এডিস ইজিপ্টির (ডিপ্টেরা: কিউলিসিডে) বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্ক প্রতিকার হিসাবে উদ্ভিদের প্রয়োজনীয় তেলের উপর ভিত্তি করে টেরপেন যৌগগুলির সংমিশ্রণ

Nature.com পরিদর্শন করার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ.আপনি যে ব্রাউজারের সংস্করণ ব্যবহার করছেন সেটি সীমিত সিএসএস সমর্থন করে।সেরা ফলাফলের জন্য, আমরা আপনাকে আপনার ব্রাউজারের একটি নতুন সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিই (বা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্য মোড অক্ষম করুন)।ইতিমধ্যে, চলমান সমর্থন নিশ্চিত করতে, আমরা স্টাইলিং বা জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই সাইটটি দেখাচ্ছি।
উদ্ভিদ থেকে প্রাপ্ত কীটনাশক যৌগগুলির সংমিশ্রণগুলি কীটপতঙ্গের বিরুদ্ধে সমন্বয়বাদী বা বিরোধী মিথস্ক্রিয়া প্রদর্শন করতে পারে।এডিস মশা দ্বারা বাহিত রোগের দ্রুত বিস্তার এবং ঐতিহ্যগত কীটনাশকের প্রতি এডিস মশার জনসংখ্যার ক্রমবর্ধমান প্রতিরোধের পরিপ্রেক্ষিতে, উদ্ভিদের প্রয়োজনীয় তেলের উপর ভিত্তি করে টারপেন যৌগের 28 টি সংমিশ্রণ তৈরি করা হয়েছিল এবং এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ের বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা হয়েছিল।পাঁচটি উদ্ভিদ অপরিহার্য তেল (EOs) প্রাথমিকভাবে তাদের লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের ব্যবহারের কার্যকারিতার জন্য মূল্যায়ন করা হয়েছিল এবং GC-MS ফলাফলের ভিত্তিতে প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল।প্রধান চিহ্নিত যৌগগুলি কেনা হয়েছিল, যথা ডায়ালিল ডিসালফাইড, ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড, কারভোন, লিমোনিন, ইউজেনল, মিথাইল ইউজেনল, ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল এবং মশা আলফা-পিনিন।এই যৌগগুলির বাইনারি সংমিশ্রণগুলি তখন সাবলেথাল ডোজ ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং তাদের সিনারজিস্টিক এবং বিরোধী প্রভাবগুলি পরীক্ষা এবং নির্ধারণ করা হয়েছিল।সেরা লার্ভিসাইডাল কম্পোজিশন প্রাপ্ত হয় লিমোনিনের সাথে ডায়ালাইল ডাইসলফাইড মিশিয়ে, এবং সেরা অ্যাডাল্টিসাইডাল কম্পোজিশন প্রাপ্ত হয় লিমোনিনের সাথে কার্ভোন মিশিয়ে।বাণিজ্যিকভাবে ব্যবহৃত সিন্থেটিক লার্ভিসাইড টেম্পোস এবং প্রাপ্তবয়স্ক ড্রাগ ম্যালাথিয়ন আলাদাভাবে এবং টারপেনয়েডের সাথে বাইনারি সংমিশ্রণে পরীক্ষা করা হয়েছিল।ফলাফলে দেখা গেছে যে টেমেফোস এবং ডায়ালাইল ডাইসালফাইড এবং ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ ছিল সবচেয়ে কার্যকরী সংমিশ্রণ।এই শক্তিশালী সংমিশ্রণগুলি এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে ব্যবহারের সম্ভাবনা রাখে।
উদ্ভিদ অপরিহার্য তেল (EOs) হল সেকেন্ডারি মেটাবোলাইট যার মধ্যে বিভিন্ন বায়োঅ্যাকটিভ যৌগ রয়েছে এবং কৃত্রিম কীটনাশকের বিকল্প হিসেবে ক্রমশ গুরুত্বপূর্ণ হয়ে উঠছে।এগুলি কেবল পরিবেশ বান্ধব এবং ব্যবহারকারী-বান্ধবই নয়, তবে এগুলি বিভিন্ন বায়োঅ্যাকটিভ যৌগের মিশ্রণ, যা ওষুধ প্রতিরোধের সম্ভাবনাও হ্রাস করে।GC-MS প্রযুক্তি ব্যবহার করে, গবেষকরা বিভিন্ন উদ্ভিদের প্রয়োজনীয় তেলের উপাদান পরীক্ষা করেছেন এবং 17,500টি সুগন্ধী উদ্ভিদ থেকে 3,000টিরও বেশি যৌগ চিহ্নিত করেছেন, যার বেশিরভাগই কীটনাশক বৈশিষ্ট্যের জন্য পরীক্ষা করা হয়েছে এবং রিপোর্ট করা হয়েছে যে কীটনাশক প্রভাব রয়েছে3,4।কিছু গবেষণায় হাইলাইট করা হয়েছে যে যৌগের প্রধান উপাদানের বিষাক্ততা তার অপরিশোধিত ইথিলিন অক্সাইডের সমান বা তার চেয়ে বেশি।কিন্তু স্বতন্ত্র যৌগগুলির ব্যবহার আবার প্রতিরোধের বিকাশের জন্য জায়গা ছেড়ে দিতে পারে, যেমন রাসায়নিক কীটনাশক 5,6 এর ক্ষেত্রে।অতএব, বর্তমান ফোকাস কীটনাশক কার্যকারিতা উন্নত করতে এবং লক্ষ্য পোকার জনসংখ্যার প্রতিরোধের সম্ভাবনা কমাতে ইথিলিন অক্সাইড-ভিত্তিক যৌগগুলির মিশ্রণ প্রস্তুত করার উপর।EO-তে উপস্থিত স্বতন্ত্র সক্রিয় যৌগগুলি EO-এর সামগ্রিক ক্রিয়াকলাপকে প্রতিফলিত করে সংমিশ্রণে সিনারজিস্টিক বা বিরোধী প্রভাব প্রদর্শন করতে পারে, এটি একটি সত্য যা পূর্ববর্তী গবেষকদের দ্বারা পরিচালিত গবেষণায় ভালভাবে জোর দেওয়া হয়েছে 7,8।ভেক্টর কন্ট্রোল প্রোগ্রাম এছাড়াও EO এবং এর উপাদান অন্তর্ভুক্ত.কিউলেক্স এবং অ্যানোফিলিস মশার উপর অপরিহার্য তেলের মশা নিধন কার্যকলাপ ব্যাপকভাবে অধ্যয়ন করা হয়েছে।সামগ্রিক বিষাক্ততা বাড়াতে এবং পার্শ্বপ্রতিক্রিয়া কমাতে বাণিজ্যিকভাবে ব্যবহৃত সিন্থেটিক কীটনাশকের সাথে বিভিন্ন উদ্ভিদের সমন্বয় করে বেশ কিছু গবেষণায় কার্যকর কীটনাশক তৈরি করার চেষ্টা করা হয়েছে9।কিন্তু এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে এই ধরনের যৌগের গবেষণা বিরল।চিকিৎসা বিজ্ঞানের অগ্রগতি এবং ওষুধ ও ভ্যাকসিনের উন্নয়ন কিছু ভেক্টর-বাহিত রোগের বিরুদ্ধে লড়াই করতে সাহায্য করেছে।কিন্তু ভাইরাসের বিভিন্ন সেরোটাইপের উপস্থিতি, এডিস ইজিপ্টি মশা দ্বারা সংক্রমিত হওয়ার কারণে টিকাদান কর্মসূচি ব্যর্থ হয়েছে।অতএব, যখন এই ধরনের রোগ দেখা দেয়, তখন রোগের বিস্তার রোধ করার জন্য ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচিই একমাত্র বিকল্প।