ছত্রাকনাশক প্রয়োগ একাকী মেসন মৌমাছির মোট শক্তি অর্জন এবং অণুজীবগোষ্ঠীর বৈচিত্র্য হ্রাস করে।

Nature.com-এ আসার জন্য আপনাকে ধন্যবাদ। আপনি যে ব্রাউজারটি ব্যবহার করছেন, সেটিতে CSS সাপোর্ট সীমিত। সর্বোত্তম ফলাফলের জন্য, আমরা আপনাকে ব্রাউজারের একটি নতুন সংস্করণ ব্যবহার করার পরামর্শ দিচ্ছি (অথবা ইন্টারনেট এক্সপ্লোরারে কম্প্যাটিবিলিটি মোড নিষ্ক্রিয় করুন)। আপাতত, নিরবচ্ছিন্ন সাপোর্ট নিশ্চিত করার জন্য, আমরা সাইটটি কোনো স্টাইলিং বা জাভাস্ক্রিপ্ট ছাড়াই প্রদর্শন করছি।
ফলের গাছে ফুল ফোটার সময় প্রায়শই ছত্রাকনাশক ব্যবহার করা হয় এবং এটি পতঙ্গ পরাগায়ণকারীদের জন্য হুমকি হতে পারে। তবে, ফুল ফোটার সময় আপেলে সাধারণত ব্যবহৃত সংস্পর্শজনিত এবং সিস্টেমিক ছত্রাকনাশকের প্রতি মৌমাছি ছাড়া অন্য পরাগায়ণকারীরা (যেমন, একাকী মৌমাছি, Osmia cornifrons) কীভাবে সাড়া দেয়, সে সম্পর্কে খুব কমই জানা যায়। এই জ্ঞানের অভাব ছত্রাকনাশক স্প্রে করার নিরাপদ মাত্রা এবং সময় নির্ধারণকারী নিয়ন্ত্রক সিদ্ধান্তকে সীমিত করে। আমরা দুটি সংস্পর্শজনিত ছত্রাকনাশক (ক্যাপটান এবং ম্যানকোজেব) এবং চারটি আন্তঃস্তর/ফাইটোসিস্টেম ছত্রাকনাশকের (সিপ্রোসাইক্লিন, মাইক্লোবুটানিল, পাইরোস্ট্রবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রবিন) প্রভাব মূল্যায়ন করেছি। লার্ভার ওজন বৃদ্ধি, বেঁচে থাকা, লিঙ্গ অনুপাত এবং ব্যাকটেরিয়ার বৈচিত্র্যের উপর এর প্রভাব পরীক্ষা করা হয়। এই মূল্যায়নটি একটি দীর্ঘস্থায়ী মৌখিক বায়োঅ্যাসে ব্যবহার করে পরিচালিত হয়েছিল, যেখানে পরাগরেণুকে তিনটি মাত্রায় প্রয়োগ করা হয়েছিল: মাঠে ব্যবহারের জন্য বর্তমানে সুপারিশকৃত মাত্রা (১X), অর্ধেক মাত্রা (০.৫X) এবং কম মাত্রা (০.১X)। ম্যানকোজেব এবং পাইরিটিসোলিনের সমস্ত মাত্রাই দেহের ওজন এবং লার্ভার বেঁচে থাকার হার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। এরপর আমরা সর্বোচ্চ মৃত্যুহারের জন্য দায়ী ছত্রাকনাশক ম্যানকোজেবের লার্ভার ব্যাকটেরিওমের বৈশিষ্ট্য নিরূপণ করার জন্য ১৬এস জিনের সিকোয়েন্সিং করি। আমরা দেখতে পাই যে, ম্যানকোজেব-প্রক্রিয়াজাত পরাগরেণু খেয়ে বড় হওয়া লার্ভার মধ্যে ব্যাকটেরিয়ার বৈচিত্র্য ও প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে। আমাদের গবেষণাগারের ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে, ফুল ফোটার সময় এই ছত্রাকনাশকগুলোর কয়েকটি স্প্রে করা ও. কর্নিফ্রন্স-এর স্বাস্থ্যের জন্য বিশেষভাবে ক্ষতিকর। এই তথ্যটি ফলগাছ সুরক্ষা পণ্যের টেকসই ব্যবহার সংক্রান্ত ভবিষ্যৎ ব্যবস্থাপনাগত সিদ্ধান্তের জন্য প্রাসঙ্গিক এবং পরাগায়নকারীদের সুরক্ষার লক্ষ্যে নিয়ন্ত্রক প্রক্রিয়ার ভিত্তি হিসেবে কাজ করে।
একাকী মেসন মৌমাছি (Osmia cornifrons, Hymenoptera: Megachilidae) ১৯৭০-এর দশকের শেষের দিকে এবং ১৯৮০-এর দশকের শুরুতে জাপান থেকে মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে আনা হয়েছিল এবং তখন থেকেই এই প্রজাতিটি নিয়ন্ত্রিত বাস্তুতন্ত্রে একটি গুরুত্বপূর্ণ পরাগায়ণকারী ভূমিকা পালন করে আসছে। এই মৌমাছির প্রাকৃতিক জনসংখ্যা প্রায় ৫০ প্রজাতির বন্য মৌমাছির একটি অংশ, যা মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বাদাম এবং আপেল বাগানে পরাগায়ণকারী মৌমাছিদের পরিপূরক হিসেবে কাজ করে²,³। মেসন মৌমাছিরা বাসস্থানের খণ্ডীকরণ, রোগজীবাণু এবং কীটনাশকসহ অনেক চ্যালেঞ্জের সম্মুখীন হয়³,⁴। কীটনাশকগুলোর মধ্যে ছত্রাকনাশক শক্তি অর্জন, খাদ্য সংগ্রহ⁵ এবং শারীরিক অবস্থা⁶,⁷ হ্রাস করে। যদিও সাম্প্রতিক গবেষণা থেকে জানা যায় যে মেসন মৌমাছির স্বাস্থ্য সহজীবী এবং বহিঃস্থ অণুজীব দ্বারা সরাসরি প্রভাবিত হয়,⁸,⁹ যেহেতু ব্যাকটেরিয়া এবং ছত্রাক পুষ্টি এবং রোগ প্রতিরোধ ক্ষমতাকে প্রভাবিত করতে পারে, তাই মেসন মৌমাছির অণুজীব বৈচিত্র্যের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব নিয়ে গবেষণা সবেমাত্র শুরু হয়েছে।
