ছত্রাকনাশক সম্পূরক নির্জন রাজমিস্ত্রি মৌমাছির নেট শক্তি লাভ এবং মাইক্রোবায়োম বৈচিত্র্য হ্রাস করে।

Nature.com পরিদর্শন করার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ.আপনি যে ব্রাউজারের সংস্করণ ব্যবহার করছেন সেটি সীমিত সিএসএস সমর্থন করে।সেরা ফলাফলের জন্য, আমরা আপনাকে আপনার ব্রাউজারের একটি নতুন সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিই (বা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে সামঞ্জস্য মোড অক্ষম করুন)।ইতিমধ্যে, চলমান সমর্থন নিশ্চিত করতে, আমরা স্টাইলিং বা জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই সাইটটি প্রদর্শন করছি।
ছত্রাকনাশক প্রায়শই গাছের ফল ফুলে যাওয়ার সময় ব্যবহার করা হয় এবং পোকা পরাগায়নকারীকে হুমকি দিতে পারে।যাইহোক, অ-মৌমাছি পরাগায়নকারীরা (যেমন, নির্জন মৌমাছি, অসমিয়া কর্নিফ্রন) কীভাবে যোগাযোগের প্রতিক্রিয়া জানায় এবং সাধারণত ফুল ফোটার সময় আপেলে ব্যবহৃত পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশকগুলি সম্পর্কে খুব কমই জানা যায়।এই জ্ঞানের ফাঁক নিরাপদ ঘনত্ব এবং ছত্রাকনাশক স্প্রে করার সময় নির্ধারণ করে নিয়ন্ত্রক সিদ্ধান্তগুলিকে সীমিত করে।আমরা দুটি যোগাযোগের ছত্রাকনাশক (ক্যাপ্টান এবং ম্যানকোজেব) এবং চারটি ইন্টারলেয়ার/ফাইটোসিস্টেম ছত্রাকনাশকের (সিপ্রোসাইক্লিন, মাইক্লোবুটানিল, পাইরোস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিন) এর প্রভাব মূল্যায়ন করেছি।লার্ভা ওজন বৃদ্ধি, বেঁচে থাকা, লিঙ্গ অনুপাত এবং ব্যাকটেরিয়া বৈচিত্র্যের উপর প্রভাব।মূল্যায়নটি একটি দীর্ঘস্থায়ী মৌখিক বায়োসাই ব্যবহার করে পরিচালিত হয়েছিল যেখানে ক্ষেত্র ব্যবহারের জন্য বর্তমানে প্রস্তাবিত ডোজ (1X), অর্ধেক ডোজ (0.5X) এবং কম ডোজ (0.1X) এর উপর ভিত্তি করে পরাগকে তিনটি ডোজে চিকিত্সা করা হয়েছিল।ম্যানকোজেব এবং পাইরিটিসোলিনের সমস্ত ডোজ শরীরের ওজন এবং লার্ভা বেঁচে থাকা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে।তারপরে আমরা 16S জিনকে ক্রমানুসারে ম্যানকোজেবের লার্ভা ব্যাকটেরিয়ামকে চিহ্নিত করি, যা সর্বোচ্চ মৃত্যুর জন্য দায়ী ছত্রাকনাশক।আমরা দেখতে পেয়েছি যে ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ খাওয়ানো লার্ভাগুলিতে ব্যাকটেরিয়া বৈচিত্র্য এবং প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে।আমাদের পরীক্ষাগারের ফলাফলগুলি নির্দেশ করে যে ফুল ফোটার সময় এই ছত্রাকনাশকগুলির কিছু স্প্রে করা O. cornifrons এর স্বাস্থ্যের জন্য বিশেষভাবে ক্ষতিকারক।এই তথ্য ফল গাছ সুরক্ষা পণ্যের টেকসই ব্যবহার সম্পর্কিত ভবিষ্যতের ব্যবস্থাপনার সিদ্ধান্তের জন্য প্রাসঙ্গিক এবং পরাগায়নকারীদের রক্ষার লক্ষ্যে নিয়ন্ত্রক প্রক্রিয়াগুলির ভিত্তি হিসাবে কাজ করে।
একাকী রাজমিস্ত্রি মৌমাছি অসমিয়া কর্নিফ্রনস (হাইমেনোপ্টেরা: মেগাচিলিডে) 1970-এর দশকের শেষের দিকে এবং 1980-এর দশকের গোড়ার দিকে জাপান থেকে মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে প্রবর্তিত হয়েছিল, এবং প্রজাতিটি তখন থেকেই পরিচালিত বাস্তুতন্ত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ পরাগায়নকারী ভূমিকা পালন করেছে।এই মৌমাছির প্রাকৃতিক জনসংখ্যা প্রায় 50 প্রজাতির বন্য মৌমাছির অংশ যা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বাদাম এবং আপেল বাগানে পরাগায়নকারী মৌমাছির পরিপূরক।রাজমিস্ত্রি মৌমাছি অনেক চ্যালেঞ্জের সম্মুখীন হয়, যার মধ্যে বাসস্থানের বিভাজন, রোগজীবাণু এবং কীটনাশক ৩,৪।কীটনাশকের মধ্যে, ছত্রাকনাশক শক্তি বৃদ্ধি, ফোরেজিং5 এবং শরীরের কন্ডিশনিং 6,7 হ্রাস করে।যদিও সাম্প্রতিক গবেষণা পরামর্শ দেয় যে মেসন মৌমাছির স্বাস্থ্য সরাসরি কমেন্সাল এবং একটোব্যাকটিক অণুজীবের দ্বারা প্রভাবিত হয়, 8,9 কারণ ব্যাকটেরিয়া এবং ছত্রাক পুষ্টি এবং রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতাকে প্রভাবিত করতে পারে, মেসন মৌমাছির জীবাণু বৈচিত্র্যের উপর ছত্রাকনাশক এক্সপোজারের প্রভাব সবেমাত্র শুরু হয়েছে। অধ্যয়নরত
আপেল স্ক্যাব, তিক্ত পচা, বাদামী পচা এবং পাউডারি মিলডিউ 10,11 এর মতো রোগের চিকিত্সার জন্য ফুল ফোটার আগে এবং সময় বাগানে বিভিন্ন প্রভাবের ছত্রাকনাশক (যোগাযোগ এবং পদ্ধতিগত) স্প্রে করা হয়।ছত্রাকনাশকগুলি পরাগায়নকারীদের জন্য ক্ষতিকারক হিসাবে বিবেচিত হয়, তাই ফুলের সময়কালে উদ্যানপালকদের কাছে এগুলি সুপারিশ করা হয়;মৌমাছিদের দ্বারা এই ছত্রাকনাশকগুলির এক্সপোজার এবং গ্রহণ তুলনামূলকভাবে সুপরিচিত, কারণ এটি ইউএস এনভায়রনমেন্টাল প্রোটেকশন এজেন্সি এবং অন্যান্য অনেক জাতীয় নিয়ন্ত্রক সংস্থা দ্বারা কীটনাশক নিবন্ধন প্রক্রিয়ার অংশ।যাইহোক, অ-মৌমাছির উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব কম জানা যায় কারণ মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বিপণন অনুমোদন চুক্তির অধীনে এগুলোর প্রয়োজন নেই।উপরন্তু, একক মৌমাছি 16,17 পরীক্ষা করার জন্য সাধারণত কোন প্রমিত প্রোটোকল নেই এবং পরীক্ষার জন্য মৌমাছি সরবরাহকারী উপনিবেশগুলি বজায় রাখা চ্যালেঞ্জিং18।বন্য মৌমাছির উপর কীটনাশকের প্রভাব অধ্যয়ন করার জন্য ইউরোপ এবং মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বিভিন্ন পরিচালিত মৌমাছির ট্রায়াল ক্রমবর্ধমানভাবে পরিচালিত হচ্ছে এবং সম্প্রতি O. cornifrons19-এর জন্য প্রমিত প্রোটোকল তৈরি করা হয়েছে।