বর্তমান পরিস্থিতিতে, এডিস ইজিপ্টির নিয়ন্ত্রণ অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ কারণ এটি বিভিন্ন ভাইরাস এবং তাদের সেরোটাইপগুলি ডেঙ্গু জ্বর, জিকা, ডেঙ্গু হেমোরেজিক জ্বর, হলুদ জ্বর ইত্যাদির একটি মূল ভেক্টর। সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য বিষয় হল যে সংখ্যা প্রায় সব ভেক্টর-জনিত এডিস-জনিত রোগের ঘটনা প্রতি বছর মিশরে বাড়ছে এবং বিশ্বব্যাপী বাড়ছে।অতএব, এই প্রেক্ষাপটে, এডিস ইজিপ্টি জনগোষ্ঠীর জন্য পরিবেশবান্ধব এবং কার্যকর নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থা গড়ে তোলার জরুরি প্রয়োজন রয়েছে।এই বিষয়ে সম্ভাব্য প্রার্থীরা হলেন EO, তাদের উপাদান যৌগ এবং তাদের সংমিশ্রণ।তাই, এই গবেষণায় এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে কীটনাশক বৈশিষ্ট্যযুক্ত (যেমন, পুদিনা, পবিত্র বেসিল, ইউক্যালিপটাস স্পটড, অ্যালিয়াম সালফার এবং মেলালেউকা) পাঁচটি উদ্ভিদ থেকে মূল উদ্ভিদ ইও যৌগের কার্যকর সমন্বয়মূলক সংমিশ্রণ সনাক্ত করার চেষ্টা করা হয়েছে।
সমস্ত নির্বাচিত EOs 0.42 থেকে 163.65 পিপিএম পর্যন্ত 24-ঘন্টা LC50 সহ এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে সম্ভাব্য লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছে।পিপারমিন্ট (এমপি) ইও-র জন্য সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল অ্যাক্টিভিটি 24 ঘণ্টায় 0.42 পিপিএম-এর LC50 মান সহ রেকর্ড করা হয়েছিল, তারপরে 24 ঘন্টা (টেবিল 1) এ 16.19 পিপিএম এর LC50 মান সহ রসুন (এএস)।
Ocimum Sainttum, Os EO ব্যতীত, 24-ঘন্টা এক্সপোজার সময়ের মধ্যে LC50 মান 23.37 থেকে 120.16 পিপিএম-এর মধ্যে সহ অন্যান্য চারটি স্ক্রীন করা EO-তে সুস্পষ্ট অ্যালারসিডাল প্রভাব দেখা গেছে।থাইমোফিলাস স্ট্রিয়াটা (সিএল) ইও এক্সপোজারের 24 ঘন্টার মধ্যে 23.37 পিপিএম এর 23.37 পিপিএম মানের প্রাপ্তবয়স্কদের হত্যা করার ক্ষেত্রে সবচেয়ে কার্যকর ছিল, তারপরে ইউক্যালিপটাস ম্যাকুলাটা (এম) যার LC50 মান ছিল 101.91 পিপিএম (সারণী 1)।অন্যদিকে, Os-এর জন্য LC50 মান এখনও নির্ধারণ করা হয়নি কারণ সর্বোচ্চ মৃত্যুহার 53% সর্বোচ্চ মাত্রায় রেকর্ড করা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র 3)।
প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান উপাদান যৌগ চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং NIST লাইব্রেরি ডাটাবেস ফলাফল, GC ক্রোমাটোগ্রাম এলাকা শতাংশ, এবং MS স্পেকট্রা ফলাফল (সারণী 2) এর উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছিল।EO As-এর জন্য, চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি হল ডায়ালিল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড;EO Mp-এর জন্য চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি হল কার্ভোন এবং লিমোনিন, EO Em-এর জন্য চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি হল eudesmol এবং eucalyptol;EO Os-এর জন্য, চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি হল ইউজেনল এবং মিথাইল ইউজেনল, এবং EO Cl-এর জন্য চিহ্নিত প্রধান যৌগগুলি হল eugenol এবং α-pinene (চিত্র 1, পরিপূরক চিত্র 5-8, পরিপূরক সারণী 1-5)।
নির্বাচিত অপরিহার্য তেলের প্রধান টেরপেনয়েডের ভর স্পেকট্রোমেট্রির ফলাফল (A-ডায়ালাইল ডাইসালফাইড; বি-ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড; সি-ইউজেনল; ডি-মিথাইল ইউজেনল; ই-লিমোনিন; এফ-সুগন্ধযুক্ত সিপেরোন; জি-α-পাইনেন; এইচ-সিনোল ; আর-ইউডামল)।
মোট নয়টি যৌগ (ডায়ালিল ডিসালফাইড, ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড, ইউজেনল, মিথাইল ইউজেনল, কারভোন, লিমোনিন, ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল, α-পাইনিন) কার্যকর যৌগ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল যেগুলি EO-এর প্রধান উপাদান এবং পৃথকভাবে এডিস ইজিপটি এডিস এর বিরুদ্ধে বায়োসাইড করা হয়েছিল। পর্যায়গুলি.24 ঘন্টা এক্সপোজারের পরে 2.25 পিপিএম এর LC50 মান সহ যৌগ ইউডেসমলের সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ ছিল।ডায়ালাইল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড যৌগগুলিরও সম্ভাব্য লার্ভিসাইডাল প্রভাব রয়েছে, যার গড় সাবলেথাল ডোজ 10-20 পিপিএমের মধ্যে রয়েছে।63.35 পিপিএম, 139.29 পিপিএম এর LC50 মান সহ ইউজেনল, লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল যৌগগুলির জন্য আবার মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পরিলক্ষিত হয়েছে।এবং যথাক্রমে 24 ঘন্টা পরে 181.33 পিপিএম (সারণী 3)।যাইহোক, এমনকি সর্বোচ্চ মাত্রায় মিথাইল ইউজেনল এবং কারভোনের কোন উল্লেখযোগ্য লার্ভিসাইডাল সম্ভাব্যতা পাওয়া যায়নি, তাই LC50 মান গণনা করা হয়নি (সারণী 3)।সংশ্লেষিত লার্ভিসাইড টেমেফোসের 24 ঘন্টা এক্সপোজারের সময় এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে 0.43 পিপিএম এর গড় প্রাণঘাতী ঘনত্ব ছিল (সারণী 3, পরিপূরক সারণী 6)।
