ছত্রাকনাশক সম্পূরককরণ একক রাজমিস্ত্রি মৌমাছির নেট শক্তি লাভ এবং মাইক্রোবায়োম বৈচিত্র্য হ্রাস করে।

Nature.com দেখার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজারটি ব্যবহার করছেন তার সংস্করণে সীমিত CSS সাপোর্ট রয়েছে। সেরা ফলাফলের জন্য, আমরা আপনাকে আপনার ব্রাউজারের একটি নতুন সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্যতা মোড অক্ষম করুন)। ইতিমধ্যে, চলমান সহায়তা নিশ্চিত করার জন্য, আমরা স্টাইলিং বা জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই সাইটটি প্রদর্শন করছি।
ছত্রাকনাশক প্রায়শই গাছের ফলের ফুল ফোটার সময় ব্যবহার করা হয় এবং পোকামাকড়ের পরাগায়নকারীদের হুমকি দিতে পারে। তবে, ফুল ফোটার সময় আপেলে সাধারণত ব্যবহৃত সংস্পর্শ এবং পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশকের প্রতি মৌমাছিবিহীন পরাগায়নকারীরা (যেমন, একক মৌমাছি, ওসমিয়া কর্নিফ্রন) কীভাবে প্রতিক্রিয়া দেখায় সে সম্পর্কে খুব কমই জানা যায়। এই জ্ঞানের ব্যবধান নিরাপদ ঘনত্ব এবং ছত্রাকনাশক স্প্রে করার সময় নির্ধারণের নিয়ন্ত্রক সিদ্ধান্তগুলিকে সীমাবদ্ধ করে। আমরা দুটি সংস্পর্শ ছত্রাকনাশক (ক্যাপ্টান এবং ম্যানকোজেব) এবং চারটি আন্তঃস্তর/ফাইটোসিস্টেম ছত্রাকনাশক (সিপ্রোসাইক্লিন, মাইক্লোবুটানিল, পাইরোস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন) এর প্রভাব মূল্যায়ন করেছি। লার্ভার ওজন বৃদ্ধি, বেঁচে থাকা, লিঙ্গ অনুপাত এবং ব্যাকটেরিয়া বৈচিত্র্যের উপর প্রভাব। মূল্যায়নটি একটি দীর্ঘস্থায়ী মৌখিক জৈব পরীক্ষা ব্যবহার করে পরিচালিত হয়েছিল যেখানে মাঠে ব্যবহারের জন্য বর্তমানে প্রস্তাবিত ডোজ (1X), অর্ধেক ডোজ (0.5X) এবং কম ডোজ (0.1X) এর উপর ভিত্তি করে তিনটি ডোজে পরাগায়ন করা হয়েছিল। ম্যানকোজেব এবং পাইরিটিসোলিনের সমস্ত ডোজ শরীরের ওজন এবং লার্ভার বেঁচে থাকা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। এরপর আমরা সর্বোচ্চ মৃত্যুহারের জন্য দায়ী ছত্রাকনাশক ম্যানকোজেবের লার্ভা ব্যাকটেরিওম চিহ্নিত করার জন্য 16S জিনের ক্রমবিন্যাস করেছি। আমরা দেখতে পেয়েছি যে ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভাতে ব্যাকটেরিয়ার বৈচিত্র্য এবং প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। আমাদের পরীক্ষাগারের ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে ফুল ফোটার সময় এই ছত্রাকনাশকগুলির কিছু স্প্রে করা O. cornifrons-এর স্বাস্থ্যের জন্য বিশেষভাবে ক্ষতিকারক। এই তথ্য ফল গাছ সুরক্ষা পণ্যের টেকসই ব্যবহার সম্পর্কিত ভবিষ্যতের ব্যবস্থাপনা সিদ্ধান্তের জন্য প্রাসঙ্গিক এবং পরাগায়নকারীদের সুরক্ষার লক্ষ্যে নিয়ন্ত্রক প্রক্রিয়াগুলির ভিত্তি হিসাবে কাজ করে।
একাকী রাজমিস্ত্রি মৌমাছি ওসমিয়া কর্নিফ্রন (হাইমেনোপ্টেরা: মেগাচিলিডি) ১৯৭০-এর দশকের শেষের দিকে এবং ১৯৮০-এর দশকের গোড়ার দিকে জাপান থেকে মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে প্রবর্তিত হয়েছিল এবং তখন থেকেই এই প্রজাতিটি পরিচালিত বাস্তুতন্ত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ পরাগায়নকারী ভূমিকা পালন করে আসছে। এই মৌমাছির প্রাকৃতিক জনসংখ্যা প্রায় ৫০ প্রজাতির বন্য মৌমাছির অংশ যা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বাদাম এবং আপেল বাগানের পরাগায়নকারী মৌমাছিদের পরিপূরক। মেসন মৌমাছিরা অনেক চ্যালেঞ্জের মুখোমুখি হয়, যার মধ্যে রয়েছে আবাসস্থল বিভাজন, রোগজীবাণু এবং কীটনাশক ৩,৪। কীটনাশকের মধ্যে, ছত্রাকনাশক শক্তি বৃদ্ধি, খাদ্য সংগ্রহ ৫ এবং শরীরের অবস্থা ৬,৭ কমিয়ে দেয়। যদিও সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে মেসন মৌমাছির স্বাস্থ্য সরাসরি কমেন্সাল এবং ইক্টোব্যাক্টিক অণুজীব দ্বারা প্রভাবিত হয়, ৮,৯ কারণ ব্যাকটেরিয়া এবং ছত্রাক পুষ্টি এবং রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতাকে প্রভাবিত করতে পারে, মেসন মৌমাছির জীবাণু বৈচিত্র্যের উপর ছত্রাকনাশকের এক্সপোজারের প্রভাবগুলি কেবল অধ্যয়ন করা শুরু হয়েছে।
আপেল স্ক্যাব, তেতো পচা, বাদামী পচা এবং পাউডারি মিলডিউ রোগের চিকিৎসার জন্য ফুল ফোটার আগে এবং ফুল ফোটার সময় বিভিন্ন প্রভাবের (সংস্পর্শ এবং পদ্ধতিগত) ছত্রাকনাশক স্প্রে করা হয়10,11। পরাগায়নকারীদের জন্য ছত্রাকনাশক ক্ষতিকারক বলে মনে করা হয়, তাই ফুল ফোটার সময়কালে বাগান মালিকদের কাছে এগুলি সুপারিশ করা হয়; মৌমাছিদের দ্বারা এই ছত্রাকনাশকগুলির সংস্পর্শ এবং গ্রহণ তুলনামূলকভাবে সুপরিচিত, কারণ এটি মার্কিন পরিবেশ সুরক্ষা সংস্থা এবং অন্যান্য অনেক জাতীয় নিয়ন্ত্রক সংস্থা দ্বারা কীটনাশক নিবন্ধন প্রক্রিয়ার অংশ12,13,14। তবে, অ-মৌমাছিদের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব কম জানা যায় কারণ মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বিপণন অনুমোদন চুক্তির অধীনে এগুলি প্রয়োজন হয় না15। উপরন্তু, একক মৌমাছি পরীক্ষা করার জন্য সাধারণত কোনও মানসম্মত প্রোটোকল নেই16,17, এবং পরীক্ষার জন্য মৌমাছি সরবরাহকারী উপনিবেশগুলি বজায় রাখা চ্যালেঞ্জিং18। বন্য মৌমাছির উপর কীটনাশকের প্রভাব অধ্যয়নের জন্য ইউরোপ এবং মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বিভিন্ন পরিচালিত মৌমাছির পরীক্ষা ক্রমবর্ধমানভাবে পরিচালিত হচ্ছে এবং সম্প্রতি O. cornifrons19 এর জন্য মানসম্মত প্রোটোকল তৈরি করা হয়েছে।