শিংওয়ালা মৌমাছি হল মনোসাইট এবং বাণিজ্যিকভাবে কার্প ফসলে মধু মৌমাছির সম্পূরক বা প্রতিস্থাপন হিসাবে ব্যবহৃত হয়।এই মৌমাছিরা মার্চ থেকে এপ্রিলের মধ্যে আবির্ভূত হয়, স্ত্রীদের থেকে তিন থেকে চার দিন আগে অকাল পুরুষের উদ্ভব হয়।মিলনের পর, মহিলা টিউবুলার নেস্ট ক্যাভিটি (প্রাকৃতিক বা কৃত্রিম) 1,20 এর মধ্যে ব্রুড কোষগুলির একটি সিরিজ সরবরাহ করতে সক্রিয়ভাবে পরাগ এবং অমৃত সংগ্রহ করে।ডিম কোষের ভিতরে পরাগ উপর পাড়া হয়;মহিলা তারপর পরবর্তী কোষ প্রস্তুত করার আগে একটি মাটির প্রাচীর তৈরি করে।প্রথম ইনস্টার লার্ভা কোরিয়নে আবদ্ধ থাকে এবং ভ্রূণীয় তরল খায়।দ্বিতীয় থেকে পঞ্চম ইনস্টার (প্রিপুপা), লার্ভা পরাগ 22 খায়।পরাগ সরবরাহ সম্পূর্ণরূপে শেষ হয়ে গেলে, লার্ভা কোকুন, পিউপেট গঠন করে এবং একই ব্রুড চেম্বারে প্রাপ্তবয়স্ক হিসাবে আবির্ভূত হয়, সাধারণত গ্রীষ্মের শেষের দিকে 20,23।প্রাপ্তবয়স্করা পরবর্তী বসন্তে আবির্ভূত হয়।প্রাপ্তবয়স্কদের বেঁচে থাকা খাদ্য গ্রহণের উপর ভিত্তি করে নেট শক্তি বৃদ্ধির (ওজন বৃদ্ধি) সাথে যুক্ত।এইভাবে, পরাগের পুষ্টিগুণ, সেইসাথে আবহাওয়া বা কীটনাশকের সংস্পর্শের মতো অন্যান্য কারণগুলি বেঁচে থাকা এবং স্বাস্থ্যের নির্ধারক।
ফুল ফোটার আগে প্রয়োগ করা কীটনাশক এবং ছত্রাকনাশকগুলি উদ্ভিদের ভাস্কুলেচারের মধ্যে বিভিন্ন ডিগ্রীতে স্থানান্তর করতে সক্ষম হয়, ট্রান্সলামিনার (যেমন, কিছু ছত্রাকনাশকের মতো পাতার উপরের পৃষ্ঠ থেকে নীচের পৃষ্ঠে যেতে সক্ষম) 25 সত্যিকারের পদ্ধতিগত প্রভাবে।, যা শিকড় থেকে মুকুট ভেদ করতে পারে, আপেল ফুলের অমৃত প্রবেশ করতে পারে 26, যেখানে তারা প্রাপ্তবয়স্ক O. cornifrons27 কে হত্যা করতে পারে।কিছু কীটনাশক পরাগরেণুতেও প্রবেশ করে, যা ভুট্টার লার্ভার বিকাশকে প্রভাবিত করে এবং তাদের মৃত্যু ঘটায়।অন্যান্য গবেষণায় দেখা গেছে যে কিছু ছত্রাকনাশক সম্পর্কিত প্রজাতি O. lignaria28 এর বাসা বাঁধার আচরণকে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তন করতে পারে।উপরন্তু, কীটনাশক এক্সপোজার পরিস্থিতির (ছত্রাকনাশক সহ) অনুকরণকারী পরীক্ষাগার এবং মাঠ গবেষণায় দেখা গেছে যে কীটনাশকগুলি শারীরবৃত্ত 22 রূপবিদ্যা 29 এবং মধু মৌমাছি এবং কিছু নির্জন মৌমাছির বেঁচে থাকাকে নেতিবাচকভাবে প্রভাবিত করে।ফুলের সময় খোলা ফুলে সরাসরি প্রয়োগ করা বিভিন্ন ছত্রাকনাশক স্প্রে লার্ভা বিকাশের জন্য প্রাপ্তবয়স্কদের দ্বারা সংগ্রহ করা পরাগকে দূষিত করতে পারে, যার প্রভাবগুলি অধ্যয়ন করা বাকি আছে30।
এটি ক্রমবর্ধমানভাবে স্বীকৃত যে লার্ভা বিকাশ পরিপাকতন্ত্রের পরাগ এবং জীবাণু সম্প্রদায়ের দ্বারা প্রভাবিত হয়।মৌমাছির মাইক্রোবায়োম শরীরের ভর 31, বিপাকীয় পরিবর্তন22 এবং প্যাথোজেনের প্রতি সংবেদনশীলতার মতো পরামিতিগুলিকে প্রভাবিত করে।পূর্ববর্তী গবেষণায় নির্জন মৌমাছির মাইক্রোবায়োমের উপর উন্নয়নমূলক পর্যায়, পুষ্টি এবং পরিবেশের প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে।এই অধ্যয়নগুলি নির্জন মৌমাছি প্রজাতির মধ্যে লার্ভা এবং পরাগ মাইক্রোবায়োম 33 এর গঠন এবং প্রাচুর্যের সাথে সাথে সবচেয়ে সাধারণ ব্যাকটেরিয়া জেনার সিউডোমোনাস এবং ডেলফটিয়াতে মিল প্রকাশ করেছে।যাইহোক, যদিও ছত্রাকনাশকগুলি মৌমাছির স্বাস্থ্য রক্ষার কৌশলগুলির সাথে যুক্ত করা হয়েছে, সরাসরি মৌখিক এক্সপোজারের মাধ্যমে লার্ভা মাইক্রোবায়োটার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাবগুলি অনাবিষ্কৃত রয়ে গেছে।
এই গবেষণায় মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে গাছের ফলের ব্যবহারের জন্য নিবন্ধিত ছয়টি সাধারণভাবে ব্যবহৃত ছত্রাকনাশকের বাস্তব-বিশ্বের ডোজগুলির প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে, যার মধ্যে দূষিত খাদ্য থেকে ভুট্টার শিংওয়ার্ম মথ লার্ভাকে মৌখিকভাবে দেওয়া যোগাযোগ এবং পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক অন্তর্ভুক্ত।আমরা দেখতে পেয়েছি যে যোগাযোগ এবং পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক মৌমাছির শরীরের ওজন বৃদ্ধি এবং মৃত্যুহার বৃদ্ধি করেছে, যার সাথে ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওপাইডের সাথে জড়িত সবচেয়ে মারাত্মক প্রভাব রয়েছে।তারপরে আমরা ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ খাদ্যে খাওয়ানো লার্ভাগুলির মাইক্রোবায়াল বৈচিত্র্যকে নিয়ন্ত্রণ ডায়েটে খাওয়ানোর সাথে তুলনা করেছি।আমরা ইন্টিগ্রেটেড পেস্ট অ্যান্ড পলিনেটর ম্যানেজমেন্ট (IPPM)36 প্রোগ্রামগুলির জন্য অন্তর্নিহিত মৃত্যুর সম্ভাব্য প্রক্রিয়া এবং প্রভাব নিয়ে আলোচনা করি।