আপেল স্ক্যাব, বিটার রট, ব্রাউন রট এবং পাউডারি মিলডিউ-এর মতো রোগ নিরাময়ের জন্য ফুল ফোটার আগে এবং ফুল ফোটার সময় ফলের বাগানে বিভিন্ন ধরনের (স্পর্শজনিত এবং সিস্টেমিক) ছত্রাকনাশক স্প্রে করা হয়¹⁰,¹¹। ছত্রাকনাশক পরাগায়ণকারী প্রাণীদের জন্য ক্ষতিকর নয় বলে মনে করা হয়, তাই ফুল ফোটার সময় মালীরা এটি ব্যবহারের পরামর্শ দেন; মৌমাছিদের দ্বারা এই ছত্রাকনাশকগুলির সংস্পর্শ এবং ভক্ষণ তুলনামূলকভাবে সুপরিচিত, কারণ এটি মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের পরিবেশ সুরক্ষা সংস্থা এবং অন্যান্য অনেক জাতীয় নিয়ন্ত্রক সংস্থার কীটনাশক নিবন্ধন প্রক্রিয়ার একটি অংশ¹²,¹³,¹⁴। তবে, মৌমাছি ছাড়া অন্য প্রাণীদের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব সম্পর্কে তেমন জানা যায় না, কারণ মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বিপণন অনুমোদন চুক্তির অধীনে এগুলি বাধ্যতামূলক নয়¹⁵। এছাড়াও, একক মৌমাছি পরীক্ষার জন্য সাধারণত কোনো প্রমিত প্রোটোকল নেই¹⁶,¹⁷, এবং পরীক্ষার জন্য মৌমাছি সরবরাহকারী কলোনি বজায় রাখা একটি চ্যালেঞ্জিং কাজ¹⁸। ইউরোপ এবং মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে বন্য মৌমাছির উপর কীটনাশকের প্রভাব অধ্যয়নের জন্য বিভিন্ন পালিত মৌমাছির উপর পরীক্ষা ক্রমবর্ধমানভাবে পরিচালিত হচ্ছে, এবং সম্প্রতি O. cornifrons-এর জন্য প্রমিত প্রোটোকল তৈরি করা হয়েছে¹⁹।
শিংওয়ালা মৌমাছিরা মনোসাইট এবং বাণিজ্যিকভাবে কার্প ফসলে মধু মৌমাছির পরিপূরক বা বিকল্প হিসেবে ব্যবহৃত হয়। এই মৌমাছিরা মার্চ থেকে এপ্রিল মাসের মধ্যে আবির্ভূত হয়, যেখানে দ্রুত পরিপক্ক হওয়া পুরুষ মৌমাছিরা স্ত্রী মৌমাছিদের তিন থেকে চার দিন আগে বের হয়। সঙ্গমের পর, স্ত্রী মৌমাছি সক্রিয়ভাবে পরাগরেণু এবং মধু সংগ্রহ করে তার নলাকার বাসার গহ্বরে (প্রাকৃতিক বা কৃত্রিম) একের পর এক প্রজনন কোষ তৈরি করে। কোষের ভিতরে পরাগরেণুর উপর ডিম পাড়া হয়; এরপর স্ত্রী মৌমাছি পরবর্তী কোষ প্রস্তুত করার আগে একটি কাদামাটির প্রাচীর তৈরি করে। প্রথম ইনস্টারের লার্ভা কোরিয়নের মধ্যে আবদ্ধ থাকে এবং ভ্রূণীয় রস খেয়ে জীবনধারণ করে। দ্বিতীয় থেকে পঞ্চম ইনস্টার (প্রিপিউপা) পর্যন্ত, লার্ভা পরাগরেণু খায়। পরাগরেণুর সরবরাহ সম্পূর্ণরূপে শেষ হয়ে গেলে, লার্ভা কোকুন তৈরি করে, পিউপায় পরিণত হয় এবং সাধারণত গ্রীষ্মের শেষের দিকে একই প্রজনন প্রকোষ্ঠে পূর্ণাঙ্গ মৌমাছি হিসেবে বেরিয়ে আসে। পরের বসন্তে পূর্ণাঙ্গ মৌমাছিরা বেরিয়ে আসে। পূর্ণাঙ্গ মৌমাছির বেঁচে থাকা খাদ্য গ্রহণের উপর ভিত্তি করে মোট শক্তি বৃদ্ধি (ওজন বৃদ্ধি)-এর সাথে সম্পর্কিত। সুতরাং, পরাগরেণুর পুষ্টিগুণ, সেইসাথে আবহাওয়া বা কীটনাশকের সংস্পর্শের মতো অন্যান্য কারণগুলো বেঁচে থাকা এবং স্বাস্থ্যের নির্ধারক।