শিংওয়ালা মৌমাছি মনোসাইট এবং কার্প ফসলে মধু মৌমাছির পরিপূরক বা প্রতিস্থাপন হিসেবে বাণিজ্যিকভাবে ব্যবহৃত হয়। এই মৌমাছিগুলি মার্চ এবং এপ্রিলের মধ্যে আবির্ভূত হয়, স্ত্রী মৌমাছির তিন থেকে চার দিন আগে অকাল পুরুষ মৌমাছি বের হয়। মিলনের পর, স্ত্রী মৌমাছি সক্রিয়ভাবে পরাগ এবং অমৃত সংগ্রহ করে টিউবুলার বাসা গহ্বরের মধ্যে (প্রাকৃতিক বা কৃত্রিম) ব্রুড কোষের একটি সিরিজ সরবরাহ করে। কোষের ভিতরে পরাগের উপর ডিম পাড়া হয়; স্ত্রী মৌমাছি পরবর্তী কোষ প্রস্তুত করার আগে একটি মাটির প্রাচীর তৈরি করে। প্রথম ইনস্টার লার্ভা কোরিওনে আবদ্ধ থাকে এবং ভ্রূণ তরল খায়। দ্বিতীয় থেকে পঞ্চম ইনস্টার (প্রিপুপা) পর্যন্ত, লার্ভা পরাগ খায়। পরাগ সরবরাহ সম্পূর্ণরূপে নিঃশেষ হয়ে গেলে, লার্ভা কোকুন তৈরি করে, পিউপেট করে এবং একই ব্রুড চেম্বারে প্রাপ্তবয়স্ক হিসাবে আবির্ভূত হয়, সাধারণত গ্রীষ্মের শেষের দিকে20,23। প্রাপ্তবয়স্ক মৌমাছি পরবর্তী বসন্তে আবির্ভূত হয়। প্রাপ্তবয়স্কদের বেঁচে থাকা খাদ্য গ্রহণের উপর ভিত্তি করে নেট শক্তি বৃদ্ধি (ওজন বৃদ্ধি) এর সাথে সম্পর্কিত। সুতরাং, পরাগের পুষ্টির গুণমান, সেইসাথে আবহাওয়া বা কীটনাশকের সংস্পর্শের মতো অন্যান্য কারণগুলি বেঁচে থাকা এবং স্বাস্থ্যের নির্ধারক।
ফুল ফোটার আগে প্রয়োগ করা কীটনাশক এবং ছত্রাকনাশক উদ্ভিদের রক্তনালীতে বিভিন্ন মাত্রায় চলাচল করতে সক্ষম, ট্রান্সলামিনার (যেমন, পাতার উপরের পৃষ্ঠ থেকে নীচের পৃষ্ঠে স্থানান্তরিত হতে সক্ষম, কিছু ছত্রাকনাশকের মতো) 25 থেকে সত্যিকার অর্থে পদ্ধতিগত প্রভাব পর্যন্ত। , যা শিকড় থেকে মুকুট ভেদ করতে পারে, আপেল ফুলের অমৃত প্রবেশ করতে পারে 26, যেখানে তারা প্রাপ্তবয়স্ক O. cornifrons27 কে মেরে ফেলতে পারে। কিছু কীটনাশক পরাগরেও প্রবেশ করে, ভুট্টার লার্ভার বিকাশকে প্রভাবিত করে এবং তাদের মৃত্যুর কারণ হয় 19। অন্যান্য গবেষণায় দেখা গেছে যে কিছু ছত্রাকনাশক সম্পর্কিত প্রজাতির O. lignaria28 এর বাসা বাঁধার আচরণকে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তন করতে পারে। এছাড়াও, কীটনাশক এক্সপোজার পরিস্থিতি (ছত্রাকনাশক সহ) অনুকরণ করে পরীক্ষাগার এবং মাঠ গবেষণায় দেখা গেছে যে কীটনাশকগুলি মৌমাছি এবং কিছু একাকী মৌমাছির শারীরবৃত্তবিজ্ঞান 22 রূপবিদ্যা 29 এবং বেঁচে থাকার উপর নেতিবাচক প্রভাব ফেলে। ফুল ফোটার সময় খোলা ফুলে সরাসরি প্রয়োগ করা বিভিন্ন ছত্রাকনাশক স্প্রে লার্ভা বিকাশের জন্য প্রাপ্তবয়স্কদের দ্বারা সংগৃহীত পরাগকে দূষিত করতে পারে, যার প্রভাব এখনও অধ্যয়ন করা হয়নি 30।
এটি ক্রমবর্ধমানভাবে স্বীকৃত যে লার্ভা বিকাশ পরাগ এবং পাচনতন্ত্রের জীবাণু সম্প্রদায় দ্বারা প্রভাবিত হয়। মৌমাছির মাইক্রোবায়োম শরীরের ভর31, বিপাকীয় পরিবর্তন22 এবং রোগজীবাণুর প্রতি সংবেদনশীলতার মতো পরামিতিগুলিকে প্রভাবিত করে32। পূর্ববর্তী গবেষণায় একক মৌমাছির মাইক্রোবায়োমের উপর বিকাশের পর্যায়, পুষ্টি এবং পরিবেশের প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে। এই গবেষণায় একক মৌমাছির প্রজাতির মধ্যে লার্ভা এবং পরাগ মাইক্রোবায়োম33, সেইসাথে সবচেয়ে সাধারণ ব্যাকটেরিয়া জেনার সিউডোমোনাস এবং ডেলফটিয়ার গঠন এবং প্রাচুর্যের মিল প্রকাশ পেয়েছে। যাইহোক, যদিও ছত্রাকনাশক মৌমাছির স্বাস্থ্য রক্ষার কৌশলগুলির সাথে যুক্ত করা হয়েছে, সরাসরি মৌখিক এক্সপোজারের মাধ্যমে লার্ভা মাইক্রোবায়োটার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব অনাবিষ্কৃত রয়ে গেছে।
এই গবেষণায় মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে গাছের ফলের উপর ব্যবহারের জন্য নিবন্ধিত ছয়টি সাধারণভাবে ব্যবহৃত ছত্রাকনাশকের বাস্তব-বিশ্ব ডোজের প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে, যার মধ্যে দূষিত খাবার থেকে ভুট্টার শিংওয়ার্ম মথের লার্ভাতে মুখে মুখে দেওয়া সংস্পর্শ এবং পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। আমরা দেখতে পেয়েছি যে সংস্পর্শ এবং পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক মৌমাছির শরীরের ওজন বৃদ্ধি হ্রাস করে এবং মৃত্যুহার বৃদ্ধি করে, যার সবচেয়ে গুরুতর প্রভাব ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওপাইডের সাথে যুক্ত। এরপর আমরা ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ খাদ্যে খাওয়ানো লার্ভার জীবাণু বৈচিত্র্যের সাথে নিয়ন্ত্রণ খাদ্যে খাওয়ানো লার্ভার তুলনা করি। আমরা মৃত্যুর অন্তর্নিহিত সম্ভাব্য প্রক্রিয়া এবং সমন্বিত কীটপতঙ্গ এবং পরাগায়নকারী ব্যবস্থাপনা (IPPM)36 প্রোগ্রামের প্রভাব নিয়ে আলোচনা করি।