প্রাপ্তবয়স্ক ও. কর্নিফ্রনগুলি কোকুনগুলিতে শীতকালে পড়েছিল ফল গবেষণা কেন্দ্র, বিগলারভিল, PA থেকে প্রাপ্ত হয়েছিল এবং −3 থেকে 2°C (±0.3°C) তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল।পরীক্ষার আগে (মোট 600 কোকুন)।2022 সালের মে মাসে, 100টি O. কর্নিফ্রন কোকুনকে প্রতিদিন প্লাস্টিকের কাপে স্থানান্তরিত করা হয়েছিল (প্রতি কাপে 50টি কোকুন, DI 5 সেমি × 15 সেমি লম্বা) এবং খোলাকে উৎসাহিত করতে এবং চিবানো যায় এমন সাবস্ট্রেট প্রদানের জন্য কাপের ভিতরে ওয়াইপগুলি স্থাপন করা হয়েছিল, যা পাথরের উপর চাপ কমায়। মৌমাছি37।50% সুক্রোজ দ্রবণযুক্ত 10 মিলি ফিডার সহ একটি পোকার খাঁচায় (30 × 30 × 30 সেমি, বাগডোর্ম মেগাভিউ সায়েন্স কোং লিমিটেড, তাইওয়ান) কোকুনযুক্ত দুটি প্লাস্টিকের কাপ রাখুন এবং বন্ধ এবং মিলন নিশ্চিত করতে চার দিনের জন্য সংরক্ষণ করুন।23°C, আপেক্ষিক আর্দ্রতা 60%, ফটোপিরিয়ড 10 l (কম তীব্রতা): 14 দিন।100টি মিলিত মহিলা এবং পুরুষকে প্রতিদিন সকালে ছয় দিনের জন্য (প্রতিদিন 100টি) পিক আপেল ফুল ফোটার সময় দুটি কৃত্রিম নীড়ে ছেড়ে দেওয়া হয়েছিল (ফাঁদের বাসা: প্রস্থ 33.66 × উচ্চতা 30.48 × দৈর্ঘ্য 46.99 সেমি; পরিপূরক চিত্র 1)।পেনসিলভেনিয়া স্টেট আরবোরেটামে, চেরি (প্রুনাস সিরাসাস 'ইউব্যাঙ্ক' মিষ্টি চেরি পাই™), পীচ (প্রুনাস পারসিকা 'প্রতিযোগী'), প্রুনাস পারসিকা 'পিএফ 27A' ফ্ল্যামিন ফিউরি®), নাশপাতি (পাইরাস পেরিফোলিয়া 'অলিম্পিক', পিরাস) perifolia 'Sinko', Pyrus perifolia 'Shinseiki'), করোনারিয়া আপেল ট্রি (Malus coronaria) এবং আপেল গাছের অসংখ্য জাত (Malus coronaria, Malus), ঘরোয়া আপেল গাছ 'Co-op 30′ Enterprise™, Malus apple tree' Co- Op31′ Winecrisp™, বেগোনিয়া 'ফ্রিডম', বেগোনিয়া 'গোল্ডেন ডেলিসিয়াস', বেগোনিয়া 'নোভা স্পাই')।প্রতিটি নীল প্লাস্টিকের বার্ডহাউস দুটি কাঠের বাক্সের উপরে ফিট করে।প্রতিটি নেস্ট বক্সে 800টি খালি ক্রাফ্ট পেপার টিউব (সর্পিল ওপেন, 0.8 সেমি আইডি × 15 সেমি এল) (জোনসভিল পেপার টিউব কোং, মিশিগান) অস্বচ্ছ সেলোফেন টিউবগুলিতে ঢোকানো (0.7 OD দেখুন প্লাস্টিক প্লাগ (T-1X প্লাগ) নেস্টিং সাইট সরবরাহ করে .
উভয় নেস্ট বাক্স পূর্ব দিকে মুখ করে এবং সবুজ প্লাস্টিকের বাগানের বেড়া দিয়ে আবৃত ছিল (এভারবিল্ট মডেল #889250EB12, খোলার আকার 5 × 5 সেমি, 0.95 মি × 100 মি) ইঁদুর এবং পাখির প্রবেশ রোধ করতে এবং নেস্ট বক্সের মাটির পাশে মাটির পৃষ্ঠে স্থাপন করা হয়েছিল। বাক্সনেস্ট বক্স (পরিপূরক চিত্র 1a)।বাসা থেকে 30 টি টিউব সংগ্রহ করে পরীক্ষাগারে পরিবহন করে প্রতিদিন ভুট্টার ডিম সংগ্রহ করা হয়।কাঁচি ব্যবহার করে, টিউবের শেষে একটি কাটা তৈরি করুন, তারপর ব্রুড কোষগুলিকে প্রকাশ করতে সর্পিল টিউবটিকে বিচ্ছিন্ন করুন।একটি বাঁকা স্প্যাটুলা (মাইক্রোস্লাইড টুল কিট, বায়োকুইপ প্রোডাক্টস ইনক।, ক্যালিফোর্নিয়া) ব্যবহার করে পৃথক ডিম এবং তাদের পরাগ অপসারণ করা হয়েছিল।ডিমগুলি স্যাঁতসেঁতে ফিল্টার পেপারে সিদ্ধ করা হয়েছিল এবং আমাদের পরীক্ষায় ব্যবহার করার আগে 2 ঘন্টার জন্য একটি পেট্রি ডিশে রাখা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র 1b-d)।
পরীক্ষাগারে, আমরা তিনটি ঘনত্বে (0.1X, 0.5X, এবং 1X, যেখানে 1X হল প্রতি 100 গ্যালন জল/একর উপর প্রয়োগ করা চিহ্ন। উচ্চ ক্ষেত্রের ডোজ = ঘনত্ব মাঠে)।, 1 নং টেবিল)।প্রতিটি ঘনত্ব 16 বার পুনরাবৃত্তি হয়েছিল (n = 16)।দুটি পরিচিত ছত্রাকনাশক (টেবিল S1: mancozeb 2696.14 ppm এবং captan 2875.88 ppm) এবং চারটি পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক (টেবিল S1: pyrithiostrobin 250.14 ppm; trifloxystrobin 110.06 ppm; myclobutanil azole p25.5pm) ফলমূল, শাকসবজি এবং শোভাময় ফসল .আমরা গ্রাইন্ডার ব্যবহার করে পরাগকে একত্রিত করেছি, 0.20 গ্রাম একটি কূপে স্থানান্তর করেছি (24-ওয়েল ফ্যালকন প্লেট), এবং 1 μL ছত্রাকনাশক দ্রবণ যোগ করে মিশ্রিত করে পিরামিডাল পরাগ তৈরি করে 1 মিমি গভীর কূপের সাথে যেখানে ডিমগুলি স্থাপন করা হয়েছিল।একটি মিনি স্প্যাটুলা ব্যবহার করে রাখুন (পরিপূরক চিত্র 1c,d)।ফ্যালকন প্লেটগুলি ঘরের তাপমাত্রায় (25°C) এবং 70% আপেক্ষিক আর্দ্রতায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল।আমরা তাদের তুলনা করেছি নিয়ন্ত্রণ লার্ভার সাথে একটি সমজাতীয় পরাগ খাদ্য খাওয়ানো যা বিশুদ্ধ জল দিয়ে চিকিত্সা করা হয়।লার্ভা একটি বিশ্লেষণাত্মক ভারসাম্য (ফিশার সায়েন্টিফিক, সঠিকতা = 0.0001 গ্রাম) ব্যবহার করে প্রিপুপাল বয়সে না পৌঁছানো পর্যন্ত আমরা মৃত্যুর হার রেকর্ড করি এবং লার্ভা ওজন পরিমাপ করি।অবশেষে, 2.5 মাস পরে কোকুন খোলার মাধ্যমে লিঙ্গ অনুপাত মূল্যায়ন করা হয়েছিল।