ফুল ফোটার আগে প্রয়োগ করা কীটনাশক এবং ছত্রাকনাশক উদ্ভিদের সংবহন নালীর মধ্যে বিভিন্ন মাত্রায় চলাচল করতে পারে, যা ট্রান্সল্যামিনার (যেমন, কিছু ছত্রাকনাশকের মতো পাতার উপরের পৃষ্ঠ থেকে নিচের পৃষ্ঠে যেতে সক্ষম) ২৫ থেকে শুরু করে সত্যিকারের সিস্টেমিক প্রভাব পর্যন্ত হতে পারে। যা শিকড় থেকে গাছের গোড়ায় প্রবেশ করতে পারে, তা আপেল ফুলের মধুতে প্রবেশ করতে পারে২৬, যেখানে তারা পূর্ণবয়স্ক ও. কর্নিফ্রনসকে মেরে ফেলতে পারে২৭। কিছু কীটনাশক পরাগরেণুর সাথেও মিশে যায়, যা ভুট্টার লার্ভার বিকাশকে প্রভাবিত করে এবং তাদের মৃত্যুর কারণ হয়১৯। অন্যান্য গবেষণায় দেখা গেছে যে কিছু ছত্রাকনাশক সম্পর্কিত প্রজাতি ও. লিগনারিয়ার বাসা তৈরির আচরণকে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তন করতে পারে২৮। এছাড়াও, কীটনাশকের (ছত্রাকনাশক সহ) সংস্পর্শের পরিস্থিতি অনুকরণ করে পরীক্ষাগার এবং মাঠ পর্যায়ের গবেষণায় দেখা গেছে যে কীটনাশক মৌমাছি এবং কিছু একাকী মৌমাছির শারীরবৃত্ত ২২, অঙ্গসংস্থান ২৯ এবং বেঁচে থাকার উপর নেতিবাচক প্রভাব ফেলে। ফুল ফোটার সময় সরাসরি ফোটা ফুলে প্রয়োগ করা বিভিন্ন ছত্রাকনাশক স্প্রে, লার্ভার বিকাশের জন্য পূর্ণাঙ্গ পতঙ্গ দ্বারা সংগৃহীত পরাগরেণুকে দূষিত করতে পারে, যার প্রভাব এখনও অধ্যয়ন করা বাকি আছে৩০।
এটি ক্রমবর্ধমানভাবে স্বীকৃত হচ্ছে যে লার্ভার বিকাশ পরাগরেণু এবং পরিপাকতন্ত্রের অণুজীব সম্প্রদায় দ্বারা প্রভাবিত হয়। মৌমাছির মাইক্রোবায়োম দেহের ভর³¹, বিপাকীয় পরিবর্তন²² এবং রোগজীবাণুর প্রতি সংবেদনশীলতা³²-এর মতো পরামিতিগুলিকে প্রভাবিত করে। পূর্ববর্তী গবেষণায় একাকী মৌমাছির মাইক্রোবায়োমের উপর বিকাশের পর্যায়, পুষ্টি এবং পরিবেশের প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে। এই গবেষণাগুলি একাকী মৌমাছির প্রজাতিগুলির মধ্যে লার্ভা এবং পরাগরেণু মাইক্রোবায়োমের³³ গঠন ও প্রাচুর্যের পাশাপাশি সবচেয়ে সাধারণ ব্যাকটেরিয়ার গণ Pseudomonas এবং Delftia-এর মধ্যে সাদৃশ্য প্রকাশ করেছে। যাইহোক, যদিও ছত্রাকনাশক মৌমাছির স্বাস্থ্য রক্ষার কৌশলের সাথে যুক্ত, সরাসরি মৌখিক সংস্পর্শের মাধ্যমে লার্ভার মাইক্রোবায়োটার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব অনাবিষ্কৃত রয়ে গেছে।
এই গবেষণায় মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রে ফলের গাছে ব্যবহারের জন্য নিবন্ধিত, বহুল ব্যবহৃত ছয়টি ছত্রাকনাশকের বাস্তব মাত্রার প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে। এর মধ্যে ছিল সংস্পর্শজনিত এবং সিস্টেমিক ছত্রাকনাশক, যা দূষিত খাদ্য থেকে প্রাপ্ত কর্ন হর্নওয়ার্ম মথের লার্ভাকে মুখে খাওয়ানো হয়েছিল। আমরা দেখতে পেয়েছি যে সংস্পর্শজনিত এবং সিস্টেমিক ছত্রাকনাশক মৌমাছির দৈহিক ওজন বৃদ্ধি কমিয়ে দেয় এবং মৃত্যুহার বাড়িয়ে দেয়, যার মধ্যে ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওপাইডের প্রভাব ছিল সবচেয়ে মারাত্মক। এরপর আমরা ম্যানকোজেব-মিশ্রিত পরাগরেণুযুক্ত খাদ্যে পালিত লার্ভার অণুজীব বৈচিত্র্যের সাথে নিয়ন্ত্রিত খাদ্যে পালিত লার্ভার অণুজীব বৈচিত্র্যের তুলনা করেছি। আমরা মৃত্যুহারের অন্তর্নিহিত সম্ভাব্য প্রক্রিয়া এবং সমন্বিত বালাই ও পরাগায়ণকারী ব্যবস্থাপনা (IPPM)36 কর্মসূচির জন্য এর প্রভাব নিয়ে আলোচনা করেছি।
