২৮০ এবং লাল রঙের জন্য এক হাজার স্তরের জন্য তারা ১০:৬০-১এম-৮-২২০-৫এম-৮-২৭০-৩এম নির্ধারণ করে।
প্রতিটি EO-এর প্রধান যৌগগুলি GC ক্রোমাটোগ্রাম এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি ফলাফল (NIST 70 স্ট্যান্ডার্ড ডাটাবেস থেকে উল্লেখ করা হয়েছে) থেকে গণনা করা ক্ষেত্রফলের শতাংশের উপর ভিত্তি করে চিহ্নিত করা হয়েছিল।
প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ GC-MS ফলাফলের উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছিল এবং আরও জৈব পরীক্ষার জন্য সিগমা-অ্যালড্রিচ থেকে 98-99% বিশুদ্ধতায় কেনা হয়েছিল। উপরে বর্ণিত হিসাবে এডিস এজিপ্টির বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের কার্যকারিতার জন্য যৌগগুলি পরীক্ষা করা হয়েছিল। সর্বাধিক ব্যবহৃত সিন্থেটিক লার্ভিসাইডস টেমফোসেট (সিগমা অ্যালড্রিচ) এবং প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য ম্যালাথিয়ন (সিগমা অ্যালড্রিচ) একই পদ্ধতি অনুসরণ করে নির্বাচিত EO যৌগগুলির সাথে তাদের কার্যকারিতা তুলনা করার জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।
নির্বাচিত টারপিন যৌগ এবং টারপিন যৌগ এবং বাণিজ্যিক অর্গানোফসফেট (টাইলফস এবং ম্যালাথিয়ন) এর বাইনারি মিশ্রণগুলি প্রতিটি প্রার্থী যৌগের LC50 ডোজ 1:1 অনুপাতে মিশিয়ে প্রস্তুত করা হয়েছিল। প্রস্তুত সংমিশ্রণগুলি উপরে বর্ণিত এডিস এজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে পরীক্ষা করা হয়েছিল। প্রতিটি জৈব পরীক্ষা প্রতিটি সংমিশ্রণের জন্য তিনটি করে এবং প্রতিটি সংমিশ্রণে উপস্থিত পৃথক যৌগগুলির জন্য তিনটি করে করা হয়েছিল। 24 ঘন্টা পরে লক্ষ্য পোকামাকড়ের মৃত্যু রেকর্ড করা হয়েছিল। নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে একটি বাইনারি মিশ্রণের জন্য প্রত্যাশিত মৃত্যুর হার গণনা করুন।
যেখানে E = বাইনারি সংমিশ্রণের প্রতিক্রিয়ায় এডিস ইজিপ্টি মশার প্রত্যাশিত মৃত্যুহার, অর্থাৎ সংযোগ (A + B)।
Pavla52 দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি দ্বারা গণনা করা χ2 মানের উপর ভিত্তি করে প্রতিটি বাইনারি মিশ্রণের প্রভাবকে synergistic, antagonistic, অথবা No effect হিসেবে লেবেল করা হয়েছিল। নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে প্রতিটি সংমিশ্রণের জন্য χ2 মান গণনা করুন।
যখন গণনা করা χ2 মান স্বাধীনতার সংশ্লিষ্ট ডিগ্রির (95% আত্মবিশ্বাস ব্যবধান) জন্য টেবিল মানের চেয়ে বেশি হয় এবং যদি পর্যবেক্ষণ করা মৃত্যুহার প্রত্যাশিত মৃত্যুহারকে ছাড়িয়ে যায়, তখন একটি সংমিশ্রণের প্রভাবকে সিনেরজিস্টিক হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হত। একইভাবে, যদি কোনও সংমিশ্রণের জন্য গণনা করা χ2 মান স্বাধীনতার কিছু ডিগ্রির সাথে টেবিলের মানের চেয়ে বেশি হয়, কিন্তু পর্যবেক্ষণ করা মৃত্যুহার প্রত্যাশিত মৃত্যুহারের চেয়ে কম হয়, তাহলে চিকিৎসাটি বিরোধী বলে বিবেচিত হবে। এবং যদি কোনও সংমিশ্রণে χ2 এর গণনা করা মান স্বাধীনতার সংশ্লিষ্ট ডিগ্রির টেবিল মানের চেয়ে কম হয়, তাহলে সংমিশ্রণের কোনও প্রভাব নেই বলে বিবেচিত হবে।
তিন থেকে চারটি সম্ভাব্য সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণ (১০০টি লার্ভা এবং ৫০টি লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্ক পোকামাকড়ের কার্যকলাপ) বিপুল সংখ্যক পোকামাকড়ের বিরুদ্ধে পরীক্ষার জন্য নির্বাচন করা হয়েছিল। প্রাপ্তবয়স্কদের) উপরে বর্ণিত পদ্ধতি অনুসরণ করা হয়েছে। মিশ্রণের পাশাপাশি, নির্বাচিত মিশ্রণে উপস্থিত পৃথক যৌগগুলি সমান সংখ্যক এডিস এজিপ্টি লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্কদের উপরও পরীক্ষা করা হয়েছিল। সংমিশ্রণের অনুপাত হল একটি প্রার্থী যৌগের এক অংশ LC50 ডোজ এবং অন্য উপাদান যৌগের LC50 ডোজ। প্রাপ্তবয়স্কদের কার্যকলাপ জৈব পরীক্ষায়, নির্বাচিত যৌগগুলিকে দ্রাবক অ্যাসিটোনে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং 1300 cm3 নলাকার প্লাস্টিকের পাত্রে মোড়ানো ফিল্টার পেপারে প্রয়োগ করা হয়েছিল। অ্যাসিটোনটি 10 ​​মিনিটের জন্য বাষ্পীভূত করা হয়েছিল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের মুক্তি দেওয়া হয়েছিল। একইভাবে, লার্ভিসাইডাল জৈব পরীক্ষায়, LC50 প্রার্থী যৌগের ডোজগুলি প্রথমে সমান পরিমাণে DMSO দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং তারপর 1300 cc প্লাস্টিকের পাত্রে সংরক্ষিত 1 লিটার জলের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং লার্ভাগুলি মুক্তি দেওয়া হয়েছিল।
LC50 মান গণনা করার জন্য SPSS (সংস্করণ 16) এবং Minitab সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে 71টি রেকর্ডকৃত মৃত্যুহারের তথ্যের সম্ভাব্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।