সাতটি যৌগ (ডায়ালিল ডিসালফাইড, ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড, ইউক্যালিপটল, α-পাইনিন, ইউডেসমল, লিমোনিন এবং কারভোন) কার্যকরী EO-এর প্রধান যৌগ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল এবং প্রাপ্তবয়স্ক মিশরীয় এডিস মশার বিরুদ্ধে পৃথকভাবে পরীক্ষা করা হয়েছিল।প্রোবিট রিগ্রেশন বিশ্লেষণ অনুসারে, ইউডেসমল 1.82 পিপিএম এর LC50 মানের সাথে সর্বোচ্চ সম্ভাব্যতা খুঁজে পেয়েছে, তারপরে 24-ঘন্টার এক্সপোজার সময়ে 17.60 পিপিএম এর LC50 মান সহ ইউক্যালিপটল রয়েছে।পরীক্ষিত অবশিষ্ট পাঁচটি যৌগ 140.79 থেকে 737.01 পিপিএম (সারণী 3) পর্যন্ত LC50 সহ প্রাপ্তবয়স্কদের জন্য মাঝারিভাবে ক্ষতিকারক ছিল।সিন্থেটিক অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়ন ইউডেসমলের চেয়ে কম শক্তিশালী এবং অন্য ছয়টি যৌগের চেয়ে বেশি, 24-ঘন্টা এক্সপোজার সময়কালে 5.44 পিপিএম এর LC50 মান সহ (সারণী 3, পরিপূরক সারণী 6)।
সাতটি শক্তিশালী সীসা যৌগ এবং অর্গানোফসফরাস টেমেফোসেটকে 1:1 অনুপাতে তাদের LC50 ডোজগুলির বাইনারি সংমিশ্রণ তৈরি করতে নির্বাচন করা হয়েছিল।এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল কার্যকারিতার জন্য মোট 28টি বাইনারি সংমিশ্রণ প্রস্তুত এবং পরীক্ষা করা হয়েছিল।নয়টি সংমিশ্রণ সিনারজিস্টিক হিসাবে পাওয়া গেছে, 14টি সংমিশ্রণ বিরোধী ছিল এবং পাঁচটি সংমিশ্রণ লার্ভিসাইডাল ছিল না।সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণগুলির মধ্যে, ডায়ালিল ডিসালফাইড এবং টেমোফলের সংমিশ্রণটি সবচেয়ে কার্যকর ছিল, 24 ঘন্টা পরে 100% মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয় (সারণী 4)।একইভাবে, থাইমেটফসের সাথে ডায়ালাইল ডিসালফাইড এবং ইউজেনলের সাথে লিমোনিনের মিশ্রণ 98.3% (টেবিল 5) এর পর্যবেক্ষণকৃত লার্ভা মৃত্যুর সাথে ভাল সম্ভাবনা দেখায়।অবশিষ্ট 4 টি সংমিশ্রণ, যেমন ইউডেসমল প্লাস ইউক্যালিপটল, ইউডেসমল প্লাস লিমোনিন, ইউক্যালিপটল প্লাস আলফা-পাইনেন, আলফা-পাইনেন প্লাস টেমেফস, এছাড়াও উল্লেখযোগ্য লার্ভিসাইডাল কার্যকারিতা দেখায়, যেখানে মৃত্যুহার 90% এর বেশি লক্ষ্য করা গেছে।প্রত্যাশিত মৃত্যুর হার 60-75% এর কাছাকাছি।(সারণী 4)।যাইহোক, α-pinene বা ইউক্যালিপটাসের সাথে লিমোনিনের সংমিশ্রণ বিরোধী প্রতিক্রিয়া দেখায়।একইভাবে, ইউজেনল বা ইউক্যালিপটাস বা ইউডেসমল বা ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডের সাথে টেমেফোসের মিশ্রণের বিরোধী প্রভাব পাওয়া গেছে।একইভাবে, ডায়ালিল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডের সংমিশ্রণ এবং ইউডেসমল বা ইউজেনলের সাথে এই যৌগগুলির যে কোনো একটির সংমিশ্রণ তাদের লার্ভিসাইডাল ক্রিয়াতে বিরোধী।ইউজেনল বা α-পাইনিনের সাথে ইউডেসমলের সংমিশ্রণের সাথেও বৈরিতার খবর পাওয়া গেছে।
প্রাপ্তবয়স্কদের অম্লীয় কার্যকলাপের জন্য পরীক্ষিত 28টি বাইনারি মিশ্রণের মধ্যে, 7টি সংমিশ্রণ ছিল সমন্বয়বাদী, 6টির কোনো প্রভাব ছিল না এবং 15টি ছিল বিরোধী।ইউক্যালিপটাসের সাথে ইউডেসমল এবং কারভোনের সাথে লিমোনিনের মিশ্রণগুলি অন্যান্য সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণের চেয়ে বেশি কার্যকর বলে প্রমাণিত হয়েছে, মৃত্যুর হার যথাক্রমে 76% এবং 100% (সারণী 5)।ম্যালাথিয়নকে লিমোনিন এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড বাদে সমস্ত যৌগের সংমিশ্রণের সাথে একটি সিনারজিস্টিক প্রভাব প্রদর্শন করতে দেখা গেছে।অন্যদিকে, ডায়ালাইল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড এবং ইউক্যালিপটাস, বা ইউক্যালিপটল, বা কারভোন, বা লিমোনিনের সাথে উভয়ের সংমিশ্রণের মধ্যে বৈরিতা পাওয়া গেছে।একইভাবে, ইউডেসমল বা লিমোনিনের সাথে α-পাইনিন, কারভোন বা লিমোনিনের সাথে ইউক্যালিপটল এবং ইউডেসমল বা ম্যালাথিয়নের সাথে লিমোনিনের সংমিশ্রণ বিরোধী লার্ভিসাইডাল প্রভাব দেখায়।অবশিষ্ট ছয়টি সংমিশ্রণের জন্য, প্রত্যাশিত এবং পর্যবেক্ষণকৃত মৃত্যুর মধ্যে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য ছিল না (সারণী 5)।
সিনারজিস্টিক ইফেক্ট এবং সাবলেথাল ডোজগুলির উপর ভিত্তি করে, বিপুল সংখ্যক এডিস ইজিপ্টি মশার বিরুদ্ধে তাদের লার্ভিসাইডাল বিষাক্ততা চূড়ান্তভাবে নির্বাচন করা হয়েছিল এবং আরও পরীক্ষা করা হয়েছিল।ফলাফলগুলি দেখায় যে ইউজেনল-লিমোনিন, ডায়ালিল ডিসালফাইড-লিমোনিন এবং ডায়ালিল ডিসালফাইড-টাইমফোস বাইনারি সংমিশ্রণ ব্যবহার করে পর্যবেক্ষণ করা লার্ভা মৃত্যুর হার ছিল 100%, যেখানে প্রত্যাশিত লার্ভা মৃত্যুর হার ছিল 76.48%, 72.16% এবং 63.4% (T,63.6%)।.লিমোনিন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণ তুলনামূলকভাবে কম কার্যকর ছিল, 24-ঘন্টা এক্সপোজার সময়কালে 88% লার্ভা মৃত্যুর হার পরিলক্ষিত হয় (সারণী 6)।সংক্ষেপে, চারটি নির্বাচিত বাইনারি সংমিশ্রণ এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে সিনারজিস্টিক লার্ভিসাইডাল প্রভাবও প্রদর্শন করেছে যখন একটি বড় স্কেলে প্রয়োগ করা হয় (সারণী 6)।