কোকুনে শীতকাল কাটানো প্রাপ্তবয়স্ক O. কর্নিফ্রনগুলি বিগলারভিল, পেনসিলভানিয়ার ফল গবেষণা কেন্দ্র থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং −3 থেকে 2°C (±0.3°C) তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। পরীক্ষার আগে (মোট 600 কোকুন)। 2022 সালের মে মাসে, 100টি O. কর্নিফ্রন কোকুন প্রতিদিন প্লাস্টিকের কাপে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল (প্রতি কাপে 50টি কোকুন, DI 5 সেমি × 15 সেমি লম্বা) এবং কাপের ভিতরে ওয়াইপ স্থাপন করা হয়েছিল যাতে খোলার সুবিধা হয় এবং একটি চিবানো যায় এমন সাবস্ট্রেট প্রদান করা হয়, যা পাথরের মৌমাছির উপর চাপ কমায়37। একটি পোকামাকড়ের খাঁচায় (30 × 30 × 30 সেমি, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) দুটি প্লাস্টিকের কাপ রাখুন যাতে কোকুন থাকে 10 মিলি ফিডারে 50% সুক্রোজ দ্রবণ থাকে এবং বন্ধ এবং মিলন নিশ্চিত করতে চার দিনের জন্য সংরক্ষণ করুন। 23°C, আপেক্ষিক আর্দ্রতা 60%, আলোককালীন সময়কাল 10 লি (কম তীব্রতা): 14 দিন। আপেলের ফুলের সর্বোচ্চ সময়কালে (ফাঁদের বাসা: প্রস্থ ৩৩.৬৬ × উচ্চতা ৩০.৪৮ × দৈর্ঘ্য ৪৬.৯৯ সেমি; পরিপূরক চিত্র ১) ছয় দিন ধরে প্রতিদিন সকালে ১০০টি সঙ্গমপ্রাপ্ত স্ত্রী ও পুরুষকে (প্রতিদিন ১০০টি) দুটি কৃত্রিম বাসায় ছেড়ে দেওয়া হয়। পেনসিলভানিয়া স্টেট আরবোরেটামে, চেরি (Prunus cerasus 'Eubank' Sweet Cherry Pie™), পীচ (Prunus persica 'Contender'), Prunus persica 'PF 27A' Flamin Fury®), নাশপাতি (Pyrus perifolia 'Olympic', Pyrus perifolia 'Shinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), coronaria apple tree (Malus coronaria) এবং অসংখ্য জাতের আপেল গাছ (Malus coronaria, Malus), গার্হস্থ্য আপেল গাছ 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus apple tree 'Co-Op 31′ Winecrisp™, begonia 'Freedom', Begonia 'Golden Delicious', Begonia 'Nova Spy') এর কাছাকাছি অবস্থিত। প্রতিটি নীল প্লাস্টিকের পাখির ঘর দুটি কাঠের বাক্সের উপরে ফিট করে। প্রতিটি নেস্ট বাক্সে ৮০০টি খালি ক্রাফ্ট পেপার টিউব (স্পাইরাল খোলা, ০.৮ সেমি আইডি × ১৫ সেমি লিটার) (জোন্সভিল পেপার টিউব কোং, মিশিগান) ছিল যা অস্বচ্ছ সেলোফেন টিউবে ঢোকানো হয়েছিল (০.৭ OD দেখুন প্লাস্টিক প্লাগ (T-1X প্লাগ) বাসা বাঁধার স্থান প্রদান করে।)
উভয় বাসা বাক্স পূর্ব দিকে মুখ করে রাখা হয়েছিল এবং ইঁদুর এবং পাখির প্রবেশ রোধ করার জন্য সবুজ প্লাস্টিকের বাগানের বেড়া (Everbilt মডেল #889250EB12, খোলার আকার 5 × 5 সেমি, 0.95 মি × 100 মি) দিয়ে আবৃত ছিল এবং বাসা বাক্সের মাটির বাক্সের পাশে মাটির পৃষ্ঠে স্থাপন করা হয়েছিল। বাসা বাক্স (পরিপূরক চিত্র 1a)। প্রতিদিন বাসা থেকে 30 টি টিউব সংগ্রহ করে পরীক্ষাগারে পরিবহন করে ভুট্টা পোকার ডিম সংগ্রহ করা হত। কাঁচি ব্যবহার করে, টিউবের শেষে একটি কাটা তৈরি করুন, তারপর ব্রুড কোষগুলি প্রকাশ করার জন্য সর্পিল টিউবটি খুলে ফেলুন। একটি বাঁকা স্প্যাটুলা ব্যবহার করে পৃথক ডিম এবং তাদের পরাগ অপসারণ করা হয়েছিল (মাইক্রোস্লাইড টুল কিট, বায়োকুইপ প্রোডাক্টস ইনকর্পোরেটেড, ক্যালিফোর্নিয়া)। ডিমগুলিকে স্যাঁতসেঁতে ফিল্টার পেপারে ইনকিউব করা হয়েছিল এবং আমাদের পরীক্ষায় ব্যবহারের আগে 2 ঘন্টা ধরে একটি পেট্রি ডিশে রাখা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র 1b-d)।
পরীক্ষাগারে, আমরা আপেল ফুল ফোটার আগে এবং ফুল ফোটার সময় প্রয়োগ করা ছয়টি ছত্রাকনাশকের মৌখিক বিষাক্ততার মূল্যায়ন করেছি তিনটি ঘনত্বে (0.1X, 0.5X, এবং 1X, যেখানে 1X হল প্রতি 100 গ্যালন জল/একর প্রয়োগের চিহ্ন। উচ্চ ক্ষেত্র ডোজ = ক্ষেতে ঘনত্ব)। , টেবিল 1)। প্রতিটি ঘনত্ব 16 বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল (n = 16)। দুটি সংস্পর্শ ছত্রাকনাশক (টেবিল S1: ম্যানকোজেব 2696.14 পিপিএম এবং ক্যাপ্টান 2875.88 পিপিএম) এবং চারটি পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক (টেবিল S1: পাইরিথিওস্ট্রোবিন 250.14 পিপিএম; ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন 110.06 পিপিএম; মাইক্লোবুটানিল অ্যাজোল 75 .12 পিপিএম; সাইপ্রোডিনিল 280.845 পিপিএম) ফল, শাকসবজি এবং শোভাময় ফসলের জন্য বিষাক্ততা। আমরা একটি গ্রাইন্ডার ব্যবহার করে পরাগরেণুকে একজাত করে তুলি, 0.20 গ্রাম একটি কূপে (24-কূপ ফ্যালকন প্লেট) স্থানান্তর করি, এবং 1 মিমি গভীর কূপের সাথে পিরামিডাল পরাগ তৈরি করতে 1 μL ছত্রাকনাশক দ্রবণ যোগ করে মিশিয়ে ডিম স্থাপন করা হয়েছিল। একটি ছোট স্প্যাটুলা ব্যবহার করে রাখুন (পরিপূরক চিত্র 1c,d)। ফ্যালকন প্লেটগুলি ঘরের তাপমাত্রায় (25°C) এবং 70% আপেক্ষিক আর্দ্রতায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। আমরা তাদের বিশুদ্ধ জল দিয়ে চিকিত্সা করা একটি সমজাতীয় পরাগরেণু খাদ্য খাওয়ানো নিয়ন্ত্রণ লার্ভার সাথে তুলনা করেছি। আমরা একটি বিশ্লেষণাত্মক ভারসাম্য ব্যবহার করে লার্ভা প্রিপুপাল বয়সে পৌঁছানো পর্যন্ত মৃত্যুহার রেকর্ড করেছি এবং প্রতি অন্য দিন লার্ভার ওজন পরিমাপ করেছি (ফিশার সায়েন্টিফিক, নির্ভুলতা = 0.0001 গ্রাম)। অবশেষে, 2.5 মাস পরে কোকুনটি খোলার মাধ্যমে লিঙ্গ অনুপাত মূল্যায়ন করা হয়েছিল।