সম্পূর্ণ O. কর্নিফ্রন লার্ভা (n = 3 প্রতি চিকিত্সা অবস্থা, ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা এবং অপরিশোধিত পরাগ) থেকে ডিএনএ বের করা হয়েছিল এবং আমরা এই নমুনাগুলিতে মাইক্রোবিয়াল বৈচিত্র্য বিশ্লেষণ করেছি, বিশেষ করে কারণ ম্যানকোজেবে লার্ভাতে সর্বোচ্চ মৃত্যু পরিলক্ষিত হয়েছিল।MnZn গ্রহণ করা হচ্ছে।DNA কে পরিবর্ধিত করা হয়েছে, DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA কিট (Zymo Research, Irvine, CA) ব্যবহার করে বিশুদ্ধ করা হয়েছে এবং v3 কিট ব্যবহার করে একটি Illumina® MiSeq™ এ সিকোয়েন্সড (600 সাইকেল) করা হয়েছে।ব্যাকটেরিয়া 16S রাইবোসোমাল আরএনএ জিনের টার্গেটেড সিকোয়েন্সিং Quick-16S™ NGS লাইব্রেরি প্রিপ কিট (Zymo Research, Irvine, CA) ব্যবহার করে 16S rRNA জিনের V3-V4 অঞ্চলকে লক্ষ্য করে প্রাইমার ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল।অতিরিক্তভাবে, 18S সিকোয়েন্সিং 10% PhiX অন্তর্ভুক্তি ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল, এবং প্রাইমার পেয়ার 18S001 এবং NS4 ব্যবহার করে পরিবর্ধন করা হয়েছিল।
QIIME2 পাইপলাইন (v2022.11.1) ব্যবহার করে পেয়ার করা রিডস39 আমদানি এবং প্রক্রিয়া করুন।এই রিডগুলি ছাঁটা এবং একত্রিত করা হয়েছিল, এবং QIIME2 (qiime dada2 নয়েজ পেয়ারিং)40-এ DADA2 প্লাগইন ব্যবহার করে চিমেরিক সিকোয়েন্সগুলি সরানো হয়েছিল।অবজেক্ট ক্লাসিফায়ার প্লাগইন Classify-sklearn এবং প্রাক-প্রশিক্ষিত আর্টিফ্যাক্ট silva-138-99-nb-classifier ব্যবহার করে 16S এবং 18S ক্লাস অ্যাসাইনমেন্ট করা হয়েছিল।
সমস্ত পরীক্ষামূলক ডেটা স্বাভাবিকতার জন্য পরীক্ষা করা হয়েছিল (শাপিরো-উইল্কস) এবং বৈচিত্রগুলির একজাততা (লেভেনের পরীক্ষা)।যেহেতু ডেটা সেটটি প্যারামেট্রিক বিশ্লেষণের অনুমানগুলি পূরণ করেনি এবং রূপান্তরটি অবশিষ্টাংশকে মানক করতে ব্যর্থ হয়েছিল, আমরা দুটি কারণের সাথে একটি ননপ্যারামেট্রিক দ্বিমুখী আনোভা (ক্রুসকাল-ওয়ালিস) সম্পাদন করেছি [সময় (তিন-ফেজ 2, 5 এবং 8 দিন) টাইম পয়েন্ট) এবং ছত্রাকনাশক] লার্ভা তাজা ওজনের উপর চিকিত্সার প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য, তারপর উইলকক্সন পরীক্ষা ব্যবহার করে পোস্ট-হক ননপ্যারামেট্রিক যুগলভিত্তিক তুলনা করা হয়েছিল।আমরা তিনটি ছত্রাকনাশকের ঘনত্ব 41,42 জুড়ে বেঁচে থাকার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব তুলনা করতে পয়সন বিতরণ সহ একটি সাধারণ লিনিয়ার মডেল (GLM) ব্যবহার করেছি।ডিফারেনশিয়াল প্রাচুর্য বিশ্লেষণের জন্য, অ্যামপ্লিকন সিকোয়েন্স ভেরিয়েন্টের সংখ্যা (ASVs) জেনাস স্তরে ভেঙে পড়েছিল।16S (জেনাস লেভেল) এবং 18S আপেক্ষিক প্রাচুর্য ব্যবহার করে গোষ্ঠীর মধ্যে ডিফারেনশিয়াল প্রাচুর্যের তুলনা বিটা শূন্য-স্ফীত (BEZI) ফ্যামিলি ডিস্ট্রিবিউশনের সাথে অবস্থান, স্কেল এবং আকৃতি (GAMLSS) এর জন্য একটি সাধারণ সংযোজন মডেল ব্যবহার করে সঞ্চালিত হয়েছিল, যা একটি ম্যাক্রোতে মডেল করা হয়েছিল। .মাইক্রোবায়োম R43 (v1.1) এ।1)।ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের আগে মাইটোকন্ড্রিয়াল এবং ক্লোরোপ্লাস্ট প্রজাতিগুলি সরান।18S এর বিভিন্ন শ্রেণীবিন্যাস স্তরের কারণে, প্রতিটি ট্যাক্সনের সর্বনিম্ন স্তরটি ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের জন্য ব্যবহৃত হয়েছিল।সমস্ত পরিসংখ্যান বিশ্লেষণ R (v. 3.4.3., CRAN প্রকল্প) (টিম 2013) ব্যবহার করে সম্পাদিত হয়েছিল।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিনের সংস্পর্শে ও. কর্নিফ্রন (চিত্র 1) এর শরীরের ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে।এই প্রভাবগুলি মূল্যায়ন করা তিনটি ডোজের জন্য ধারাবাহিকভাবে পরিলক্ষিত হয়েছিল (চিত্র 1a–c)।সাইক্লোস্ট্রবিন এবং মাইক্লোবুটানিল লার্ভার ওজন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেনি।
স্টেম বোরর লার্ভার গড় তাজা ওজন চারটি খাদ্যতালিকাগত চিকিত্সার (একজাতীয় পরাগ খাদ্য + ছত্রাকনাশক: নিয়ন্ত্রণ, 0.1X, 0.5X এবং 1X ডোজ) এর অধীনে তিন সময়ে পরিমাপ করা হয়।(a) কম ডোজ (0.1X): প্রথম সময় পয়েন্ট (দিন 1): χ2: 30.99, DF = 6;P < 0.0001, দ্বিতীয় সময় পয়েন্ট (দিন 5): 22.83, DF = 0.0009;তৃতীয় সময়;পয়েন্ট (দিন 8): χ2: 28.39, DF = 6;(b) অর্ধেক ডোজ (0.5X): প্রথমবার পয়েন্ট (দিন 1): χ2: 35.67, DF = 6;P < 0.0001, দ্বিতীয়বার পয়েন্ট (প্রথম দিন)।): χ2: 15.98, DF = 6;পি = 0.0090;তৃতীয় সময় পয়েন্ট (দিন 8) χ2: 16.47, DF = 6;(c) সাইট বা সম্পূর্ণ ডোজ (1X): প্রথম সময় পয়েন্ট (দিন 1) χ2: 20.64, P = 6;P = 0.0326, দ্বিতীয় সময় পয়েন্ট (দিন 5): χ2: 22.83, DF = 6;পি = 0.0009;তৃতীয় সময় পয়েন্ট (দিন 8): χ2: 28.39, DF = 6;বৈচিত্র্যের ননপ্যারামেট্রিক বিশ্লেষণ।বারগুলি জোড়াভিত্তিক তুলনার গড় ± SE প্রতিনিধিত্ব করে (α = 0.05) (n = 16) *P ≤ 0.05, **P ≤ 0.001, ***P ≤ 0.0001।