কোকুনে শীতকাল কাটানো পূর্ণবয়স্ক O. cornifrons মৌমাছিদের বিগলারভিল, পেনসিলভেনিয়ার ফ্রুট রিসার্চ সেন্টার থেকে সংগ্রহ করা হয়েছিল এবং −৩ থেকে ২°C (±০.৩°C) তাপমাত্রায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। পরীক্ষা শুরুর আগে (মোট ৬০০টি কোকুন)। ২০২২ সালের মে মাসে, প্রতিদিন ১০০টি O. cornifrons কোকুন প্লাস্টিকের কাপে স্থানান্তর করা হয়েছিল (প্রতি কাপে ৫০টি কোকুন, DI ৫ সেমি × ১৫ সেমি লম্বা) এবং কোকুন খোলা ত্বরান্বিত করতে ও চিবানোর উপযোগী একটি স্তর সরবরাহ করার জন্য কাপের ভিতরে ওয়াইপস রাখা হয়েছিল, যা পাথুরে মৌমাছিদের উপর চাপ কমায়। কোকুনসহ দুটি প্লাস্টিকের কাপ একটি পোকামাকড়ের খাঁচায় (৩০ × ৩০ × ৩০ সেমি, BugDorm MegaView Science Co. Ltd., Taiwan) রাখা হয়েছিল, যেখানে ৫০% সুক্রোজ দ্রবণযুক্ত ১০ মিলি ফিডার ছিল এবং কোকুন বন্ধ হওয়া ও প্রজনন নিশ্চিত করার জন্য চার দিন সংরক্ষণ করা হয়েছিল। ২৩°সে, আপেক্ষিক আর্দ্রতা ৬০%, আলোককাল ১০ ঘণ্টা (স্বল্প তীব্রতা): ১৪ দিন। আপেল গাছের ফুল ফোটার ভরা মৌসুমে, ছয় দিন ধরে প্রতিদিন সকালে ১০০টি করে সঙ্গম করা স্ত্রী ও পুরুষ পতঙ্গকে দুটি কৃত্রিম বাসায় ছাড়া হয়েছিল (ফাঁদ বাসা: প্রস্থ ৩৩.৬৬ × উচ্চতা ৩০.৪৮ × দৈর্ঘ্য ৪৬.৯৯ সেমি; পরিশিষ্ট চিত্র ১)। পেনসিলভেনিয়া স্টেট আর্বোরেটামে, চেরি (প্রুনাস সেরাসাস 'ইউব্যাঙ্ক' সুইট চেরি পাই™), পীচ (প্রুনাস পার্সিকা 'কন্টেন্ডার'), প্রুনাস পার্সিকা 'পিএফ ২৭এ' ফ্লেমিন ফিউরি®), নাশপাতি (পাইরাস পেরিফোলিয়া 'অলিম্পিক', পাইরাস পেরিফোলিয়া 'শিনকো', পাইরাস পেরিফোলিয়া 'শিনসেইকি'), করোনারিয়া আপেল গাছ (ম্যালাস করোনারিয়া) এবং বিভিন্ন জাতের আপেল গাছ (ম্যালাস করোনারিয়া, ম্যালাস), দেশি আপেল গাছ 'কো-অপ ৩০′ এন্টারপ্রাইজ™', ম্যালাস আপেল গাছ 'কো-অপ ৩১′ ওয়াইনক্রিস্প™', বেগোনিয়া 'ফ্রিডম', বেগোনিয়া 'গোল্ডেন ডেলিশিয়াস', বেগোনিয়া 'নোভা স্পাই')-এর কাছে রাখা আছে। প্রতিটি নীল প্লাস্টিকের পাখির বাসা দুটি কাঠের বাক্সের উপরে ঠিকভাবে বসে যায়। প্রতিটি বাসা বাক্সে ৮০০টি খালি ক্রাফট পেপারের টিউব (সর্পিলভাবে খোলা, ০.৮ সেমি অভ্যন্তরীণ ব্যাস × ১৫ সেমি দৈর্ঘ্য) (জোনসভিল পেপার টিউব কোং, মিশিগান) ছিল, যা অস্বচ্ছ সেলোফেন টিউবের (০.৭ সেমি বাহ্যিক ব্যাস) মধ্যে ঢোকানো ছিল। প্লাস্টিকের প্লাগ (টি-১এক্স প্লাগ) বাসা বাঁধার স্থান প্রদান করে।
উভয় নেস্ট বক্সই পূর্বমুখী ছিল এবং ইঁদুর ও পাখির প্রবেশ আটকাতে সেগুলোকে সবুজ প্লাস্টিকের বাগানের বেড়া (এভারবিল্ট মডেল #৮৮৯২৫০EB১২, খোলার আকার ৫ × ৫ সেমি, ০.৯৫ মি × ১০০ মি) দিয়ে ঢাকা হয়েছিল এবং নেস্ট বক্সের পাশের মাটির উপর রাখা হয়েছিল। নেস্ট বক্স (পরিপূরক চিত্র ১ক)। প্রতিদিন বাসা থেকে ৩০টি টিউব সংগ্রহ করে পরীক্ষাগারে নিয়ে এসে কর্ন বোরারের ডিম সংগ্রহ করা হতো। কাঁচি ব্যবহার করে টিউবের শেষে একটি কাট দিন, তারপর ব্রুড সেলগুলো উন্মুক্ত করার জন্য সর্পিল টিউবটি খুলে ফেলুন। একটি বাঁকানো স্প্যাচুলা (মাইক্রোস্লাইড টুল কিট, বায়োকুইপ প্রোডাক্টস ইনক., ক্যালিফোর্নিয়া) ব্যবহার করে প্রতিটি ডিম এবং তাদের পরাগরেণু আলাদা করা হয়েছিল। আমাদের পরীক্ষায় ব্যবহারের আগে ডিমগুলোকে ভেজা ফিল্টার পেপারে রেখে একটি পেট্রি ডিশে ২ ঘন্টা ইনকিউবেট করা হয়েছিল (পরিপূরক চিত্র ১খ-ঘ)।
গবেষণাগারে, আমরা আপেল ফুল ফোটার আগে এবং ফুল ফোটার সময় তিনটি ঘনত্বে (০.১X, ০.৫X, এবং ১X, যেখানে ১X হলো প্রতি একর জমিতে ১০০ গ্যালন জলে প্রয়োগ করা মাত্রা। উচ্চ মাঠ মাত্রা = মাঠে ব্যবহৃত ঘনত্ব) ছয়টি ছত্রাকনাশকের মৌখিক বিষাক্ততা মূল্যায়ন করেছি (সারণি ১)। প্রতিটি ঘনত্ব ১৬ বার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল (n = ১৬)। দুটি সংস্পর্শ ছত্রাকনাশক (সারণি S1: ম্যানকোজেব ২৬৯৬.১৪ পিপিএম এবং ক্যাপটান ২৮৭৫.