সম্পূর্ণ O. cornifrons লার্ভা থেকে DNA বের করা হয়েছিল (প্রতি চিকিৎসার অবস্থায় n = 3, mancozeb-চিকিৎসা করা এবং অপরিশোধিত পরাগরেণু) এবং আমরা এই নমুনাগুলিতে মাইক্রোবায়াল বৈচিত্র্য বিশ্লেষণ করেছি, বিশেষ করে কারণ mancozeb-তে লার্ভাতে সর্বোচ্চ মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয়েছিল। MnZn গ্রহণ করে। DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA কিট (Zymo Research, Irvine, CA) ব্যবহার করে DNA বর্ধিত করা হয়েছিল, বিশুদ্ধ করা হয়েছিল এবং v3 কিট ব্যবহার করে একটি Illumina® MiSeq™-এ (600 চক্র) সিকোয়েন্স করা হয়েছিল। Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) ব্যবহার করে 16S rRNA জিনের V3-V4 অঞ্চলকে লক্ষ্য করে প্রাইমার ব্যবহার করে ব্যাকটেরিয়া 16S রাইবোসোমাল RNA জিনের লক্ষ্যবস্তু সিকোয়েন্সিং করা হয়েছিল। অতিরিক্তভাবে, 10% PhiX অন্তর্ভুক্তি ব্যবহার করে 18S সিকোয়েন্সিং করা হয়েছিল এবং প্রাইমার জোড়া 18S001 এবং NS4 ব্যবহার করে প্রশস্তকরণ করা হয়েছিল।
QIIME2 পাইপলাইন (v2022.11.1) ব্যবহার করে জোড়াযুক্ত পাঠগুলি আমদানি এবং প্রক্রিয়া করুন। এই পাঠগুলি ছাঁটাই এবং একত্রিত করা হয়েছিল, এবং QIIME2 (qiime dada2 noise pairing)40-এ DADA2 প্লাগইন ব্যবহার করে কাইমেরিক ক্রমগুলি সরানো হয়েছিল। 16S এবং 18S ক্লাস অ্যাসাইনমেন্টগুলি অবজেক্ট ক্লাসিফায়ার প্লাগইন Classify-sklearn এবং প্রাক-প্রশিক্ষিত আর্টিফ্যাক্ট silva-138-99-nb-classifier ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল।
সমস্ত পরীক্ষামূলক তথ্য স্বাভাবিকতা (শাপিরো-উইল্কস) এবং বৈচিত্র্যের একজাতীয়তা (লেভেনের পরীক্ষা) পরীক্ষা করা হয়েছিল। যেহেতু ডেটা সেট প্যারামেট্রিক বিশ্লেষণের অনুমান পূরণ করেনি এবং রূপান্তর অবশিষ্টাংশগুলিকে মানসম্মত করতে ব্যর্থ হয়েছে, তাই আমরা লার্ভা তাজা ওজনের উপর চিকিত্সার প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য দুটি ফ্যাক্টর [সময় (তিন-পর্যায় 2, 5, এবং 8 দিনের সময় পয়েন্ট) এবং ছত্রাকনাশক] সহ একটি নন-প্যারামেট্রিক দ্বি-মুখী ANOVA (ক্রুস্কাল-ওয়ালিস) সম্পাদন করেছি, তারপরে উইলকক্সন পরীক্ষা ব্যবহার করে পোস্টহক নন-প্যারামেট্রিক জোড়াওয়াইজ তুলনা করা হয়েছিল। আমরা তিনটি ছত্রাকনাশক ঘনত্বের মধ্যে বেঁচে থাকার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব তুলনা করার জন্য পয়সন বিতরণ সহ একটি সাধারণীকৃত রৈখিক মডেল (GLM) ব্যবহার করেছি41,42। ডিফারেনশিয়াল প্রাচুর্য বিশ্লেষণের জন্য, অ্যামপ্লিকন সিকোয়েন্স ভেরিয়েন্টের (ASVs) সংখ্যা জেনাস স্তরে সংকুচিত করা হয়েছিল। 16S (জেনাস লেভেল) এবং 18S আপেক্ষিক প্রাচুর্য ব্যবহার করে গোষ্ঠীগুলির মধ্যে ডিফারেনশিয়াল প্রাচুর্যের তুলনা করা হয়েছিল অবস্থান, স্কেল এবং আকৃতির জন্য একটি সাধারণীকৃত অ্যাডিটিভ মডেল (GAMLSS) ব্যবহার করে বিটা জিরো-ইনফ্লেটেড (BEZI) ফ্যামিলি ডিস্ট্রিবিউশন সহ, যা মাইক্রোবায়োম R43 (v1.1) এ একটি ম্যাক্রোর উপর মডেল করা হয়েছিল। 1)। ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের আগে মাইটোকন্ড্রিয়াল এবং ক্লোরোপ্লাস্ট প্রজাতি অপসারণ করুন। 18S এর বিভিন্ন ট্যাক্সোনমিক স্তরের কারণে, ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের জন্য প্রতিটি ট্যাক্সনের কেবলমাত্র সর্বনিম্ন স্তর ব্যবহার করা হয়েছিল। সমস্ত পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ R (v. 3.4.3., CRAN প্রকল্প) (টিম 2013) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের সংস্পর্শে O. কর্নিফ্রনের শরীরের ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 1)। মূল্যায়ন করা তিনটি ডোজের জন্যই এই প্রভাবগুলি ধারাবাহিকভাবে পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে (চিত্র 1a–c)। সাইক্লোস্ট্রোবিন এবং মাইক্লোবুটানিল লার্ভার ওজন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেনি।
চারটি খাদ্যতালিকাগত চিকিৎসার অধীনে তিনটি সময় বিন্দুতে কান্ড ছিদ্রকারী লার্ভার গড় তাজা ওজন পরিমাপ করা হয়েছে (একজাত পরাগ খাদ্য + ছত্রাকনাশক: নিয়ন্ত্রণ, 0.1X, 0.5X এবং 1X ডোজ)। (ক) কম ডোজ (0.1X): প্রথম সময় বিন্দু (দিন 1): χ2: 30.99, DF = 6; P < 0.0001, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (দিন 5): 22.83, DF = 0.0009; তৃতীয় সময়; পয়েন্ট (দিন 8): χ2: 28.39, DF = 6; (খ) অর্ধেক ডোজ (0.5X): প্রথম সময় বিন্দু (দিন 1): χ2: 35.67, DF = 6; P < 0.0001, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (দিন 1)। ): χ2: 15.98, DF = 6; P = 0.0090; তৃতীয় সময় বিন্দু (দিন ৮) χ2: 16.47, DF = 6; (c) স্থান বা পূর্ণ ডোজ (1X): প্রথম সময় বিন্দু (দিন ১) χ2: 20.64, P = 6; P = 0.0326, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (দিন ৫): χ2: 22.83, DF = 6; P = 0.0009; তৃতীয় সময় বিন্দু (দিন ৮): χ2: 28.39, DF = 6; প্রকরণের অ-প্যারামেট্রিক বিশ্লেষণ। বারগুলি জোড়াওয়ালা তুলনার গড় ± SE প্রতিনিধিত্ব করে (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001।