সর্বনিম্ন ডোজে (0.1X), লার্ভা শরীরের ওজন ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিনের সাথে 60%, ম্যানকোজেবের সাথে 49%, মাইক্লোবুটানিলের সাথে 48% এবং পাইরিথিস্ট্রোবিনের সাথে 46% হ্রাস পেয়েছে (চিত্র 1a)।অর্ধেক ফিল্ড ডোজ (0.5X) এর সংস্পর্শে এলে, ম্যানকোজেব লার্ভার শরীরের ওজন 86%, পাইরিথিওস্ট্রবিন 52% এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিন 50% (চিত্র 1b) দ্বারা হ্রাস পায়।ম্যানকোজেবের একটি সম্পূর্ণ ফিল্ড ডোজ (1X) লার্ভা ওজন 82%, পাইরিথিওস্ট্রবিন 70% এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রবিন, মাইক্লোবুটানিল এবং সানগার্ড প্রায় 30% (চিত্র 1c) হ্রাস করে।
ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ খাওয়ানো লার্ভাগুলির মধ্যে মৃত্যুর হার সবচেয়ে বেশি ছিল, তারপরে পাইরিথিওস্ট্রবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রবিন।ম্যানকোজেব এবং পাইরিটিসোলিনের ক্রমবর্ধমান মাত্রার সাথে মৃত্যুহার বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র 2; টেবিল 2)।যাইহোক, ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রোবিনের ঘনত্ব বৃদ্ধি পাওয়ায় ভুট্টা পোকার মৃত্যুহার সামান্য বেড়েছে;সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপ্টান নিয়ন্ত্রণ চিকিত্সার তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে মৃত্যুহার বাড়ায়নি।
ছয়টি ভিন্ন ভিন্ন ছত্রাকনাশক দিয়ে পৃথকভাবে চিকিত্সা করা পরাগ গ্রহণের পর পোকার মাছি লার্ভা মৃত্যুর হার তুলনা করা হয়েছিল।ম্যানকোজেব এবং পেন্টোপাইরামাইড ভুট্টা ম্যাগটস (GLM: χ = 29.45, DF = 20, P = 0.0059) (লাইন, ঢাল = 0.29, P < 0.001; ঢাল = 0.24, <0.20, P) মৌখিক সংস্পর্শে আরও সংবেদনশীল ছিল।
গড়ে, সমস্ত চিকিত্সা জুড়ে, 39.05% রোগী ছিলেন মহিলা এবং 60.95% পুরুষ।নিয়ন্ত্রণ চিকিত্সার মধ্যে, মহিলাদের অনুপাত কম ডোজ (0.1X) এবং অর্ধ-ডোজ (0.5X) উভয় গবেষণায় 40% এবং ফিল্ড-ডোজ (1X) গবেষণায় 30% ছিল।0.1X ডোজ এ, ম্যানকোজেব এবং মাইক্লোবুটানিল দিয়ে চিকিত্সা করা পরাগ খাওয়ানো লার্ভাগুলির মধ্যে, 33.33% প্রাপ্তবয়স্ক ছিল মহিলা, 22% প্রাপ্তবয়স্ক মহিলা, 44% প্রাপ্তবয়স্ক লার্ভা মহিলা, 44% প্রাপ্তবয়স্ক লার্ভা ছিল মহিলা৷মহিলা, প্রাপ্তবয়স্ক লার্ভাগুলির 41% ছিল মহিলা, এবং নিয়ন্ত্রণগুলি ছিল 31% (চিত্র 3a)।ডোজ 0.5 গুণে, ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওস্ট্রবিন গ্রুপের 33% প্রাপ্তবয়স্ক কৃমি ছিল মহিলা, 36% ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রবিন গ্রুপে, 41% মাইক্লোবুটানিল গ্রুপে এবং 46% সাইপ্রোস্ট্রোবিন গ্রুপে।গ্রুপে এই সংখ্যা ছিল 53%।ক্যাপ্টান গ্রুপে এবং কন্ট্রোল গ্রুপে 38% (চিত্র 3b)।1X ডোজে, ম্যানকোজেব গ্রুপের 30% মহিলা, 36% পাইরিথিওস্ট্রবিন গ্রুপ, 44% ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিন গ্রুপ, 38% মাইক্লোবিউটানিল গ্রুপ, 50% কন্ট্রোল গ্রুপ মহিলা - 38.5% (চিত্র 3c) .
লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশক এক্সপোজারের পর মহিলা ও পুরুষ পোকার শতকরা হার।(a) কম ডোজ (0.1X)।(b) অর্ধেক ডোজ (0.5X)।(c) ফিল্ড ডোজ বা সম্পূর্ণ ডোজ (1X)।
16S ক্রম বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে ব্যাকটেরিয়া গ্রুপ ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ দিয়ে খাওয়ানো লার্ভা এবং অপরিশোধিত পরাগ দিয়ে খাওয়ানো লার্ভার মধ্যে পার্থক্য রয়েছে (চিত্র 4a)।ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ (ছবি 4বি) এ খাওয়ানো লার্ভার থেকে পরাগ খাওয়ানো অপরিশোধিত লার্ভার মাইক্রোবিয়াল সূচক বেশি ছিল।যদিও গোষ্ঠীগুলির মধ্যে সমৃদ্ধির মধ্যে পরিলক্ষিত পার্থক্য পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ ছিল না, তবে এটি অপরিশোধিত পরাগকে লার্ভা খাওয়ানোর তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র 4c)।আপেক্ষিক প্রাচুর্য দেখায় যে নিয়ন্ত্রণ পরাগকে খাওয়ানো লার্ভার মাইক্রোবায়োটা ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা লার্ভা (চিত্র 5 এ) খাওয়ানো লার্ভার তুলনায় বেশি বৈচিত্র্যময়।বর্ণনামূলক বিশ্লেষণে নিয়ন্ত্রণে 28টি প্রজন্মের উপস্থিতি এবং ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা নমুনা (চিত্র 5বি) প্রকাশ করা হয়েছে।c 18S সিকোয়েন্সিং ব্যবহার করে বিশ্লেষণে কোন উল্লেখযোগ্য পার্থক্য দেখা যায়নি (পরিপূরক চিত্র 2)।