৮৮ পিপিএম) এবং চারটি সিস্টেমিক ছত্রাকনাশকের (সারণি S1: পাইরিথিওস্ট্রোবিন ২৫০.১৪ পিপিএম; ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন ১১০.০৬ পিপিএম; মাইক্লোবুটানিল অ্যাজোল ৭৫.১২ পিপিএম; সাইপ্রোডিনিল ২৮০.৮৪৫ পিপিএম) ফল, সবজি এবং শোভাবর্ধক ফসলের উপর বিষাক্ততা পরীক্ষা করা হয়েছিল। আমরা একটি গ্রাইন্ডার ব্যবহার করে পরাগরেণুগুলোকে পিষে সমজাতীয় করে নিই, ০.২০ গ্রাম একটি ওয়েলে (২৪-ওয়েল ফ্যালকন প্লেট) স্থানান্তর করি এবং ১ মাইক্রোলিটার ছত্রাকনাশক দ্রবণ যোগ করে মিশিয়ে ১ মিমি গভীর ওয়েলসহ পিরামিড আকৃতির পরাগরেণু তৈরি করি, যেগুলোতে ডিম রাখা হয়েছিল। একটি মিনি স্প্যাচুলা ব্যবহার করে ওয়েলগুলো স্থাপন করা হয় (পরিপূরক চিত্র ১সি,ডি)। ফ্যালকন প্লেটগুলো কক্ষ তাপমাত্রায় (২৫°সে.) এবং ৭০% আপেক্ষিক আর্দ্রতায় সংরক্ষণ করা হয়েছিল। আমরা বিশুদ্ধ জল দিয়ে শোধিত সমজাতীয় পরাগরেণু খাদ্য খাওয়ানো নিয়ন্ত্রিত লার্ভার সাথে এদের তুলনা করি। লার্ভাগুলো পিউপাপূর্ব বয়সে না পৌঁছানো পর্যন্ত আমরা মৃত্যুহার লিপিবদ্ধ করি এবং একটি অ্যানালিটিক্যাল ব্যালেন্স (ফিশার সায়েন্টিফিক, নির্ভুলতা = ০.০০০১ গ্রাম) ব্যবহার করে একদিন পরপর লার্ভার ওজন পরিমাপ করি। অবশেষে, ২.৫ মাস পর কোকুন খুলে লিঙ্গ অনুপাত নির্ণয় করা হয়।
সম্পূর্ণ O. cornifrons লার্ভা থেকে ডিএনএ নিষ্কাশন করা হয়েছিল (প্রতিটি ট্রিটমেন্ট কন্ডিশনের জন্য n = 3, ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত এবং অ-চিকিৎসিত পরাগরেণু) এবং আমরা এই নমুনাগুলির উপর অণুজীব বৈচিত্র্য বিশ্লেষণ করেছি, বিশেষ করে কারণ ম্যানকোজেবের ক্ষেত্রে MnZn গ্রহণকারী লার্ভার মধ্যে সর্বোচ্চ মৃত্যুহার পরিলক্ষিত হয়েছিল। DNAZymoBIOMICS®-96 MagBead DNA kit (Zymo Research, Irvine, CA) ব্যবহার করে ডিএনএ বিবর্ধন ও বিশুদ্ধ করা হয়েছিল এবং v3 কিট ব্যবহার করে একটি Illumina® MiSeq™-এ এর ক্রম নির্ণয় (৬০০ চক্র) করা হয়েছিল। 16S rRNA জিনের V3-V4 অঞ্চলকে লক্ষ্য করে প্রাইমার ব্যবহার করে Quick-16S™ NGS Library Prep Kit (Zymo Research, Irvine, CA) দ্বারা ব্যাকটেরিয়ার 16S রাইবোসোমাল আরএনএ জিনের টার্গেটেড সিকোয়েন্সিং করা হয়েছিল। এছাড়াও, ১০% PhiX ইনক্লুশন ব্যবহার করে 18S সিকোয়েন্সিং করা হয়েছিল এবং 18S001 ও NS4 প্রাইমার জোড়া ব্যবহার করে বিবর্ধন করা হয়েছিল।
QIIME2 পাইপলাইন (v2022.11.1) ব্যবহার করে পেয়ার্ড রিড৩৯ ইম্পোর্ট এবং প্রসেস করা হয়েছে। এই রিডগুলোকে ট্রিম ও মার্জ করা হয়েছে এবং QIIME2-এর DADA2 প্লাগইন (qiime dada2 noise pairing)৪০ ব্যবহার করে কাইমেরিক সিকোয়েন্সগুলো অপসারণ করা হয়েছে। অবজেক্ট ক্লাসিফায়ার প্লাগইন Classify-sklearn এবং প্রি-ট্রেইনড আর্টিফ্যাক্ট silva-138-99-nb-classifier ব্যবহার করে ১৬এস এবং ১৮এস ক্লাস অ্যাসাইনমেন্ট সম্পন্ন করা হয়েছে।
সমস্ত পরীক্ষামূলক ডেটা স্বাভাবিকতা (শাপিরো-উইল্কস) এবং ভেদাঙ্কের সমরূপতা (লেভেনের পরীক্ষা) যাচাই করা হয়েছিল। যেহেতু ডেটা সেটটি প্যারামেট্রিক বিশ্লেষণের পূর্বশর্তগুলো পূরণ করেনি এবং রূপান্তরটি অবশিষ্টাংশগুলোকে মানসম্মত করতে ব্যর্থ হয়েছিল, তাই লার্ভার তাজা ওজনের উপর ট্রিটমেন্টের প্রভাব মূল্যায়ন করার জন্য আমরা দুটি ফ্যাক্টর [সময় (তিন-পর্যায়ের ২, ৫, এবং ৮ দিনের সময়কাল) এবং ছত্রাকনাশক] সহ একটি নন-প্যারামেট্রিক দ্বি-মুখী অ্যানোভা (ক্রুসকাল-ওয়ালিস) সম্পাদন করেছি, এবং তারপর উইলকক্সন পরীক্ষা ব্যবহার করে পোস্ট হক নন-প্যারামেট্রিক জোড়াভিত্তিক