সর্বনিম্ন মাত্রা (০.১ গুণ) গ্রহণ করলে, ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন ব্যবহার করে লার্ভার ওজন ৬০%, ম্যানকোজেব ব্যবহার করে ৪৯%, মাইক্লোবুটানিল ব্যবহার করে ৪৮% এবং পাইরিথিস্ট্রোবিন ব্যবহার করে ৪৬% হ্রাস পায় (চিত্র ১ক)। অর্ধেক ফিল্ড ডোজ (০.৫ গুণ) গ্রহণ করলে, ম্যানকোজেব লার্ভার শরীরের ওজন ৮৬%, পাইরিথিওস্ট্রোবিন ব্যবহার করে ৫২% এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন ব্যবহার করে ৫০% (চিত্র ১খ) হ্রাস পায়। ম্যানকোজেবের পূর্ণ ফিল্ড ডোজ (১গুণ) গ্রহণ করলে লার্ভার ওজন ৮২%, পাইরিথিওস্ট্রোবিন ব্যবহার করে ৭০% এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন, মাইক্লোবুটানিল এবং সাঙ্গার্ড ব্যবহার করে প্রায় ৩০% (চিত্র ১গ) হ্রাস পায়।
ম্যানকোজেব-চিকিৎসা করা পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভাদের মধ্যে মৃত্যুর হার সবচেয়ে বেশি ছিল, তারপরে পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন রয়েছে। ম্যানকোজেব এবং পাইরিটিসোলিনের মাত্রা বৃদ্ধির সাথে সাথে মৃত্যুর হার বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 2; সারণী 2)। তবে, ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে ভুট্টা ছিদ্রকারী পোকার মৃত্যুহার সামান্যই বৃদ্ধি পেয়েছে; নিয়ন্ত্রণ চিকিৎসার তুলনায় সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপ্টান মৃত্যুহার উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেনি।
ছয়টি ভিন্ন ছত্রাকনাশক দিয়ে পৃথকভাবে চিকিত্সা করা পরাগ গ্রহণের পরে বোরার মাছি লার্ভার মৃত্যুহার তুলনা করা হয়েছিল। ম্যানকোজেব এবং পেন্টোপাইরামাইড ভুট্টার পোকার মুখে সংস্পর্শে আসার ক্ষেত্রে বেশি সংবেদনশীল ছিল (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (রেখা, ঢাল = 0.29, P < 0.001; ঢাল = 0.24, P < 0.00))।
গড়ে, সমস্ত চিকিৎসায়, ৩৯.০৫% রোগী ছিলেন মহিলা এবং ৬০.৯৫% পুরুষ। নিয়ন্ত্রণ চিকিৎসার মধ্যে, কম-মাত্রা (০.১X) এবং অর্ধ-মাত্রা (০.৫X) উভয় গবেষণায় মহিলাদের অনুপাত ছিল ৪০% এবং ফিল্ড-ডোজ (১X) গবেষণায় ৩০%। ০.১X ডোজে, ম্যানকোজেব এবং মাইক্লোবুটানিল দিয়ে চিকিৎসা করা পরাগ-খাওয়ানো লার্ভার মধ্যে, ৩৩.৩৩% প্রাপ্তবয়স্ক মহিলা, ২২% প্রাপ্তবয়স্ক মহিলা, ৪৪% প্রাপ্তবয়স্ক লার্ভা মহিলা, ৪১% প্রাপ্তবয়স্ক লার্ভা মহিলা এবং নিয়ন্ত্রণ ছিল ৩১% (চিত্র ৩ক)। ০.৫ গুণ ডোজ গ্রহণের পর, ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওস্ট্রোবিন গ্রুপের ৩৩% প্রাপ্তবয়স্ক কৃমি ছিল মহিলা, ৩৬% ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন গ্রুপে, ৪১% মাইক্লোবুটানিল গ্রুপে এবং ৪৬% সাইপ্রোস্ট্রোবিন গ্রুপে। এই সংখ্যা ছিল ক্যাপ্টান গ্রুপে ৫৩% এবং নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে ৩৮% (চিত্র ৩খ)। ১X ডোজ গ্রহণের পর, ম্যানকোজেব গ্রুপের ৩০% মহিলা, ৩৬% পাইরিথিওস্ট্রোবিন গ্রুপে, ৪৪% ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন গ্রুপে, ৩৮% মাইক্লোবুটানিল গ্রুপে, ৫০% নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে - ৩৮.৫% (চিত্র ৩গ)।
লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশকের সংস্পর্শে আসার পর স্ত্রী ও পুরুষ পোকার শতকরা হার। (ক) কম মাত্রা (০.১ গুণ)। (খ) অর্ধেক মাত্রা (০.৫ গুণ)। (গ) জমিতে মাত্রা বা পূর্ণ মাত্রা (১ গুণ)।
১৬S সিকোয়েন্স বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে ব্যাকটেরিয়া গ্রুপটি ম্যানকোজেব-চিকিৎসা পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভা এবং অপরিশোধিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার মধ্যে পার্থক্য করেছে (চিত্র ৪ক)। পরাগরেণু খাওয়ানো অপ্রয়োজনীয় লার্ভার মাইক্রোবায়াল সূচক ম্যানকোজেব-চিকিৎসা পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার তুলনায় বেশি ছিল (চিত্র ৪খ)। যদিও গোষ্ঠীগুলির মধ্যে সমৃদ্ধিতে পরিলক্ষিত পার্থক্য পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ ছিল না, তবে অপরিশোধিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার তুলনায় এটি উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র ৪গ)। আপেক্ষিক প্রাচুর্য দেখায় যে নিয়ন্ত্রণ পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার মাইক্রোবায়োটা ম্যানকোজেব-চিকিৎসা করা লার্ভার তুলনায় বেশি বৈচিত্র্যময় ছিল (চিত্র ৫ক)। বর্ণনামূলক বিশ্লেষণে নিয়ন্ত্রণ এবং ম্যানকোজেব-চিকিৎসা করা নমুনায় ২৮টি প্রজাতির উপস্থিতি প্রকাশ পেয়েছে (চিত্র ৫খ)। c ১৮S সিকোয়েন্সিং ব্যবহার করে বিশ্লেষণে কোনও উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পাওয়া যায়নি (পরিপূরক চিত্র ২)।