16S সিকোয়েন্সের উপর ভিত্তি করে SAV প্রোফাইলগুলি শ্যানন সমৃদ্ধির সাথে তুলনা করা হয়েছিল এবং ফাইলাম স্তরে সমৃদ্ধি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল।(ক) অপরিশোধিত পরাগ-খাওয়া বা নিয়ন্ত্রণ (নীল) এবং ম্যানকোজেব-ফেড লার্ভা (কমলা) সামগ্রিক মাইক্রোবায়াল সম্প্রদায়ের কাঠামোর উপর ভিত্তি করে প্রধান সমন্বয় বিশ্লেষণ (পিসিওএ)।প্রতিটি ডেটা পয়েন্ট একটি পৃথক নমুনা প্রতিনিধিত্ব করে।পিসিওএ মাল্টিভেরিয়েট টি ডিস্ট্রিবিউশনের ব্রে-কার্টিস দূরত্ব ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল।ওভাল 80% আত্মবিশ্বাসের স্তরের প্রতিনিধিত্ব করে।(b) বক্সপ্লট, কাঁচা শ্যানন সম্পদ ডেটা (পয়েন্ট) এবং গ।পর্যবেক্ষণযোগ্য সম্পদ।বক্সপ্লট মধ্যরেখা, ইন্টারকোয়ার্টাইল রেঞ্জ (IQR), এবং 1.5 × IQR (n = 3) এর জন্য বক্স দেখায়।
ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা এবং অপরিশোধিত পরাগকে খাওয়ানো লার্ভাগুলির মাইক্রোবায়াল সম্প্রদায়ের গঠন।(a) অণুজীব বংশের আপেক্ষিক প্রাচুর্য লার্ভাতে পড়ে।(b) চিহ্নিত জীবাণু সম্প্রদায়ের তাপ মানচিত্র।Delftia (অডস রেশিও (OR) = 0.67, P = 0.0030) এবং সিউডোমোনাস (OR = 0.3, P = 0.0074), মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম (OR = 0.75, P = 0.0617) (OR = 1.5, P = 0.0060);তাপ মানচিত্র সারিগুলি পারস্পরিক সম্পর্ক দূরত্ব এবং গড় সংযোগ ব্যবহার করে ক্লাস্টার করা হয়।
আমাদের ফলাফলগুলি দেখায় যে মৌখিক যোগাযোগ (ম্যানকোজেব) এবং পদ্ধতিগত (পাইরোস্ট্রবিন এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিন) ছত্রাকনাশক, ফুল ফোটার সময় ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা, উল্লেখযোগ্যভাবে ওজন বৃদ্ধি এবং ভুট্টার লার্ভা মৃত্যুর হার হ্রাস করেছে।উপরন্তু, ম্যানকোজেব প্রিপুপাল পর্যায়ে মাইক্রোবায়োমের বৈচিত্র্য এবং সমৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে।মাইক্লোবুটানিল, আরেকটি পদ্ধতিগত ছত্রাকনাশক, তিনটি মাত্রায় লার্ভা শরীরের ওজন বৃদ্ধিকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে।এই প্রভাবটি দ্বিতীয় (দিন 5) এবং তৃতীয় (দিন 8) সময় পয়েন্টগুলিতে স্পষ্ট ছিল।বিপরীতে, সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপ্টান নিয়ন্ত্রণ গ্রুপের তুলনায় ওজন বৃদ্ধি বা বেঁচে থাকা উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেনি।আমাদের জানামতে, সরাসরি পরাগ এক্সপোজারের মাধ্যমে ভুট্টা ফসল রক্ষা করতে ব্যবহৃত বিভিন্ন ছত্রাকনাশকের ক্ষেত্রের হারের প্রভাব নির্ধারণের এই কাজটিই প্রথম।
সমস্ত ছত্রাকনাশক চিকিত্সা নিয়ন্ত্রণ চিকিত্সার তুলনায় শরীরের ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে।ম্যানকোজেব লার্ভা শরীরের ওজন বৃদ্ধিতে সর্বাধিক প্রভাব ফেলেছিল যার গড় 51% হ্রাস পায়, এর পরে পাইরিথিওস্ট্রবিন।যাইহোক, অন্যান্য গবেষণায় লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশকের ক্ষেত্রের মাত্রার প্রতিকূল প্রভাবের কথা বলা হয়নি।যদিও ডাইথিওকারবামেট বায়োসাইডে কম তীব্র বিষাক্ততা দেখানো হয়েছে, ম্যানকোজেবের মতো ইথিলিন বিসডিথিওকারবামেটস (EBDCS) ইউরিয়া ইথিলিন সালফাইডে পরিণত হতে পারে।অন্যান্য প্রাণীদের মধ্যে এর মিউটেজেনিক প্রভাবের পরিপ্রেক্ষিতে, এই অবক্ষয় পণ্যটি পর্যবেক্ষণ করা প্রভাবের জন্য দায়ী হতে পারে46,47।পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে ইথিলিন থিওরিয়ার গঠন উন্নীত তাপমাত্রা48, আর্দ্রতার মাত্রা49 এবং পণ্য সঞ্চয়ের দৈর্ঘ্য 50 এর মতো কারণগুলির দ্বারা প্রভাবিত হয়।বায়োসাইডের জন্য সঠিক স্টোরেজ শর্ত এই পার্শ্বপ্রতিক্রিয়াগুলি প্রশমিত করতে পারে।এছাড়াও, ইউরোপিয়ান ফুড সেফটি অথরিটি পাইরিথিওপাইডের বিষাক্ততার বিষয়ে উদ্বেগ প্রকাশ করেছে, যা অন্যান্য প্রাণীর পাচনতন্ত্রের জন্য কার্সিনোজেনিক হিসাবে দেখানো হয়েছে51।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রবিন, এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিনের মৌখিক প্রয়োগ ভুট্টা পোকার লার্ভার মৃত্যুহার বাড়ায়।বিপরীতে, মাইক্লোবুটানিল, সিপ্রোসাইক্লিন এবং ক্যাপ্টান মৃত্যুহারে কোন প্রভাব ফেলেনি।এই ফলাফলগুলি Ladurner et al.52 এর থেকে ভিন্ন, যারা দেখিয়েছেন যে ক্যাপ্টান প্রাপ্তবয়স্ক ও. লিগনারিয়া এবং এপিস মেলিফেরা এল. (হাইমেনোপ্টেরা, এপিসিডে) এর বেঁচে থাকাকে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে।এছাড়াও, ক্যাপ্টান এবং বোসক্যালিডের মতো ছত্রাকনাশক লার্ভা মৃত্যু ঘটাতে দেখা গেছে ৫২,৫৩,৫৪ বা খাওয়ানোর আচরণে পরিবর্তন ঘটায়।এই পরিবর্তনগুলি, ঘুরে, পরাগের পুষ্টির গুণমানকে প্রভাবিত করতে পারে এবং শেষ পর্যন্ত লার্ভা পর্যায়ের শক্তি লাভকে প্রভাবিত করতে পারে।নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীতে পরিলক্ষিত মৃত্যুহার অন্যান্য গবেষণা 56,57 এর সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল।