প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টির বৃহৎ জনসংখ্যা নিয়ন্ত্রণ করার জন্য অ্যাডাল্টোসিডাল বায়োসাইয়ের জন্য তিনটি সিনারজিস্টিক সমন্বয় নির্বাচন করা হয়েছিল।বড় কীটপতঙ্গের উপনিবেশগুলিতে পরীক্ষা করার জন্য সংমিশ্রণগুলি নির্বাচন করতে, আমরা প্রথমে দুটি সেরা সিনারজিস্টিক টারপেন সংমিশ্রণের উপর ফোকাস করেছি, যথা কারভোন প্লাস লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল প্লাস ইউডেসমল।দ্বিতীয়ত, সিন্থেটিক অর্গানোফসফেট ম্যালাথিয়ন এবং টারপেনয়েডের সংমিশ্রণ থেকে সেরা সিনারজিস্টিক সমন্বয় নির্বাচন করা হয়েছিল।আমরা বিশ্বাস করি যে ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণটি সবচেয়ে বেশি পর্যবেক্ষণকৃত মৃত্যুহার এবং প্রার্থী উপাদানগুলির খুব কম LC50 মানের কারণে বড় কীটপতঙ্গের উপনিবেশগুলিতে পরীক্ষার জন্য সর্বোত্তম সংমিশ্রণ।ম্যালাথিয়ন α-pinene, diallyl disulfide, eucalyptus, carvone এবং eudesmol এর সংমিশ্রণে সিনার্জিজম প্রদর্শন করে।কিন্তু যদি আমরা LC50 মান দেখি, Eudesmol-এর মান সর্বনিম্ন (2.25 ppm)।ম্যালাথিয়ন, α-পাইনিন, ডায়ালিল ডিসালফাইড, ইউক্যালিপটল এবং কারভোনের গণনাকৃত LC50 মানগুলি ছিল 5.4, 716.55, 166.02, 17.6 এবং 140.79 পিপিএম।যথাক্রমেএই মানগুলি নির্দেশ করে যে ম্যালাথিয়ন এবং ইউডেসমলের সংমিশ্রণটি ডোজের ক্ষেত্রে সর্বোত্তম সংমিশ্রণ।ফলাফলগুলি দেখায় যে কারভোন প্লাস লিমোনিন এবং ইউডেসমল প্লাস ম্যালাথিয়নের সংমিশ্রণে 100% পর্যবেক্ষিত মৃত্যুহার ছিল 61% থেকে 65% প্রত্যাশিত মৃত্যুর তুলনায়।আরেকটি সংমিশ্রণ, ইউডেসমল প্লাস ইউক্যালিপটল, 60% প্রত্যাশিত মৃত্যুর হারের তুলনায় 24 ঘন্টা এক্সপোজারের পরে 78.66% মৃত্যুর হার দেখিয়েছে।তিনটি নির্বাচিত সংমিশ্রণই প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টির (টেবিল 6) বিরুদ্ধে বৃহৎ স্কেলে প্রয়োগ করার পরেও সিনারজিস্টিক প্রভাব প্রদর্শন করেছে।
এই গবেষণায়, নির্বাচিত উদ্ভিদ EO যেমন Mp, As, Os, Em এবং Cl এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে প্রতিশ্রুতিবদ্ধ প্রাণঘাতী প্রভাব দেখিয়েছে।Mp EO-এর LC50 মান 0.42 পিপিএম সহ সর্বোচ্চ লার্ভিসাইডাল অ্যাক্টিভিটি ছিল, তারপরে 24 ঘন্টা পর 50 পিপিএম-এর কম LC50 মান সহ As, Os এবং Em EO-এর অবস্থান।এই ফলাফলগুলি মশা এবং অন্যান্য ডিপ্টারাস মাছি 10,11,12,13,14 এর পূর্ববর্তী গবেষণার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।যদিও Cl-এর লার্ভিসাইডাল ক্ষমতা অন্যান্য প্রয়োজনীয় তেলের তুলনায় কম, 24 ঘন্টা পর LC50 মান 163.65 পিপিএম সহ, এর প্রাপ্তবয়স্ক সম্ভাবনা 24 ঘন্টা পরে 23.37 পিপিএম এর LC50 মান সহ সর্বোচ্চ।Mp, As এবং Em EOs 24 ঘন্টা এক্সপোজারে 100-120 পিপিএম রেঞ্জে LC50 মানের সাথে ভাল অ্যালারসিডাল সম্ভাব্যতাও দেখিয়েছিল, তবে তাদের লার্ভিসাইডাল কার্যকারিতার তুলনায় তুলনামূলকভাবে কম ছিল।অন্যদিকে, EO Os সর্বোচ্চ থেরাপিউটিক ডোজেও একটি নগণ্য অ্যালারসিডাল প্রভাব প্রদর্শন করেছে।এইভাবে, ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে উদ্ভিদে ইথিলিন অক্সাইডের বিষাক্ততা মশার বিকাশের পর্যায়ের উপর নির্ভর করে পরিবর্তিত হতে পারে15।এটি পোকামাকড়ের শরীরে ইওর অনুপ্রবেশের হার, নির্দিষ্ট লক্ষ্য এনজাইমের সাথে তাদের মিথস্ক্রিয়া এবং প্রতিটি বিকাশের পর্যায়ে মশার ডিটক্সিফিকেশন ক্ষমতার উপরও নির্ভর করে।প্রচুর সংখ্যক গবেষণায় দেখা গেছে যে প্রধান উপাদান যৌগ ইথিলিন অক্সাইডের জৈবিক কার্যকলাপের একটি গুরুত্বপূর্ণ ফ্যাক্টর, যেহেতু এটি মোট যৌগের 3,12,17,18 সংখ্যাগরিষ্ঠের জন্য দায়ী।অতএব, আমরা প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ বিবেচনা করেছি।GC-MS ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, ডায়ালিল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইডকে EO As-এর প্রধান যৌগ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল, যা পূর্ববর্তী রিপোর্ট 19,20,21 এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।যদিও পূর্ববর্তী প্রতিবেদনে ইঙ্গিত দেওয়া হয়েছিল যে মেন্থল তার প্রধান যৌগগুলির মধ্যে একটি, কার্ভোন এবং লিমোনিনকে আবার Mp EO22,23 এর প্রধান যৌগ হিসাবে চিহ্নিত করা হয়েছিল।Os EO-এর কম্পোজিশন প্রোফাইল দেখায় যে ইউজেনল এবং মিথাইল ইউজেনল হল প্রধান যৌগ, যা পূর্ববর্তী গবেষকদের 16,24 এর ফলাফলের অনুরূপ।ইউক্যালিপটল এবং ইউক্যালিপটল এম পাতার তেলে উপস্থিত প্রধান যৌগ হিসাবে রিপোর্ট করা হয়েছে, যা কিছু গবেষক 25,26 এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ কিন্তু ওলালেড এট আল.27 এর ফলাফলের বিপরীতে।মেলালেউকা এসেনশিয়াল অয়েলে সিনিওল এবং α-পাইনেনের আধিপত্য পরিলক্ষিত হয়েছিল, যা পূর্ববর্তী গবেষণাগুলির 28,29 অনুরূপ।বিভিন্ন স্থানে একই উদ্ভিদ প্রজাতি থেকে নিষ্কাশিত অপরিহার্য তেলের গঠন এবং ঘনত্বের অন্তঃনির্দিষ্ট পার্থক্য রিপোর্ট করা হয়েছে এবং এই গবেষণায়ও পরিলক্ষিত হয়েছে, যা ভৌগলিক উদ্ভিদের বৃদ্ধির অবস্থা, ফসল কাটার সময়, বিকাশের পর্যায় বা উদ্ভিদ বয়স দ্বারা প্রভাবিত হয়।কেমোটাইপ, ইত্যাদির উপস্থিতি 22,30,31,32।প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টি মশার উপর তাদের লার্ভিসাইডাল প্রভাব এবং প্রভাবের জন্য মূল চিহ্নিত যৌগগুলি কেনা এবং পরীক্ষা করা হয়েছিল।ফলাফলগুলি দেখায় যে ডায়ালিল ডাইসলফাইডের লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ অপরিশোধিত EO As এর সাথে তুলনীয়।কিন্তু ডায়ালাইল ট্রাইসালফাইডের কার্যকলাপ EO As এর চেয়ে বেশি।এই ফলাফলগুলি কিম্বারিস এট আল দ্বারা প্রাপ্ত ফলাফলের অনুরূপ।কিউলেক্স ফিলিপাইনে 33.