১৬S সিকোয়েন্সের উপর ভিত্তি করে SAV প্রোফাইলগুলি শ্যানন সমৃদ্ধির সাথে তুলনা করা হয়েছিল এবং ফাইলাম স্তরে পর্যবেক্ষণ করা সমৃদ্ধির সাথে তুলনা করা হয়েছিল। (ক) পরাগ-খাওয়ানো বা নিয়ন্ত্রণ (নীল) এবং ম্যানকোজেব-খাওয়ানো লার্ভা (কমলা) এর সামগ্রিক মাইক্রোবায়াল সম্প্রদায় কাঠামোর উপর ভিত্তি করে প্রধান স্থানাঙ্ক বিশ্লেষণ (PCoA)। প্রতিটি ডেটা পয়েন্ট একটি পৃথক নমুনা উপস্থাপন করে। মাল্টিভেরিয়েট টি বিতরণের ব্রে-কার্টিস দূরত্ব ব্যবহার করে PCoA গণনা করা হয়েছিল। ডিম্বাকৃতি ৮০% আত্মবিশ্বাস স্তরের প্রতিনিধিত্ব করে। (খ) বক্সপ্লট, কাঁচা শ্যানন সম্পদ ডেটা (পয়েন্ট) এবং গ। পর্যবেক্ষণযোগ্য সম্পদ। বক্সপ্লটগুলি মধ্যমা রেখা, আন্তঃচতুর্থাংশ পরিসর (IQR) এবং 1.5 × IQR (n = 3) এর জন্য বাক্স দেখায়।
ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত এবং অপরিশোধিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার জীবাণু সম্প্রদায়ের গঠন। (ক) লার্ভাতে জীবাণু বংশের আপেক্ষিক প্রাচুর্য। (খ) চিহ্নিত জীবাণু সম্প্রদায়ের তাপ মানচিত্র। ডেলফটিয়া (অডস রেশিও (OR) = 0.67, P = 0.0030) এবং সিউডোমোনাস (OR = 0.3, P = 0.0074), মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060); পারস্পরিক সম্পর্ক দূরত্ব এবং গড় সংযোগ ব্যবহার করে তাপ মানচিত্রের সারিগুলিকে গুচ্ছবদ্ধ করা হয়েছে।
আমাদের ফলাফল দেখায় যে ফুল ফোটার সময় ব্যাপকভাবে ব্যবহৃত সংস্পর্শ (ম্যানকোজেব) এবং সিস্টেমিক (পাইরোস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন) ছত্রাকনাশকের মুখে ব্যবহারের ফলে ভুট্টার লার্ভার ওজন বৃদ্ধি এবং মৃত্যুহার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। এছাড়াও, ম্যানকোজেব প্রিপুপাল পর্যায়ে মাইক্রোবায়োমের বৈচিত্র্য এবং সমৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। মাইক্লোবুটানিল, আরেকটি সিস্টেমিক ছত্রাকনাশক, তিনটি মাত্রাতেই লার্ভার শরীরের ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। দ্বিতীয় (দিন ৫) এবং তৃতীয় (দিন ৮) সময়ে এই প্রভাব স্পষ্ট ছিল। বিপরীতে, সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপ্টান নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় ওজন বৃদ্ধি বা বেঁচে থাকার হার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেনি। আমাদের জানা মতে, সরাসরি পরাগরেণুর সংস্পর্শের মাধ্যমে ভুট্টা ফসল রক্ষা করার জন্য ব্যবহৃত বিভিন্ন ছত্রাকনাশকের ক্ষেত্রের হারের প্রভাব নির্ধারণের জন্য এই কাজটিই প্রথম।
নিয়ন্ত্রণ চিকিৎসার তুলনায় সকল ছত্রাকনাশক চিকিৎসা শরীরের ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। লার্ভা শরীরের ওজন বৃদ্ধির উপর ম্যানকোজেব সর্বাধিক প্রভাব ফেলেছে, গড়ে ৫১% হ্রাস পেয়েছে, তারপরে পাইরিথিওস্ট্রোবিন। তবে, অন্যান্য গবেষণায় লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশকের ক্ষেত্রের ডোজের প্রতিকূল প্রভাবের রিপোর্ট পাওয়া যায়নি44। যদিও ডাইথিওকার্বামেট বায়োসাইডের তীব্র বিষাক্ততা কম দেখানো হয়েছে45, ইথিলিন বিসডিথিওকার্বামেটস (EBDCS) যেমন ম্যানকোজেব ইউরিয়া ইথিলিন সালফাইডে ক্ষয় হতে পারে। অন্যান্য প্রাণীতে এর মিউটেজেনিক প্রভাবের কারণে, এই অবক্ষয় পণ্যটি পর্যবেক্ষণ করা প্রভাবগুলির জন্য দায়ী হতে পারে46,47। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে ইথিলিন থিওরিয়া গঠন উচ্চ তাপমাত্রা48, আর্দ্রতার মাত্রা49 এবং পণ্য সংরক্ষণের দৈর্ঘ্য50 এর মতো কারণগুলির দ্বারা প্রভাবিত হয়। বায়োসাইডের জন্য সঠিক সংরক্ষণের অবস্থা এই পার্শ্ব প্রতিক্রিয়াগুলিকে হ্রাস করতে পারে। এছাড়াও, ইউরোপীয় খাদ্য সুরক্ষা কর্তৃপক্ষ পাইরিথিওপাইডের বিষাক্ততা সম্পর্কে উদ্বেগ প্রকাশ করেছে, যা অন্যান্য প্রাণীর পাচনতন্ত্রের জন্য কার্সিনোজেনিক হিসাবে দেখানো হয়েছে51।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন মুখে সেবন করলে ভুট্টা পোকার লার্ভার মৃত্যুহার বৃদ্ধি পায়। বিপরীতে, মাইক্লোবুটানিল, সিপ্রোসাইক্লিন এবং ক্যাপ্টান মৃত্যুর হারের উপর কোনও প্রভাব ফেলেনি। এই ফলাফলগুলি ল্যাডুর্নার এট আল.52 এর থেকে আলাদা, যারা দেখিয়েছেন যে ক্যাপ্টান প্রাপ্তবয়স্ক O. lignaria এবং Apis mellifera L. (Hymenoptera, Apisidae) এর বেঁচে থাকা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। এছাড়াও, ক্যাপ্টান এবং বোসক্যালিডের মতো ছত্রাকনাশক লার্ভার মৃত্যুহার52,53,54 বা খাওয়ানোর আচরণ পরিবর্তন করতে দেখা গেছে55। এই পরিবর্তনগুলি, ফলস্বরূপ, পরাগরেণের পুষ্টির গুণমান এবং শেষ পর্যন্ত লার্ভার পর্যায়ে শক্তি বৃদ্ধিকে প্রভাবিত করতে পারে। নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীতে পরিলক্ষিত মৃত্যুহার অন্যান্য গবেষণার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল 56,57।