আমাদের কাজে পরিলক্ষিত পুরুষ-অনুকূল লিঙ্গ অনুপাত ফুল ফোটার সময় অপর্যাপ্ত সঙ্গম এবং খারাপ আবহাওয়ার মতো কারণগুলির দ্বারা ব্যাখ্যা করা যেতে পারে, যেমনটি পূর্বে ভিসেনস এবং বোশ দ্বারা O. cornuta-এর জন্য পরামর্শ দেওয়া হয়েছিল।যদিও আমাদের গবেষণায় মহিলা এবং পুরুষদের সঙ্গম করার জন্য চার দিন সময় ছিল (একটি সময়কাল সাধারণত সফল সঙ্গমের জন্য যথেষ্ট বলে মনে করা হয়), আমরা মানসিক চাপ কমাতে ইচ্ছাকৃতভাবে আলোর তীব্রতা কমিয়েছি।যাইহোক, এই পরিবর্তন অনিচ্ছাকৃতভাবে সঙ্গম প্রক্রিয়ার সাথে হস্তক্ষেপ করতে পারে61।এছাড়াও, মৌমাছিরা বৃষ্টি এবং নিম্ন তাপমাত্রা (<5°C) সহ বেশ কিছু দিনের প্রতিকূল আবহাওয়ার অভিজ্ঞতা লাভ করে, যা সঙ্গমের সাফল্যকেও নেতিবাচকভাবে প্রভাবিত করতে পারে4,23।
যদিও আমাদের গবেষণাটি সম্পূর্ণ লার্ভা মাইক্রোবায়োমের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করে, আমাদের ফলাফলগুলি ব্যাকটেরিয়া সম্প্রদায়ের মধ্যে সম্ভাব্য সম্পর্কের অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে যা মৌমাছির পুষ্টি এবং ছত্রাকনাশক এক্সপোজারের জন্য গুরুত্বপূর্ণ হতে পারে।উদাহরণস্বরূপ, লার্ভা খাওয়ানো ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা পরাগ অণুজীব সম্প্রদায়ের গঠন এবং প্রাচুর্যকে লার্ভা খাওয়ানো অপরিশোধিত পরাগের তুলনায় উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছিল।অচিকিৎসিত পরাগ গ্রাসকারী লার্ভাতে, প্রোটিওব্যাকটেরিয়া এবং অ্যাক্টিনোব্যাকটেরিয়া ব্যাকটেরিয়া গোষ্ঠী প্রভাবশালী ছিল এবং প্রধানত বায়বীয় বা ফ্যাকাল্টিটিভভাবে বায়বীয় ছিল।ডেলফ্ট ব্যাকটেরিয়া, সাধারণত নির্জন মৌমাছি প্রজাতির সাথে যুক্ত, অ্যান্টিবায়োটিক কার্যকলাপ রয়েছে বলে পরিচিত, যা প্যাথোজেনগুলির বিরুদ্ধে একটি সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক ভূমিকা নির্দেশ করে।অপর একটি ব্যাকটেরিয়া প্রজাতি, সিউডোমোনাস, চিকিত্সাবিহীন পরাগ খাওয়ানো লার্ভাতে প্রচুর ছিল, কিন্তু ম্যানকোজেব-চিকিত্সা করা লার্ভাগুলিতে উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে।আমাদের ফলাফলগুলি পূর্ববর্তী গবেষণাগুলিকে সমর্থন করে যা সিউডোমোনাসকে O. bicornis35 এবং অন্যান্য একাকী ওয়েপস34-এর মধ্যে সর্বাধিক প্রাচুর্যের একটি হিসাবে চিহ্নিত করে।যদিও ও. কর্নিফ্রনের স্বাস্থ্যে সিউডোমোনাসের ভূমিকার জন্য পরীক্ষামূলক প্রমাণ অধ্যয়ন করা হয়নি, এই ব্যাকটেরিয়াটি বিটল পেডেরাস ফুসিপিসে প্রতিরক্ষামূলক বিষাক্ত পদার্থের সংশ্লেষণকে উন্নীত করতে এবং ভিট্রো 35, 65-এ আর্জিনাইন বিপাককে উন্নীত করতে দেখানো হয়েছে। এই পর্যবেক্ষণগুলি নির্দেশ করে ও. কর্নিফ্রন লার্ভার বিকাশের সময় ভাইরাল এবং ব্যাকটেরিয়া প্রতিরক্ষায় একটি সম্ভাব্য ভূমিকা।মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম হল আমাদের গবেষণায় চিহ্নিত আরেকটি জেনাস যা ক্ষুধার্ত অবস্থায় কালো সৈনিক মাছি লার্ভাতে উচ্চ সংখ্যায় উপস্থিত বলে জানা গেছে66।ও. কর্নিফ্রন লার্ভাতে, মাইক্রোব্যাকটেরিয়া চাপের পরিস্থিতিতে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োমের ভারসাম্য এবং স্থিতিস্থাপকতায় অবদান রাখতে পারে।উপরন্তু, রোডোকোকাস ও. কর্নিফ্রন লার্ভাতে পাওয়া যায় এবং এটি তার ডিটক্সিফিকেশন ক্ষমতার জন্য পরিচিত।এই জিনাসটি A. ফ্লোরিয়ার অন্ত্রেও পাওয়া যায়, তবে খুব কম প্রাচুর্যে68।আমাদের ফলাফলগুলি অসংখ্য মাইক্রোবিয়াল ট্যাক্সা জুড়ে একাধিক জেনেটিক বৈচিত্রের উপস্থিতি প্রদর্শন করে যা লার্ভাতে বিপাকীয় প্রক্রিয়াগুলিকে পরিবর্তন করতে পারে।যাইহোক, O. cornifrons এর কার্যকরী বৈচিত্র্য সম্পর্কে আরও ভাল বোঝার প্রয়োজন।
সংক্ষেপে, ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রবিন এবং ট্রাইফ্লোক্সিস্ট্রবিন শরীরের ওজন বৃদ্ধি এবং ভুট্টা পোকার লার্ভা মৃত্যুর হার কমিয়েছে।যদিও পরাগায়নকারীদের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব সম্পর্কে ক্রমবর্ধমান উদ্বেগ রয়েছে, তবে এই যৌগগুলির অবশিষ্ট বিপাকের প্রভাবগুলি আরও ভালভাবে বোঝার প্রয়োজন রয়েছে।এই ফলাফলগুলি সমন্বিত পরাগরেণু ব্যবস্থাপনা প্রোগ্রামগুলির জন্য সুপারিশগুলিতে অন্তর্ভুক্ত করা যেতে পারে যা কৃষকদের ছত্রাকনাশক নির্বাচন করে এবং প্রয়োগের সময় পরিবর্তন করে বা কম ক্ষতিকারক বিকল্প ব্যবহারে উৎসাহিত করে ফল গাছে ফুল ফোটার আগে এবং সময়কালে নির্দিষ্ট ছত্রাকনাশক ব্যবহার এড়াতে সহায়তা করে 36. এই তথ্য সুপারিশ উন্নয়নের জন্য গুরুত্বপূর্ণ.কীটনাশক ব্যবহারে, যেমন বিদ্যমান স্প্রে প্রোগ্রামগুলিকে সামঞ্জস্য করা এবং ছত্রাকনাশক নির্বাচন করার সময় বা কম বিপজ্জনক বিকল্পগুলির ব্যবহারকে প্রচার করার সময় স্প্রে করার সময় পরিবর্তন করা।লিঙ্গ অনুপাত, খাওয়ানোর আচরণ, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োম এবং ভুট্টা পোকার ওজন হ্রাস এবং মৃত্যুহারের অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলির উপর ছত্রাকনাশকের বিরূপ প্রভাব সম্পর্কে আরও গবেষণা প্রয়োজন।