যাইহোক, এই দুটি যৌগ লক্ষ্য মশার বিরুদ্ধে ভাল অটোসাইডাল কার্যকলাপ দেখায়নি, যা টেনিব্রিও মলিটারে প্লাটা-রুয়েডা এট আল 34-এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ।Os EO এডিস ইজিপ্টির লার্ভা পর্যায়ে কার্যকর, কিন্তু প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে নয়।এটি প্রতিষ্ঠিত হয়েছে যে প্রধান পৃথক যৌগগুলির লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ অপরিশোধিত Os EO এর তুলনায় কম।এটি অপরিশোধিত ইথিলিন অক্সাইডে অন্যান্য যৌগ এবং তাদের মিথস্ক্রিয়াগুলির জন্য একটি ভূমিকা বোঝায়।মিথাইল ইউজেনলের একাই নগণ্য কার্যকলাপ রয়েছে, যেখানে একা ইউজেনলের মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ রয়েছে।এই উপসংহারটি একদিকে নিশ্চিত করে, ৩৫,৩৬, এবং অন্যদিকে, পূর্ববর্তী গবেষকদের ৩৭,৩৮ উপসংহারের বিরোধিতা করে।ইউজেনল এবং মেথিলিউজেনলের কার্যকরী গোষ্ঠীর পার্থক্য একই লক্ষ্য পোকার জন্য বিভিন্ন বিষাক্ততার কারণ হতে পারে।লিমোনিনের মাঝারি লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ পাওয়া গেছে, যখন কার্ভোনের প্রভাব ছিল নগণ্য।একইভাবে, প্রাপ্তবয়স্ক পোকামাকড়ের জন্য লিমোনিনের তুলনামূলকভাবে কম বিষাক্ততা এবং কার্ভনের উচ্চ বিষাক্ততা পূর্ববর্তী কিছু গবেষণার ফলাফলকে সমর্থন করে40 কিন্তু অন্যদের বিরোধী।ইন্ট্রাসাইক্লিক এবং এক্সোসাইক্লিক উভয় অবস্থানেই ডবল বন্ডের উপস্থিতি লার্ভিসাইডস 3,41 হিসাবে এই যৌগগুলির সুবিধা বাড়িয়ে তুলতে পারে, অন্যদিকে কার্ভোন, যা অসম্পৃক্ত আলফা এবং বিটা কার্বন সহ একটি কেটোন, প্রাপ্তবয়স্কদের মধ্যে বিষাক্ততার উচ্চ সম্ভাবনা প্রদর্শন করতে পারে।যাইহোক, লিমোনিন এবং কারভোনের স্বতন্ত্র বৈশিষ্ট্য মোট EO Mp (সারণী 1, টেবিল 3) থেকে অনেক কম।পরীক্ষিত টেরপেনয়েডগুলির মধ্যে, ইউডেসমল 2.5 পিপিএম-এর নীচে LC50 মান সহ সর্বাধিক লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের কার্যকলাপে পাওয়া গেছে, এটি এডিস মশা নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি প্রতিশ্রুতিশীল যৌগ তৈরি করেছে।এটির কার্যকারিতা সমগ্র EO Em-এর তুলনায় ভালো, যদিও এটি Cheng et al.40-এর ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ নয়।ইউডেসমল হল একটি সেসকুইটারপিন যার দুটি আইসোপ্রিন ইউনিট রয়েছে যা ইউক্যালিপটাসের মতো অক্সিজেনযুক্ত মনোটারপিনগুলির চেয়ে কম উদ্বায়ী এবং তাই কীটনাশক হিসাবে এর সম্ভাবনা বেশি।ইউক্যালিপটল নিজেই লার্ভিসাইডাল ক্রিয়াকলাপের চেয়ে বেশি প্রাপ্তবয়স্ক, এবং পূর্ববর্তী গবেষণার ফলাফল এই ৩৭,৪৩,৪৪ সমর্থন এবং খন্ডন উভয়ই।একা কার্যকলাপ সমগ্র EO Cl এর সাথে প্রায় তুলনীয়।আরেকটি বাইসাইক্লিক মনোটারপিন, α-পাইনিন, লার্ভিসাইডাল প্রভাবের তুলনায় এডিস ইজিপ্টির উপর প্রাপ্তবয়স্কদের কম প্রভাব ফেলে, যা সম্পূর্ণ EO Cl-এর প্রভাবের বিপরীত।টেরপেনয়েডের সামগ্রিক কীটনাশক কার্যকলাপ তাদের লিপোফিলিসিটি, অস্থিরতা, কার্বন শাখা, অভিক্ষেপ এলাকা, পৃষ্ঠের ক্ষেত্রফল, কার্যকরী গ্রুপ এবং তাদের অবস্থান 45,46 দ্বারা প্রভাবিত হয়।এই যৌগগুলি কোষের সঞ্চয়নকে ধ্বংস করে, শ্বাসযন্ত্রের ক্রিয়াকলাপকে অবরুদ্ধ করে, স্নায়ু আবেগের সংক্রমণে বাধা সৃষ্টি করে, ইত্যাদি কাজ করতে পারে। উতলা48.সিন্থেটিক অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়নের প্রাপ্তবয়স্কদের কার্যকলাপ 5.44 পিপিএম এ রিপোর্ট করা হয়েছিল।যদিও এই দুটি অর্গানোফসফেট এডিস ইজিপ্টির পরীক্ষাগার স্ট্রেনের বিরুদ্ধে অনুকূল প্রতিক্রিয়া দেখিয়েছে, বিশ্বের বিভিন্ন অংশে এই যৌগগুলির প্রতি মশার প্রতিরোধের রিপোর্ট করা হয়েছে49।যাইহোক, ভেষজ ওষুধের প্রতিরোধের বিকাশের অনুরূপ কোন রিপোর্ট পাওয়া যায়নি50।এইভাবে, ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ প্রোগ্রামগুলিতে বোটানিকালগুলিকে রাসায়নিক কীটনাশকের সম্ভাব্য বিকল্প হিসাবে বিবেচনা করা হয়।
লার্ভিসাইডাল প্রভাবটি 28টি বাইনারি সংমিশ্রণের (1:1) উপর পরীক্ষা করা হয়েছিল যা শক্তিশালী টেরপেনয়েড এবং থাইমেটফস সহ টেরপেনয়েড থেকে তৈরি করা হয়েছিল এবং 9টি সংমিশ্রণ সিনারজিস্টিক, 14টি বিরোধী এবং 5টি বিরোধী বলে পাওয়া গেছে।কোন প্রভাব নেই।অন্যদিকে, প্রাপ্তবয়স্ক শক্তির জৈবসারে, 7 টি সংমিশ্রণকে সিনারজিস্টিক, 15টি সংমিশ্রণ বিরোধী, এবং 6টি সংমিশ্রণের কোন প্রভাব নেই বলে জানা গেছে।নির্দিষ্ট সংমিশ্রণগুলি কেন একটি সিনারজিস্টিক প্রভাব তৈরি করে তার কারণ হতে পারে প্রার্থী যৌগগুলি একই সাথে বিভিন্ন গুরুত্বপূর্ণ পথগুলিতে ইন্টারঅ্যাক্ট করার কারণে বা একটি নির্দিষ্ট জৈবিক পথের বিভিন্ন মূল এনজাইমের অনুক্রমিক বাধার কারণে।ডায়ালিল ডিসালফাইড, ইউক্যালিপটাস বা ইউজেনলের সাথে লিমোনিনের সংমিশ্রণটি ছোট এবং বড় উভয় ক্ষেত্রেই সিনারজিস্টিক বলে প্রমাণিত হয়েছে (সারণী 6), যখন ইউক্যালিপটাস বা α-পাইনিনের সাথে এর সংমিশ্রণ লার্ভার উপর বিরোধী প্রভাব দেখা গেছে।গড়ে, লিমোনিনকে একটি ভাল সিনার্জিস্ট বলে মনে হয়, সম্ভবত মিথাইল গ্রুপের উপস্থিতি, স্ট্র্যাটাম কর্নিয়ামে ভাল অনুপ্রবেশ এবং ক্রিয়া করার একটি ভিন্ন পদ্ধতির কারণে।