আমাদের গবেষণায় পুরুষ-প্রিয় লিঙ্গ অনুপাতের কারণ হিসেবে দেখা গেছে, ফুল ফোটার সময় অপর্যাপ্ত মিলন এবং খারাপ আবহাওয়া, যেমনটি পূর্বে ভিসেনস এবং বোশ O. cornuta-এর জন্য পরামর্শ দিয়েছিলেন। যদিও আমাদের গবেষণায় স্ত্রী এবং পুরুষদের মিলনের জন্য চার দিন সময় ছিল (সাধারণত সফল মিলনের জন্য যথেষ্ট সময়কাল), আমরা ইচ্ছাকৃতভাবে চাপ কমানোর জন্য আলোর তীব্রতা কমিয়েছি। তবে, এই পরিবর্তন অনিচ্ছাকৃতভাবে মিলন প্রক্রিয়ায় হস্তক্ষেপ করতে পারে61। এছাড়াও, মৌমাছিরা বৃষ্টিপাত এবং নিম্ন তাপমাত্রা (<5°C) সহ বেশ কয়েক দিন প্রতিকূল আবহাওয়ার সম্মুখীন হয়, যা মিলনের সাফল্যের উপর নেতিবাচক প্রভাব ফেলতে পারে4,23।
যদিও আমাদের গবেষণাটি সম্পূর্ণ লার্ভা মাইক্রোবায়োমের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছিল, আমাদের ফলাফল ব্যাকটেরিয়া সম্প্রদায়ের মধ্যে সম্ভাব্য সম্পর্কের অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে যা মৌমাছির পুষ্টি এবং ছত্রাকনাশকের সংস্পর্শে আসার জন্য গুরুত্বপূর্ণ হতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, লার্ভা ম্যানকোজেব-চিকিৎসা পরাগ খাওয়ানোর ফলে অণুজীব সম্প্রদায়ের গঠন এবং প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে লার্ভা অপরিশোধিত পরাগ খাওয়ানোর তুলনায়। অপরিশোধিত পরাগ গ্রহণকারী লার্ভাগুলিতে, প্রোটিওব্যাকটেরিয়া এবং অ্যাক্টিনোব্যাকটেরিয়া ব্যাকটেরিয়া গ্রুপগুলি প্রভাবশালী ছিল এবং প্রধানত বায়বীয় বা অনুষদভাবে বায়বীয় ছিল। ডেলফ্ট ব্যাকটেরিয়া, যা সাধারণত একক মৌমাছি প্রজাতির সাথে যুক্ত, অ্যান্টিবায়োটিক কার্যকলাপ ধারণ করে বলে জানা যায়, যা রোগজীবাণুগুলির বিরুদ্ধে সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক ভূমিকা নির্দেশ করে। আরেকটি ব্যাকটেরিয়া প্রজাতি, সিউডোমোনাস, অপরিশোধিত পরাগ খাওয়ানো লার্ভাতে প্রচুর পরিমাণে ছিল, কিন্তু ম্যানকোজেব-চিকিৎসা করা লার্ভাতে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। আমাদের ফলাফলগুলি সিউডোমোনাসকে O. bicornis35 এবং অন্যান্য একক ওয়াপস34-এর মধ্যে সবচেয়ে প্রচুর পরিমাণে জেনারার মধ্যে একটি হিসাবে চিহ্নিত করার পূর্ববর্তী গবেষণাগুলিকে সমর্থন করে। যদিও O. cornifrons-এর স্বাস্থ্যের উপর Pseudomonas-এর ভূমিকার পরীক্ষামূলক প্রমাণ অধ্যয়ন করা হয়নি, তবুও এই ব্যাকটেরিয়াটি Paederus fuscipes-এ প্রতিরক্ষামূলক বিষাক্ত পদার্থের সংশ্লেষণকে উৎসাহিত করে এবং ভিট্রো 35, 65-এ আর্জিনাইন বিপাককে উৎসাহিত করে। এই পর্যবেক্ষণগুলি O. cornifrons লার্ভার বিকাশের সময় ভাইরাল এবং ব্যাকটেরিয়া প্রতিরক্ষায় একটি সম্ভাব্য ভূমিকার ইঙ্গিত দেয়। আমাদের গবেষণায় চিহ্নিত আরেকটি প্রজাতি হল মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম যা অনাহার পরিস্থিতিতে কালো সৈনিক মাছি লার্ভাতে উচ্চ সংখ্যায় উপস্থিত থাকে বলে জানা গেছে। O. cornifrons লার্ভাতে, মাইক্রোব্যাকটেরিয়া চাপের পরিস্থিতিতে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োমের ভারসাম্য এবং স্থিতিস্থাপকতায় অবদান রাখতে পারে। অতিরিক্তভাবে, রোডোকোকাস O. cornifrons লার্ভাতে পাওয়া যায় এবং এটি তার ডিটক্সিফিকেশন ক্ষমতার জন্য পরিচিত 67। এই প্রজাতি A. florea-এর অন্ত্রেও পাওয়া যায়, তবে খুব কম পরিমাণে 68। আমাদের ফলাফল অসংখ্য মাইক্রোবায়াল ট্যাক্সায় একাধিক জেনেটিক বৈচিত্র্যের উপস্থিতি প্রদর্শন করে যা লার্ভাতে বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলিকে পরিবর্তন করতে পারে। তবে, O. cornifrons এর কার্যকরী বৈচিত্র্য সম্পর্কে আরও ভালোভাবে বোঝার প্রয়োজন।
সংক্ষেপে, ফলাফলগুলি ইঙ্গিত দেয় যে ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন শরীরের ওজন বৃদ্ধি হ্রাস করেছে এবং ভুট্টা পোকার লার্ভার মৃত্যুহার বৃদ্ধি করেছে। যদিও পরাগায়নকারীদের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব নিয়ে উদ্বেগ বাড়ছে, তবুও এই যৌগগুলির অবশিষ্ট বিপাকের প্রভাবগুলি আরও ভালভাবে বোঝার প্রয়োজন। এই ফলাফলগুলি সমন্বিত পরাগায়নকারী ব্যবস্থাপনা কর্মসূচির সুপারিশগুলিতে অন্তর্ভুক্ত করা যেতে পারে যা কৃষকদের ফলের গাছে ফুল ফোটার আগে এবং সময়কালে ছত্রাকনাশক নির্বাচন করে এবং প্রয়োগের সময় পরিবর্তন করে, অথবা কম ক্ষতিকারক বিকল্প ব্যবহারকে উৎসাহিত করে 36 নির্দিষ্ট ছত্রাকনাশক ব্যবহার এড়াতে সহায়তা করে। কীটনাশক ব্যবহারের সুপারিশ তৈরির জন্য এই তথ্য গুরুত্বপূর্ণ, যেমন বিদ্যমান স্প্রে প্রোগ্রামগুলি সামঞ্জস্য করা এবং ছত্রাকনাশক নির্বাচন করার সময় স্প্রে সময় পরিবর্তন করা বা কম বিপজ্জনক বিকল্প ব্যবহার প্রচার করা। লিঙ্গ অনুপাত, খাওয়ানোর আচরণ, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োম এবং ভুট্টা পোকার ওজন হ্রাস এবং মৃত্যুহারের অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলির উপর ছত্রাকনাশকের প্রতিকূল প্রভাব সম্পর্কে আরও গবেষণা প্রয়োজন।