চিত্র 1 এবং 2-এর উত্স ডেটা 1, 2 এবং 3 ফিগশেয়ার ডেটা রিপোজিটরি DOI-তে জমা করা হয়েছে: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 এবং https://doi.org/10.6084/m9৷figshare.24996233.বর্তমান গবেষণায় বিশ্লেষণ করা ক্রমগুলি (চিত্র 4, 5) NCBI SRA সংগ্রহস্থলে PRJNA1023565 নম্বরের অধীন উপলব্ধ।
বোশ, জে. এবং কেম্প, ডব্লিউপি কৃষি ফসলের পরাগায়নকারী হিসাবে মধু মৌমাছির প্রজাতির বিকাশ এবং প্রতিষ্ঠা: অসমিয়া গণের উদাহরণ।(Hymenoptera: Megachilidae) এবং ফলের গাছ।ষাঁড়।Ntomore.সম্পদ92, 3-16 (2002)।
পার্কার, এমজি এট আল।নিউইয়র্ক এবং পেনসিলভেনিয়ায় আপেল চাষীদের মধ্যে পরাগায়নের অনুশীলন এবং বিকল্প পরাগায়নকারীদের উপলব্ধি।হালনাগাদ।কৃষি।খাদ্য ব্যবস্থা।35, 1-14 (2020)।
Koch I., Lonsdorf EW, Artz DR, Pitts-Singer TL এবং Rickets TH ইকোলজি এবং দেশীয় মৌমাছি ব্যবহার করে বাদাম পরাগায়নের অর্থনীতি।জে. অর্থনীতি।Ntomore.111, 16-25 (2018)।
Lee, E., He, Y., এবং Park, Y.-L.ট্রাগোপান ফেনোলজিতে জলবায়ু পরিবর্তনের প্রভাব: জনসংখ্যা ব্যবস্থাপনার প্রভাব।আরোহণ150, 305–317 (2018) পরিবর্তন করুন।
আর্টজ, ডিআর এবং পিটস-সিঙ্গার, দুটি পরিচালিত নির্জন মৌমাছির বাসা বাঁধার আচরণের উপর ছত্রাকনাশক এবং সহায়ক স্প্রেগুলির TL প্রভাব (ওসমিয়া লিগনারিয়া এবং মেগাচিল রোটুন্ডটা)।PloS One 10, e0135688 (2015)।
Beauvais, S. et al.একটি কম-বিষাক্ত ফসলের ছত্রাকনাশক (ফেনবুকোনাজল) পুরুষ প্রজনন গুণমানের সংকেতগুলিতে হস্তক্ষেপ করে যার ফলে বন্য নির্জন মৌমাছির মিলনের সাফল্য কমে যায়।জে অ্যাপস।বাস্তুশাস্ত্র59, 1596-1607 (2022)।
Sgolastra F. et al.নিওনিকোটিনয়েড কীটনাশক এবং এরগোস্টেরল জৈব সংশ্লেষণ তিনটি মৌমাছি প্রজাতির সিনারজিস্টিক ছত্রাকনাশক মৃত্যুর হারকে দমন করে।কীটপতঙ্গ নিয়ন্ত্রণ।বিজ্ঞান।73, 1236–1243 (2017)।
কুহনেম্যান জেজি, গিলুং জে, ভ্যান ডাইক এমটি, ফোরডিস আরএফ।এবং ড্যানফোর্থ বিএন সলিটারি ওয়াসপ লার্ভা কান্ডে বাসা বাঁধার মৌমাছি অসমিয়া কর্নিফ্রনস (মেগাচিলিডে) কে পরাগ দ্বারা সরবরাহ করা ব্যাকটেরিয়া বৈচিত্র্যকে পরিবর্তন করে।সামনেঅণুজীব13, 1057626 (2023)।
ধরমপাল পিএস, ড্যানফোর্থ বিএন এবং স্টেফান এসএ গাঁজানো পরাগের মধ্যে থাকা ইক্টোসিমবায়োটিক অণুজীবগুলি নির্জন মৌমাছির বিকাশের জন্য পরাগের মতোই গুরুত্বপূর্ণ।বাস্তুশাস্ত্রবিবর্তন12. e8788 (2022)।
কেল্ডেরার এম, ম্যানিসি এলএম, ক্যাপুটো এফ এবং থ্যালহাইমার এম। রিসিডিং রোগ নিয়ন্ত্রণের জন্য আপেল বাগানে আন্তঃ-সারি রোপণ: জীবাণু সূচকের উপর ভিত্তি করে একটি ব্যবহারিক কার্যকারিতা অধ্যয়ন।উদ্ভিদ মাটি 357, 381–393 (2012)।
মার্টিন পিএল, ক্রাভচিক টি., খোদাদাদি এফ., আচিমোভিচ এসজি এবং পিটার কেএ মিড-আটলান্টিক মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে আপেলের বিটার রট: কার্যকারক প্রজাতির মূল্যায়ন এবং আঞ্চলিক আবহাওয়া পরিস্থিতি এবং চাষের সংবেদনশীলতার প্রভাব।ফাইটোপ্যাথোলজি 111, 966-981 (2021)।
কুলেন এমজি, থম্পসন এলজে, ক্যারোলান জেকে, স্টাউট জেকে।এবং স্ট্যানলি ডিএ ছত্রাকনাশক, হার্বিসাইড এবং মৌমাছি: বিদ্যমান গবেষণা এবং পদ্ধতিগুলির একটি পদ্ধতিগত পর্যালোচনা।PLOS One 14, e0225743 (2019)।
পিলিং, ইডি এবং জেপসন, পিসি সিনারজিস্টিক ইফেক্টস অফ ইবিআই ছত্রাকনাশক এবং মধু মৌমাছির উপর পাইরেথ্রয়েড কীটনাশক (এপিস মেলিফেরা)।বিজ্ঞানের কীটপতঙ্গ।39, 293–297 (1993)।
মুসেন, ইসি, লোপেজ, জেই এবং পেং, সিওয়াই মধু মৌমাছির লার্ভা এপিস মেলিফেরা এল (হাইমেনোপ্টেরা: এপিডে) এর বৃদ্ধি ও বিকাশের উপর নির্বাচিত ছত্রাকনাশকের প্রভাব।বুধবার।Ntomore.33, 1151-1154 (2004)।
ভ্যান ডাইক, এম., মুলেন, ই., উইকস্টেড, ডি., এবং ম্যাকআর্ট, এস. গাছের বাগানে পরাগায়নকারীদের রক্ষা করার জন্য কীটনাশক ব্যবহারের সিদ্ধান্ত নির্দেশিকা (কর্নেল বিশ্ববিদ্যালয়, 2018)।
Iwasaki, JM এবং Hogendoorn, K. অ-কীটনাশক মৌমাছির এক্সপোজার: পদ্ধতির পর্যালোচনা এবং রিপোর্ট করা ফলাফল।কৃষি।বাস্তুতন্ত্রবুধবার।314, 107423 (2021)।
Kopit AM, Klinger E, Cox-Foster DL, Ramirez RA.এবং পিটস-সিঙ্গার টিএল অসমিয়া লিগনারিয়া (হাইমেনোপ্টেরা: মেগাচিলিডে) এর লার্ভা বিকাশের উপর সরবরাহের ধরন এবং কীটনাশক এক্সপোজারের প্রভাব।বুধবার।Ntomore.51, 240-251 (2022)।
Kopit AM এবং Pitts-Singer TL পথ নির্জন খালি-নীড় মৌমাছির কীটনাশক এক্সপোজার।বুধবার।Ntomore.47, 499–510 (2018)।
প্যান, এনটি এবং অন্যান্য।প্রাপ্তবয়স্ক জাপানি বাগানের মৌমাছি (ওসমিয়া কর্নিফ্রন) এর কীটনাশক বিষাক্ততা মূল্যায়নের জন্য একটি নতুন ইনজেশন বায়োসাই প্রোটোকল।বিজ্ঞান।রিপোর্ট 10, 9517 (2020)।