এটি পূর্বে রিপোর্ট করা হয়েছে যে লিমোনিন পোকামাকড়ের কিউটিক্সে প্রবেশ করে বিষাক্ত প্রভাব সৃষ্টি করতে পারে (সংযোগের বিষাক্ততা), পরিপাকতন্ত্রকে প্রভাবিত করে (অ্যান্টিফিডেন্ট), বা শ্বাসযন্ত্রের ক্রিয়াকলাপকে প্রভাবিত করে (ফিউমিগেশন ক্রিয়াকলাপ), 54 যখন ফেনাইলপ্রোপানোয়েড যেমন ইউজেনল বিপাকীয় এনজাইম 55 কে প্রভাবিত করতে পারে। অতএব, বিভিন্ন প্রক্রিয়ার সাথে যৌগগুলির সংমিশ্রণ মিশ্রণের সামগ্রিক প্রাণঘাতী প্রভাবকে বাড়িয়ে তুলতে পারে।ইউক্যালিপটলকে ডায়ালিল ডিসালফাইড, ইউক্যালিপটাস বা α-পাইনিনের সাথে সমন্বয়সাধন করা হয়েছে, তবে অন্যান্য যৌগের সাথে অন্যান্য সংমিশ্রণগুলি হয় অ-লার্ভিসাইডাল বা বিরোধী ছিল।প্রারম্ভিক গবেষণায় দেখা গেছে যে ইউক্যালিপটলের অ্যাসিটাইলকোলিনস্টেরেজ (AChE), সেইসাথে অক্টামিন এবং GABA রিসেপ্টর 56 এর উপর বাধামূলক কার্যকলাপ রয়েছে।যেহেতু সাইক্লিক মনোটারপেনস, ইউক্যালিপটল, ইউজেনল, ইত্যাদি তাদের নিউরোটক্সিক ক্রিয়াকলাপের মতো একই ক্রিয়াকলাপের ব্যবস্থা থাকতে পারে, তাই পারস্পরিক বাধার মাধ্যমে তাদের সম্মিলিত প্রভাবগুলি হ্রাস করে।একইভাবে, ডায়ালিল ডিসালফাইড, α-পাইনিন এবং লিমোনিনের সাথে টেমেফোসের সংমিশ্রণটি সিনারজিস্টিক বলে প্রমাণিত হয়েছে, যা ভেষজ পণ্য এবং সিন্থেটিক অর্গানোফসফেটস58-এর মধ্যে একটি সিনারজিস্টিক প্রভাবের পূর্ববর্তী প্রতিবেদনগুলিকে সমর্থন করে।
eudesmol এবং eucalyptol এর সংমিশ্রণে এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে একটি সমন্বয়মূলক প্রভাব দেখা গেছে, সম্ভবত তাদের বিভিন্ন রাসায়নিক গঠনের কারণে তাদের কর্মের বিভিন্ন পদ্ধতির কারণে।ইউডেসমল (একটি সেসকুইটারপেন) শ্বাসযন্ত্রকে প্রভাবিত করতে পারে 59 এবং ইউক্যালিপটল (একটি মনোটারপেন) অ্যাসিটাইলকোলিনস্টেরেজ 60 কে প্রভাবিত করতে পারে।দুই বা ততোধিক টার্গেট সাইটে উপাদানগুলির সহ-এক্সপোজার সংমিশ্রণের সামগ্রিক প্রাণঘাতী প্রভাবকে বাড়িয়ে তুলতে পারে।প্রাপ্তবয়স্ক পদার্থের জৈবসারে, ম্যালাথিয়নকে কারভোন বা ইউক্যালিপটল বা ইউক্যালিপটল বা ডায়ালিল ডিসালফাইড বা α-পাইনিনের সাথে সিনারজিস্টিক বলে পাওয়া গেছে, যা ইঙ্গিত করে যে এটি লিমোনিন এবং ডি যোগের সাথে সমন্বয়সাধন করে।অ্যালাইল ট্রাইসালফাইড বাদে টেরপেন যৌগগুলির সম্পূর্ণ পোর্টফোলিওর জন্য ভাল সিনারজিস্টিক অ্যালারসাইড প্রার্থী।থাঙ্গাম এবং কাথিরসান 61 ভেষজ নির্যাসের সাথে ম্যালাথিয়নের সিনারজিস্টিক প্রভাবের অনুরূপ ফলাফলও রিপোর্ট করেছে।এই সিনারজিস্টিক প্রতিক্রিয়া পোকামাকড় ডিটক্সিফাইং এনজাইমের উপর ম্যালাথিয়ন এবং ফাইটোকেমিক্যালের সম্মিলিত বিষাক্ত প্রভাবের কারণে হতে পারে।ম্যালাথিয়নের মতো অর্গানোফসফেটগুলি সাধারণত সাইটোক্রোম P450 এস্টেরেস এবং মনোঅক্সিজেনেস62,63,64 বাধা দিয়ে কাজ করে।তাই, ম্যালাথিয়নকে ক্রিয়া করার এই প্রক্রিয়াগুলির সাথে এবং টারপেনকে বিভিন্ন কর্মের প্রক্রিয়ার সাথে একত্রিত করা মশার উপর সামগ্রিক প্রাণঘাতী প্রভাবকে বাড়িয়ে তুলতে পারে।
অন্যদিকে, বৈরিতা নির্দেশ করে যে নির্বাচিত যৌগগুলি একা প্রতিটি যৌগের তুলনায় সংমিশ্রণে কম সক্রিয়।কিছু সংমিশ্রণে বৈরিতার কারণ হতে পারে যে একটি যৌগ শোষণ, বিতরণ, বিপাক বা মলত্যাগের হার পরিবর্তন করে অন্য যৌগের আচরণকে পরিবর্তন করে।প্রাথমিক গবেষকরা এটিকে ওষুধের সংমিশ্রণে বৈরিতার কারণ হিসাবে বিবেচনা করেছিলেন।অণু সম্ভাব্য প্রক্রিয়া 65. একইভাবে, বৈরিতার সম্ভাব্য কারণগুলি একই রিসেপ্টর বা লক্ষ্য সাইটের জন্য উপাদান যৌগের প্রতিযোগিতা, কর্মের অনুরূপ প্রক্রিয়ার সাথে সম্পর্কিত হতে পারে।কিছু ক্ষেত্রে, লক্ষ্য প্রোটিনের অ-প্রতিযোগিতামূলক বাধাও ঘটতে পারে।এই গবেষণায়, দুটি অর্গানোসালফার যৌগ, ডায়ালিল ডিসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড, বিরোধী প্রভাব দেখিয়েছে, সম্ভবত একই টার্গেট সাইটের জন্য প্রতিযোগিতার কারণে।একইভাবে, এই দুটি সালফার যৌগ বিরোধী প্রভাব দেখিয়েছিল এবং ইউডেসমল এবং α-পাইনিনের সাথে মিলিত হলে কোন প্রভাব ছিল না।ইউডেসমল এবং আলফা-পাইনিন প্রকৃতিতে চক্রাকার, যেখানে ডায়ালিল ডাইসালফাইড এবং ডায়ালিল ট্রাইসালফাইড প্রকৃতিতে অ্যালিফ্যাটিক।রাসায়নিক গঠনের উপর ভিত্তি করে, এই যৌগগুলির সংমিশ্রণে সামগ্রিক প্রাণঘাতী কার্যকলাপ বৃদ্ধি করা উচিত কারণ তাদের টার্গেট সাইটগুলি সাধারণত ভিন্ন হয় 34,47, কিন্তু পরীক্ষামূলকভাবে আমরা বিরোধিতা খুঁজে পেয়েছি, যা ভিভোতে কিছু অজানা জীবে এই যৌগগুলির ভূমিকার কারণে হতে পারে৷মিথস্ক্রিয়া ফলে সিস্টেম.একইভাবে, cineole এবং α-pinene-এর সংমিশ্রণ বিরোধী প্রতিক্রিয়া তৈরি করে, যদিও গবেষকরা পূর্বে রিপোর্ট করেছেন যে দুটি যৌগের কর্মের ভিন্ন লক্ষ্যমাত্রা রয়েছে 47,60।যেহেতু উভয় যৌগই চক্রাকার মনোটারপেনস, তাই কিছু সাধারণ লক্ষ্য সাইট থাকতে পারে যেগুলি বাঁধাই করার জন্য প্রতিযোগিতা করতে পারে এবং অধ্যয়ন করা সম্মিলিত জোড়ার সামগ্রিক বিষাক্ততাকে প্রভাবিত করতে পারে।