তুলনা করা হয়েছে। তিনটি ছত্রাকনাশক ঘনত্বের মধ্যে বেঁচে থাকার উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব তুলনা করার জন্য আমরা পয়সন বিন্যাস সহ একটি জেনারেলাইজড লিনিয়ার মডেল (জিএলএম) ব্যবহার করেছি⁴¹,⁴²। ডিফারেনশিয়াল অ্যাবানডেন্স বিশ্লেষণের জন্য, অ্যামপলিকন সিকোয়েন্স ভ্যারিয়েন্ট (এএসভি)-এর সংখ্যাকে গণ পর্যায়ে সংকুচিত করা হয়েছিল। মাইক্রোবায়োম R43 (v1.1)-এর একটি ম্যাক্রোতে মডেল করা বিটা জিরো-ইনফ্লেটেড (BEZI) ফ্যামিলি ডিস্ট্রিবিউশন সহ পজিশন, স্কেল এবং শেপের জন্য একটি জেনারেলাইজড অ্যাডিটিভ মডেল (GAMLSS) ব্যবহার করে 16S (জেনাস লেভেল) এবং 18S আপেক্ষিক প্রাচুর্যের মাধ্যমে গ্রুপগুলির মধ্যে ডিফারেনশিয়াল প্রাচুর্যের তুলনা করা হয়েছিল। ১) ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের আগে মাইটোকন্ড্রিয়াল এবং ক্লোরোপ্লাস্ট প্রজাতিগুলি অপসারণ করুন। 18S-এর বিভিন্ন ট্যাক্সোনমিক স্তরের কারণে, ডিফারেনশিয়াল বিশ্লেষণের জন্য প্রতিটি ট্যাক্সনের শুধুমাত্র সর্বনিম্ন স্তরটি ব্যবহার করা হয়েছিল। সমস্ত পরিসংখ্যানগত বিশ্লেষণ R (v. 3.4.3., CRAN প্রজেক্ট) (টিম ২০১৩) ব্যবহার করে করা হয়েছিল।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের সংস্পর্শে O. cornifrons-এর দৈহিক ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পায় (চিত্র ১)। পরীক্ষিত তিনটি মাত্রার ক্ষেত্রেই এই প্রভাবগুলো ধারাবাহিকভাবে পরিলক্ষিত হয়েছে (চিত্র ১ক–গ)। সাইক্লোস্ট্রোবিন এবং মাইক্লোবুটানিল লার্ভার ওজন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেনি।
চারটি খাদ্যতালিকাগত প্রয়োগের (সমজাতীয় পরাগরেণু খাদ্য + ছত্রাকনাশক: কন্ট্রোল, ০.১X, ০.৫X এবং ১X মাত্রা) অধীনে তিনটি সময়ে পরিমাপ করা কাণ্ড ছিদ্রকারী পোকার লার্ভার গড় তাজা ওজন। (ক) কম মাত্রা (০.১X): প্রথম সময় বিন্দু (দিন ১): χ²: ৩০.৯৯, DF = ৬; P < ০.০০০১, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (দিন ৫): ২২.৮৩, DF = ০.০০৯; তৃতীয় সময় বিন্দু (দিন ৮): χ²: ২৮.৩৯, DF = ৬; (খ) অর্ধেক মাত্রা (০.৫X): প্রথম সময় বিন্দু (দিন ১): χ²: ৩৫.৬৭, DF = ৬; P < ০.০০০১, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (দিন ১): χ²: ১৫.৯৮, DF = ৬; P = ০.০০৯০; তৃতীয় সময় বিন্দু (৮ম দিন) χ2: ১৬.৪৭, DF = ৬; (গ) স্থান বা পূর্ণ মাত্রা (১X): প্রথম সময় বিন্দু (১ম দিন) χ2: ২০.৬৪, P = ৬; P = ০.০৩২৬, দ্বিতীয় সময় বিন্দু (৫ম দিন): χ2: ২২.৮৩, DF = ৬; P = ০.০০৯; তৃতীয় সময় বিন্দু (৮ম দিন): χ2: ২৮.৩৯, DF = ৬; ননপ্যারামেট্রিক ভ্যারিয়েন্স বিশ্লেষণ। বারগুলো জোড়ায় জোড়ায় তুলনার গড় ± SE নির্দেশ করে (α = ০.০৫) (n = ১৬) *P ≤ ০.০৫, **P ≤ ০.০০১, ***P ≤ ০.০০০১।
সর্বনিম্ন মাত্রায় (০.১X), ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের ক্ষেত্রে লার্ভার দেহের ওজন ৬০%, ম্যানকোজেবের ক্ষেত্রে ৪৯%, মাইক্লোবিউটানিলের ক্ষেত্রে ৪৮% এবং পাইরিথিওস্ট্রোবিনের ক্ষেত্রে ৪৬% হ্রাস পেয়েছিল (চিত্র ১ক)। যখন অর্ধেক ফিল্ড ডোজ (০.৫X) প্রয়োগ করা হয়, তখন ম্যানকোজেব লার্ভার দেহের ওজন ৮৬%, পাইরিথিওস্ট্রোবিনের ক্ষেত্রে ৫২% এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের ক্ষেত্রে ৫০% হ্রাস পায় (চিত্র ১খ)। ম্যানকোজেবের পূর্ণ ফিল্ড ডোজ (১X) প্রয়োগে লার্ভার ওজন ৮২%, পাইরিথিওস্ট্রোবিনের ক্ষেত্রে ৭০% এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন, মাইক্লোবিউটানিল ও স্যাঙ্গার্ডের ক্ষেত্রে প্রায় ৩০% হ্রাস পায় (চিত্র ১গ)।