চিত্র ১ এবং ২-এর উৎস তথ্য ১, ২ এবং ৩ ফিগশেয়ার ডেটা রিপোজিটরি ডিওআই-তে জমা করা হয়েছে: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 এবং https://doi.org/10.6084/m9. figshare.24996233। বর্তমান গবেষণায় বিশ্লেষণ করা ক্রমগুলি (চিত্র ৪, ৫) NCBI SRA রিপোজিটরিতে অ্যাক্সেস নম্বর PRJNA1023565-এর অধীনে উপলব্ধ।
বোশ, জে. এবং কেম্প, ডব্লিউপি কৃষি ফসলের পরাগায়নকারী হিসেবে মধু মৌমাছি প্রজাতির উন্নয়ন এবং প্রতিষ্ঠা: অসমিয়া গণের উদাহরণ। (হাইমেনোপ্টেরা: মেগাচিলিডি) এবং ফলের গাছ। ষাঁড়। এনটোমোর। সম্পদ। 92, 3–16 (2002)।
পার্কার, এমজি প্রমুখ। নিউ ইয়র্ক এবং পেনসিলভানিয়ার আপেল চাষীদের মধ্যে পরাগায়ন অনুশীলন এবং বিকল্প পরাগায়নকারীদের ধারণা। আপডেট। কৃষি। খাদ্য ব্যবস্থা। ৩৫, ১–১৪ (২০২০)।
কোচ আই., লন্সডর্ফ ইডব্লিউ, আর্টজ ডিআর, পিটস-সিঙ্গার টিএল এবং রিকেটস টিএইচ দেশীয় মৌমাছি ব্যবহার করে বাদাম পরাগায়নের বাস্তুশাস্ত্র এবং অর্থনীতি। জে. অর্থনীতি। এনটোমোর। ১১১, ১৬-২৫ (২০১৮)।
লি, ই., হি, ওয়াই., এবং পার্ক, ওয়াই.-এল. ট্র্যাগোপান ফেনোলজির উপর জলবায়ু পরিবর্তনের প্রভাব: জনসংখ্যা ব্যবস্থাপনার উপর প্রভাব। আরোহণ। পরিবর্তন 150, 305–317 (2018)।
Artz, DR এবং Pitts-Singer, TL দুটি পরিচালিত একক মৌমাছির (Osmia lignaria এবং Megachile rotundata) বাসা বাঁধার আচরণের উপর ছত্রাকনাশক এবং সহায়ক স্প্রেগুলির প্রভাব। PloS One 10, e0135688 (2015)।
Beauvais, S. et al. একটি কম-বিষাক্ত ফসলের ছত্রাকনাশক (fenbuconazole) পুরুষ প্রজনন মানের সংকেতে হস্তক্ষেপ করে যার ফলে বন্য একাকী মৌমাছিদের মধ্যে মিলনের সাফল্য হ্রাস পায়। J. Apps. ecology. 59, 1596–1607 (2022)।
স্গোলাস্ট্রা এফ. এট আল। নিওনিকোটিনয়েড কীটনাশক এবং এরগোস্টেরল জৈব সংশ্লেষণ তিনটি মৌমাছি প্রজাতির মধ্যে সিনেরজিস্টিক ছত্রাকনাশক মৃত্যুহার দমন করে। কীটপতঙ্গ নিয়ন্ত্রণ। বিজ্ঞান। 73, 1236–1243 (2017)।
কুহনেম্যান জেজি, গিলুং জে, ভ্যান ডাইক এমটি, ফোর্ডাইস আরএফ এবং ড্যানফোর্থ বিএন সলিটারি ওয়াস্প লার্ভা কাণ্ড-বাসা বাঁধা মৌমাছিদের পরাগ দ্বারা সরবরাহিত ব্যাকটেরিয়া বৈচিত্র্যকে পরিবর্তন করে। ওসমিয়া কর্নিফ্রন (মেগাচিলিডি)। সামনের দিকে। অণুজীব। ১৩, ১০৫৭৬২৬ (২০২৩)।
ধরমপাল পিএস, ড্যানফোর্থ বিএন এবং স্টেফান এসএ। গাঁজনিত পরাগরে থাকা ইক্টোসিম্বিওটিক অণুজীবগুলি একক মৌমাছির বিকাশের জন্য পরাগের মতোই গুরুত্বপূর্ণ। বাস্তুশাস্ত্র। বিবর্তন। 12. e8788 (2022)।
কেল্ডেরার এম, ম্যানিসি এলএম, ক্যাপুটো এফ এবং থ্যালহেইমার এম। আপেল বাগানে আন্তঃসারি রোপণ পুনর্বীজ রোগ নিয়ন্ত্রণের জন্য: জীবাণু সূচকের উপর ভিত্তি করে একটি ব্যবহারিক কার্যকারিতা অধ্যয়ন। উদ্ভিদ মাটি 357, 381–393 (2012)।
মার্টিন পিএল, ক্রাভচিক টি., খোদাদাদি এফ., আচিমোভিচ এসজি এবং পিটার কেএ মধ্য-আটলান্টিক মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে আপেলের তিক্ত পচা: কার্যকারক প্রজাতির মূল্যায়ন এবং আঞ্চলিক আবহাওয়া পরিস্থিতি এবং চাষের সংবেদনশীলতার প্রভাব। ফাইটোপ্যাথোলজি 111, 966–981 (2021)।
কুলেন এমজি, থম্পসন এলজে, ক্যারোলান জেকে, স্টাউট জেকে। এবং স্ট্যানলি ডিএ ছত্রাকনাশক, ভেষজনাশক এবং মৌমাছি: বিদ্যমান গবেষণা এবং পদ্ধতিগুলির একটি পদ্ধতিগত পর্যালোচনা। পিএলওএস ওয়ান ১৪, e0225743 (2019)।
পিলিং, ইডি এবং জেপসন, পিসি মধু মৌমাছির উপর EBI ছত্রাকনাশক এবং পাইরেথ্রয়েড কীটনাশকের সিনারজিস্টিক প্রভাব (এপিস মেলিফেরা)। বিজ্ঞানের কীটপতঙ্গ। 39, 293–297 (1993)।
মুসেন, ইসি, লোপেজ, জেই এবং পেং, সিওয়াই মধু মৌমাছির লার্ভা এপিস মেলিফেরা এল. (হাইমেনোপ্টেরা: এপিডে) এর বৃদ্ধি এবং বিকাশের উপর নির্বাচিত ছত্রাকনাশকের প্রভাব। বুধবার। এনটোমোর। ৩৩, ১১৫১-১১৫৪ (২০০৪)।
ভ্যান ডাইক, এম., মুলেন, ই., উইকস্টেড, ডি., এবং ম্যাকআর্ট, এস. গাছের বাগানে পরাগরেণু রক্ষার জন্য কীটনাশক ব্যবহারের সিদ্ধান্ত নির্দেশিকা (কর্নেল বিশ্ববিদ্যালয়, ২০১৮)।
ইওয়াসাকি, জেএম এবং হোগেনডোর্ন, কে। মৌমাছিদের অ-কীটনাশকের সংস্পর্শে আসা: পদ্ধতি এবং রিপোর্ট করা ফলাফলের পর্যালোচনা। কৃষি। বাস্তুতন্ত্র। বুধবার। 314, 107423 (2021)।
কোপিট এএম, ক্লিঙ্গার ই, কক্স-ফস্টার ডিএল, রামিরেজ আরএ। এবং পিটস-সিঙ্গার টিএল ওসমিয়া লিগনারিয়া (হাইমেনোপ্টেরা: মেগাচিলিডি) এর লার্ভা বিকাশের উপর সরবরাহের ধরণ এবং কীটনাশকের সংস্পর্শের প্রভাব। বুধবার। এনটোমোর। ৫১, ২৪০–২৫১ (২০২২)।
কপিট এএম এবং পিটস-সিঙ্গার টিএল একাকী খালি বাসায় থাকা মৌমাছির কীটনাশকের সংস্পর্শে আসার পথ। বুধবার। এনটোমোর। ৪৭, ৪৯৯–৫১০ (২০১৮)।
প্যান, এনটি এবং অন্যান্যরা। প্রাপ্তবয়স্ক জাপানি বাগানের মৌমাছির (ওসমিয়া কর্নিফ্রন) কীটনাশকের বিষাক্ততা মূল্যায়নের জন্য একটি নতুন ইনজেকশন বায়োঅ্যাসে প্রোটোকল। বিজ্ঞান। রিপোর্ট 10, 9517 (2020)।