LC50 মান এবং পর্যবেক্ষিত মৃত্যুহারের উপর ভিত্তি করে, দুটি সেরা সিনারজিস্টিক টারপেন সংমিশ্রণ নির্বাচন করা হয়েছিল, যথা কারভোন + লিমোনিন এবং ইউক্যালিপটল + ইউডেসমল এর জোড়া, সেইসাথে টেরপেন সহ সিন্থেটিক অর্গানোফসফরাস ম্যালাথিয়ন।ম্যালাথিয়ন + ইউডেসমল যৌগের সর্বোত্তম সিনেরজিস্টিক সমন্বয় একটি প্রাপ্তবয়স্ক কীটনাশক জৈবসারে পরীক্ষা করা হয়েছিল।এই কার্যকরী সংমিশ্রণগুলি তুলনামূলকভাবে বড় এক্সপোজার স্পেসগুলিতে বিপুল সংখ্যক ব্যক্তির বিরুদ্ধে কাজ করতে পারে কিনা তা নিশ্চিত করতে বড় কীটপতঙ্গের উপনিবেশগুলিকে লক্ষ্য করুন।এই সমস্ত সংমিশ্রণগুলি কীটপতঙ্গের বড় ঝাঁকের বিরুদ্ধে একটি সমন্বয়মূলক প্রভাব প্রদর্শন করে।এডিস ইজিপ্টি লার্ভার বৃহৎ জনসংখ্যার বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা একটি সর্বোত্তম সিনারজিস্টিক লার্ভিসাইডাল কম্বিনেশনের জন্য অনুরূপ ফলাফল পাওয়া গেছে।সুতরাং, এটা বলা যেতে পারে যে উদ্ভিদ ইও যৌগের কার্যকর সিনেরজিস্টিক লার্ভিসাইডাল এবং অ্যাডাল্টিসাইডাল সংমিশ্রণ বিদ্যমান কৃত্রিম রাসায়নিকগুলির বিরুদ্ধে একটি শক্তিশালী প্রার্থী এবং এডিস ইজিপ্টি জনসংখ্যা নিয়ন্ত্রণ করতে আরও ব্যবহার করা যেতে পারে।একইভাবে, মশাকে দেওয়া থাইমেটফস বা ম্যালাথিয়নের ডোজ কমাতে টের্পেনের সাথে সিন্থেটিক লার্ভিসাইড বা অ্যাডাল্টিসাইডের কার্যকরী সংমিশ্রণও ব্যবহার করা যেতে পারে।এই শক্তিশালী সিনারজিস্টিক সংমিশ্রণগুলি এডিস মশার ওষুধ প্রতিরোধের বিবর্তনের উপর ভবিষ্যতের গবেষণার জন্য সমাধান প্রদান করতে পারে।
এডিস ইজিপ্টির ডিম আঞ্চলিক চিকিৎসা গবেষণা কেন্দ্র, ডিব্রুগড়, ইন্ডিয়ান কাউন্সিল অফ মেডিক্যাল রিসার্চ থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং গৌহাটি বিশ্ববিদ্যালয়ের প্রাণিবিদ্যা বিভাগে নিয়ন্ত্রিত তাপমাত্রা (28 ± 1 °C) এবং আর্দ্রতার (85 ± 5%) অধীনে রাখা হয়েছিল। নিম্নলিখিত শর্তাবলী: অ্যারিভোলি বর্ণনা করা হয়েছে এবং অন্যান্য।ডিম ফোটার পর লার্ভাকে লার্ভা খাবার (কুকুরের বিস্কুটের গুঁড়া এবং খামির 3:1 অনুপাতে) এবং প্রাপ্তবয়স্কদের 10% গ্লুকোজ দ্রবণ খাওয়ানো হয়েছিল।আবির্ভাবের 3য় দিন থেকে, প্রাপ্তবয়স্ক স্ত্রী মশাকে অ্যালবিনো ইঁদুরের রক্ত ​​চুষতে দেওয়া হয়েছিল।একটি গ্লাসে পানিতে ফিল্টার পেপার ভিজিয়ে ডিম পাড়ার খাঁচায় রাখুন।
নির্বাচিত উদ্ভিদ নমুনা যথা ইউক্যালিপটাস পাতা (Myrtaceae), পবিত্র তুলসী (Lamiaceae), পুদিনা (Lamiaceae), melaleuca (Myrtaceae) এবং অ্যালিয়াম বাল্ব (Amaryllidaceae)।গুয়াহাটি থেকে সংগৃহীত এবং গৌহাটি বিশ্ববিদ্যালয়ের উদ্ভিদবিদ্যা বিভাগ দ্বারা চিহ্নিত।সংগৃহীত উদ্ভিদ নমুনাগুলি (500 গ্রাম) একটি ক্লিভেঞ্জার যন্ত্রপাতি ব্যবহার করে 6 ঘন্টার জন্য হাইড্রোডিস্টিলেশনের শিকার হয়েছিল।নিষ্কাশিত EO পরিষ্কার কাচের শিশিতে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং আরও অধ্যয়নের জন্য 4 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হয়েছিল।
লার্ভিসাইডাল বিষাক্ততা সামান্য পরিবর্তিত স্ট্যান্ডার্ড বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা পদ্ধতি ব্যবহার করে অধ্যয়ন করা হয়েছিল 67।একটি emulsifier হিসাবে DMSO ব্যবহার করুন.প্রতিটি ইও ঘনত্ব প্রাথমিকভাবে 100 এবং 1000 পিপিএম এ পরীক্ষা করা হয়েছিল, প্রতিটি প্রতিলিপিতে 20টি লার্ভা প্রকাশ করে।ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, একটি ঘনত্ব পরিসীমা প্রয়োগ করা হয়েছিল এবং 1 ঘন্টা থেকে 6 ঘন্টা (1 ঘন্টার ব্যবধানে) এবং চিকিত্সার 24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টা পর মৃত্যুহার রেকর্ড করা হয়েছিল।Sublethal ঘনত্ব (LC50) 24, 48 এবং 72 ঘন্টা এক্সপোজার পরে নির্ধারিত হয়েছিল।প্রতিটি ঘনত্ব একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (শুধুমাত্র জল) এবং একটি ইতিবাচক নিয়ন্ত্রণ (DMSO-চিকিত্সা জল) সহ ত্রিগুণে পরীক্ষা করা হয়েছিল।যদি পিউপেশন ঘটে এবং নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের 10% এর বেশি লার্ভা মারা যায়, পরীক্ষাটি পুনরাবৃত্তি করা হয়।যদি কন্ট্রোল গ্রুপে মৃত্যুর হার 5-10% এর মধ্যে হয়, তাহলে অ্যাবট সংশোধন সূত্র 68 ব্যবহার করুন।
রামার এট আল দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি।দ্রাবক হিসাবে অ্যাসিটোন ব্যবহার করে এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে একটি প্রাপ্তবয়স্ক জৈবসারের জন্য 69 ব্যবহার করা হয়েছিল।প্রতিটি EO প্রাথমিকভাবে 100 এবং 1000 পিপিএম ঘনত্বে প্রাপ্তবয়স্ক এডিস ইজিপ্টি মশার বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা হয়েছিল।প্রতিটি প্রস্তুত দ্রবণের 2 মিলি হোয়াটম্যান নম্বরে প্রয়োগ করুন।1 টুকরো ফিল্টার পেপার (আকার 12 x 15 cm2) এবং অ্যাসিটোনকে 10 মিনিটের জন্য বাষ্পীভূত হতে দিন।নিয়ন্ত্রণ হিসাবে শুধুমাত্র 2 মিলি অ্যাসিটোন দিয়ে চিকিত্সা করা ফিল্টার পেপার ব্যবহার করা হয়েছিল।অ্যাসিটোন বাষ্পীভূত হওয়ার পরে, চিকিত্সা করা ফিল্টার পেপার এবং কন্ট্রোল ফিল্টার পেপার একটি নলাকার নল (10 সেমি গভীর) এ স্থাপন করা হয়।দশটি 3- থেকে 4 দিন বয়সী নন-ব্লাড ফিডিং মশা প্রতিটি ঘনত্বের ট্রিপ্লিকেটগুলিতে স্থানান্তরিত হয়েছিল।প্রাথমিক পরীক্ষার ফলাফলের উপর ভিত্তি করে, নির্বাচিত তেলের বিভিন্ন ঘনত্ব পরীক্ষা করা হয়েছিল।মশা ছাড়ার 1 ঘন্টা, 2 ঘন্টা, 3 ঘন্টা, 4 ঘন্টা, 5 ঘন্টা, 6 ঘন্টা, 24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টা পরে মৃত্যুর হার রেকর্ড করা হয়েছিল।24 ঘন্টা, 48 ঘন্টা এবং 72 ঘন্টা এক্সপোজার সময়ের জন্য LC50 মান গণনা করুন।যদি কন্ট্রোল লটের মৃত্যুহার 20% ছাড়িয়ে যায়, পুরো পরীক্ষাটি পুনরাবৃত্তি করুন।একইভাবে, যদি কন্ট্রোল গ্রুপে মৃত্যুর হার 5%-এর বেশি হয়, তাহলে অ্যাবটের সূত্র 68 ব্যবহার করে চিকিত্সা করা নমুনার ফলাফলগুলি সামঞ্জস্য করুন।
গ্যাস ক্রোমাটোগ্রাফি (Agilent 7890A) এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি (Accu TOF GCv, Jeol) নির্বাচিত অপরিহার্য তেলের উপাদান যৌগ বিশ্লেষণ করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল।GC একটি FID ডিটেক্টর এবং একটি কৈশিক কলাম (HP5-MS) দিয়ে সজ্জিত ছিল।ক্যারিয়ার গ্যাস ছিল হিলিয়াম, প্রবাহের হার ছিল 1 মিলি/মিনিট।GC প্রোগ্রাম অ্যালিয়াম স্যাটিভাম 10:80-1M-8-220-5M-8-270-9M এবং Ocimum Sainttum 10:80-3M-8-200-3M-10-275-1M-5 – 280 এ সেট করে, পুদিনার জন্য 10:80-1M-8-200-5M-8-275-1M-5-280, ইউক্যালিপটাস 20.60-1M-10-200-3M-30-280, এবং লাল রঙের জন্য এক হাজার স্তরের জন্য তারা সেগুলি 10: 60-1M-8-220-5M-8-270-3M।
প্রতিটি EO-এর প্রধান যৌগগুলি GC ক্রোমাটোগ্রাম এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি ফলাফল (NIST 70 স্ট্যান্ডার্ড ডাটাবেসে উল্লেখ করা হয়েছে) থেকে গণনা করা এলাকার শতাংশের উপর ভিত্তি করে চিহ্নিত করা হয়েছিল।
প্রতিটি EO-তে দুটি প্রধান যৌগ GC-MS ফলাফলের উপর ভিত্তি করে নির্বাচন করা হয়েছিল এবং সিগমা-অলড্রিচ থেকে 98-99% বিশুদ্ধতায় ক্রয় করা হয়েছিল আরও বায়োসেসের জন্য।যৌগগুলি উপরে বর্ণিত হিসাবে এডিস ইজিপ্টির বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের কার্যকারিতার জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল।সর্বাধিক ব্যবহৃত সিন্থেটিক লার্ভিসাইড ট্যামেফোসেট (সিগমা অ্যালড্রিচ) এবং প্রাপ্তবয়স্ক ড্রাগ ম্যালাথিয়ন (সিগমা অ্যালড্রিচ) একই পদ্ধতি অনুসরণ করে নির্বাচিত ইও যৌগের সাথে তাদের কার্যকারিতা তুলনা করার জন্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।
নির্বাচিত টারপেন যৌগ এবং টারপেন যৌগ এবং বাণিজ্যিক অর্গানোফসফেট (টাইলফস এবং ম্যালাথিয়ন) এর বাইনারি মিশ্রণগুলি 1:1 অনুপাতে প্রতিটি প্রার্থী যৌগের LC50 ডোজ মিশ্রিত করে প্রস্তুত করা হয়েছিল।প্রস্তুত সংমিশ্রণগুলি উপরে বর্ণিত হিসাবে এডিস ইজিপ্টির লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্ক পর্যায়ে পরীক্ষা করা হয়েছিল।প্রতিটি বায়োসাই প্রতিটি সংমিশ্রণের জন্য ত্রিগুণে এবং প্রতিটি সংমিশ্রণে উপস্থিত পৃথক যৌগগুলির জন্য ত্রিপিকে সঞ্চালিত হয়েছিল।24 ঘন্টা পরে লক্ষ্য পোকামাকড়ের মৃত্যু রেকর্ড করা হয়েছিল।নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে একটি বাইনারি মিশ্রণের জন্য প্রত্যাশিত মৃত্যুর হার গণনা করুন।
যেখানে E = একটি বাইনারি সংমিশ্রণের প্রতিক্রিয়ায় এডিস ইজিপ্টি মশার প্রত্যাশিত মৃত্যুর হার, অর্থাৎ সংযোগ (A + B)।
Pavla52 দ্বারা বর্ণিত পদ্ধতি দ্বারা গণনা করা χ2 মানের উপর ভিত্তি করে প্রতিটি বাইনারি মিশ্রণের প্রভাবকে synergistic, antagonistic, বা no effect হিসাবে লেবেল করা হয়েছিল।নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে প্রতিটি সংমিশ্রণের জন্য χ2 মান গণনা করুন।
একটি সংমিশ্রণের প্রভাবকে সিনারজিস্টিক হিসাবে সংজ্ঞায়িত করা হয়েছিল যখন গণনা করা χ2 মান স্বাধীনতার সংশ্লিষ্ট ডিগ্রীর (95% আত্মবিশ্বাসের ব্যবধান) জন্য সারণি মানের চেয়ে বেশি ছিল এবং যদি পর্যবেক্ষিত মৃত্যুহার প্রত্যাশিত মৃত্যুহারের চেয়ে বেশি পাওয়া যায়।একইভাবে, যদি কোনো সংমিশ্রণের জন্য গণনা করা χ2 মান কিছু ডিগ্রী স্বাধীনতা সহ সারণি মানকে ছাড়িয়ে যায়, কিন্তু পর্যবেক্ষিত মৃত্যুহার প্রত্যাশিত মৃত্যুর চেয়ে কম হয়, তাহলে চিকিত্সাটি বিরোধী বলে বিবেচিত হয়।এবং যদি কোনো সংমিশ্রণে χ2 এর গণনা করা মান স্বাধীনতার সংশ্লিষ্ট ডিগ্রীতে টেবিলের মানের থেকে কম হয়, তাহলে এই সমন্বয়টির কোনো প্রভাব নেই বলে মনে করা হয়।
বিপুল সংখ্যক পোকামাকড়ের বিরুদ্ধে পরীক্ষার জন্য তিন থেকে চারটি সম্ভাব্য সমন্বয়মূলক সংমিশ্রণ (100 লার্ভা এবং 50টি লার্ভিসাইডাল এবং প্রাপ্তবয়স্ক পোকার কার্যকলাপ) নির্বাচন করা হয়েছিল।প্রাপ্তবয়স্করা) উপরের মত এগিয়ে যান।মিশ্রণের পাশাপাশি, নির্বাচিত মিশ্রণে উপস্থিত পৃথক যৌগগুলিও সমান সংখ্যক এডিস ইজিপ্টি লার্ভা এবং প্রাপ্তবয়স্কদের উপর পরীক্ষা করা হয়েছিল।সংমিশ্রণ অনুপাত হল একটি প্রার্থী যৌগের এক অংশ LC50 ডোজ এবং অন্য উপাদান যৌগের অংশ LC50 ডোজ।প্রাপ্তবয়স্কদের ক্রিয়াকলাপের জৈবসারে, নির্বাচিত যৌগগুলি দ্রাবক অ্যাসিটোনে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং একটি 1300 সেমি 3 নলাকার প্লাস্টিকের পাত্রে মোড়ানো ফিল্টার পেপারে প্রয়োগ করা হয়েছিল।অ্যাসিটোন 10 মিনিটের জন্য বাষ্পীভূত হয়েছিল এবং প্রাপ্তবয়স্কদের মুক্তি দেওয়া হয়েছিল।একইভাবে, লার্ভিসাইডাল বায়োঅ্যাসে, LC50 ক্যান্ডিডেট যৌগগুলির ডোজগুলিকে প্রথমে DMSO-এর সমান পরিমাণে দ্রবীভূত করা হয়েছিল এবং তারপর 1300 সিসি প্লাস্টিকের পাত্রে সংরক্ষিত 1 লিটার জলের সাথে মিশ্রিত করা হয়েছিল এবং লার্ভা ছেড়ে দেওয়া হয়েছিল।
LC50 মান গণনা করার জন্য SPSS (সংস্করণ 16) এবং Minitab সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে 71টি রেকর্ডকৃত মৃত্যুর তথ্যের সম্ভাব্য বিশ্লেষণ করা হয়েছিল।