ম্যানকোজেব-প্রক্রিয়াজাত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভাগুলোর মধ্যে মৃত্যুহার ছিল সর্বোচ্চ, এরপরেই ছিল পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন। ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওস্ট্রোবিনের মাত্রা বৃদ্ধির সাথে সাথে মৃত্যুহারও বৃদ্ধি পেয়েছে (চিত্র ২; সারণি ২)। তবে, ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিনের ঘনত্ব বাড়ার সাথে সাথে ভুট্টার মাজরা পোকার মৃত্যুহার সামান্যই বৃদ্ধি পেয়েছে; সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপটান নিয়ন্ত্রিত পদ্ধতির তুলনায় মৃত্যুহার উল্লেখযোগ্যভাবে বৃদ্ধি করেনি।
ছয়টি ভিন্ন ছত্রাকনাশক দিয়ে পৃথকভাবে শোধন করা পরাগরেণু ভক্ষণের পর বোরার ফ্লাইয়ের লার্ভার মৃত্যুহার তুলনা করা হয়েছিল। ভুট্টার ম্যাগটের মৌখিক সংস্পর্শে ম্যানকোজেব এবং পেন্টোপাইরামাইড বেশি সংবেদনশীল ছিল (জিএলএম: χ = ২৯.৪৫, ডিএফ = ২০, পি = ০.০০৫৯) (লাইন, স্লোপ = ০.২৯, পি < ০.০০১; স্লোপ = ০.২৪, পি < ০.০০)।
গড়ে, সমস্ত চিকিৎসা পদ্ধতি জুড়ে, ৩৯.০৫% রোগী ছিলেন মহিলা এবং ৬০.৯৫% ছিলেন পুরুষ। নিয়ন্ত্রণ চিকিৎসা পদ্ধতিগুলোর মধ্যে, কম-ডোজ (০.১X) এবং অর্ধ-ডোজ (০.৫X) উভয় গবেষণায় মহিলাদের অনুপাত ছিল ৪০%, এবং ফিল্ড-ডোজ (১X) গবেষণায় ছিল ৩০%। ০.১X ডোজে, ম্যানকোজেব এবং মাইক্লোবুটানিল দিয়ে চিকিৎসা করা পরাগ-খাওয়া লার্ভাদের মধ্যে, ৩৩.৩৩% পূর্ণাঙ্গ ছিল মহিলা, ২২% পূর্ণাঙ্গ ছিল মহিলা, ৪৪% পূর্ণাঙ্গ লার্ভা ছিল মহিলা, ৪১% পূর্ণাঙ্গ লার্ভা ছিল মহিলা, এবং নিয়ন্ত্রণ পদ্ধতিতে এই হার ছিল ৩১% (চিত্র ৩ক)। ০.৫ গুণ ডোজে, ম্যানকোজেব এবং পাইরিথিওস্ট্রোবিন গ্রুপে ৩৩% প্রাপ্তবয়স্ক কৃমি ছিল স্ত্রী, ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন গ্রুপে ৩৬%, মাইক্লোবুটানিল গ্রুপে ৪১% এবং সাইপ্রোস্ট্রোবিন গ্রুপে ৪৬%। ক্যাপটান গ্রুপে এই সংখ্যাটি ছিল ৫৩% এবং কন্ট্রোল গ্রুপে ৩৮% (চিত্র ৩খ)। ১ গুণ ডোজে, ম্যানকোজেব গ্রুপে ৩০%, পাইরিথিওস্ট্রোবিন গ্রুপে ৩৬%, ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন গ্রুপে ৪৪%, মাইক্লোবুটানিল গ্রুপে ৩৮% এবং কন্ট্রোল গ্রুপে ৩৮.৫% স্ত্রী ছিল (চিত্র ৩গ)।
লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশকের সংস্পর্শে আসার পর স্ত্রী ও পুরুষ মাজরা পোকার শতকরা হার। (ক) স্বল্প মাত্রা (০.১X)। (খ) অর্ধেক মাত্রা (০.৫X)। (গ) মাঠের মাত্রা বা পূর্ণ মাত্রা (১X)।
১৬এস সিকোয়েন্স বিশ্লেষণ থেকে দেখা যায় যে, ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত পরাগরেণু এবং অ-চিকিৎসিত পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত লার্ভার মধ্যে ব্যাকটেরিয়ার গোষ্ঠী ভিন্ন ছিল (চিত্র ৪ক)। পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত অ-চিকিৎসিত লার্ভার মাইক্রোবিয়াল ইনডেক্স, ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত লার্ভার চেয়ে বেশি ছিল (চিত্র ৪খ)। যদিও গোষ্ঠীগুলোর মধ্যে প্রাচুর্যের এই পার্থক্য পরিসংখ্যানগতভাবে তাৎপর্যপূর্ণ ছিল না, তবে এটি অ-চিকিৎসিত পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত লার্ভার ক্ষেত্রে পরিলক্ষিত প্রাচুর্যের চেয়ে উল্লেখযোগ্যভাবে কম ছিল (চিত্র ৪গ)। আপেক্ষিক প্রাচুর্য থেকে দেখা যায় যে, কন্ট্রোল পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত লার্ভার মাইক্রোবায়োটা, ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত পরাগরেণু দ্বারা প্রতিপালিত লার্ভার মাইক্রোবায়োটার চেয়ে বেশি বৈচিত্র্যময় ছিল (চিত্র ৫ক)। বর্ণনামূলক বিশ্লেষণে কন্ট্রোল এবং ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত নমুনাগুলোতে ২৮টি জেনাসের উপস্থিতি প্রকাশ পেয়েছে (চিত্র ৫খ)। ১৮এস সিকোয়েন্সিং ব্যবহার করে করা বিশ্লেষণে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পাওয়া যায়নি (পরিপূরক চিত্র ২)।
১৬এস সিকোয়েন্সের উপর ভিত্তি করে এসএভি প্রোফাইলগুলোকে ফাইলাম স্তরে শ্যানন রিচনেস এবং অবজার্ভড রিচনেসের সাথে তুলনা করা হয়েছিল। (ক) অপরিশোধিত পরাগ-খাওয়ানো বা কন্ট্রোল (নীল) এবং ম্যানকোজেব-খাওয়ানো লার্ভার (কমলা) সামগ্রিক মাইক্রোবিয়াল কমিউনিটি কাঠামোর উপর ভিত্তি করে প্রিন্সিপাল কোঅর্ডিনেট অ্যানালাইসিস (PCoA)। প্রতিটি ডেটা পয়েন্ট একটি পৃথক নমুনাকে প্রতিনিধিত্ব করে। মাল্টিভেরিয়েট টি ডিস্ট্রিবিউশনের ব্রে-কার্টিস ডিসটেন্স ব্যবহার করে PCoA গণনা করা হয়েছিল। ডিম্বাকৃতিগুলো ৮০% কনফিডেন্স লেভেলকে প্রতিনিধিত্ব করে। (খ) বক্সপ্লট, কাঁচা শ্যানন ওয়েলথ ডেটা (পয়েন্ট) এবং গ. অবজার্ভড ওয়েলথ। বক্সপ্লটগুলো মিডিয়ান লাইন, ইন্টারকোয়ার্টাইল রেঞ্জ (IQR), এবং ১.৫ × IQR (n = 3)-এর জন্য বক্স দেখায়।
ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত এবং অ-চিকিৎসিত পরাগরেণু খেয়ে বড় হওয়া লার্ভার অণুজীব সম্প্রদায়ের গঠন। (ক) লার্ভার মধ্যে অণুজীব গণের আপেক্ষিক প্রাচুর্য। (খ) শনাক্তকৃত অণুজীব সম্প্রদায়ের হিট ম্যাপ। ডেলফটিয়া (অডস রেশিও (OR) = ০.৬৭, P = ০.০০৩০) এবং সিউডোমোনাস (OR = ০.৩, P = ০.০০৭৪), মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম (OR = ০.৭৫, P = ০.০৬১৭) (OR = ১.৫, P = ০.০০৬০); হিট ম্যাপের সারিগুলো কোরিলেশন ডিসটেন্স এবং অ্যাভারেজ কানেক্টিভিটি ব্যবহার করে ক্লাস্টার করা হয়েছে।
আমাদের ফলাফল দেখায় যে, ফুল ফোটার সময় ব্যাপকভাবে প্রয়োগ করা সংস্পর্শজনিত (ম্যানকোজেব) এবং সিস্টেমিক (পাইরোস্ট্রোবিন ও ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন) ছত্রাকনাশকের মৌখিক সংস্পর্শে ভুট্টার লার্ভার ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে কমে যায় এবং মৃত্যুহার বেড়ে যায়। এছাড়াও, পিউপাপূর্ব পর্যায়ে ম্যানকোজেব মাইক্রোবায়োমের বৈচিত্র্য ও প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে। মাইক্লোবুটানিল, আরেকটি সিস্টেমিক ছত্রাকনাশক, তিনটি মাত্রাতেই লার্ভার দৈহিক ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে কমিয়ে দেয়। এই প্রভাব দ্বিতীয় (৫ম দিন) এবং তৃতীয় (৮ম দিন) সময়কালে সুস্পষ্ট ছিল। এর বিপরীতে, সাইপ্রোডিনিল এবং ক্যাপটান নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর তুলনায় ওজন বৃদ্ধি বা বেঁচে থাকার হার উল্লেখযোগ্যভাবে কমায়নি। আমাদের জানামতে, সরাসরি পরাগের সংস্পর্শের মাধ্যমে ভুট্টা ফসল রক্ষার জন্য ব্যবহৃত বিভিন্ন ছত্রাকনাশকের মাঠপর্যায়ের প্রয়োগের প্রভাব নির্ধারণকারী এটিই প্রথম গবেষণা।
নিয়ন্ত্রিত প্রয়োগের তুলনায় সমস্ত ছত্রাকনাশক প্রয়োগ দৈহিক ওজন বৃদ্ধি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করেছে। লার্ভার দৈহিক ওজন বৃদ্ধির উপর ম্যানকোজেবের প্রভাব ছিল সর্বাধিক, যা গড়ে ৫১% হ্রাস করে, এর পরেই ছিল পাইরিথিওস্ট্রোবিন। তবে, অন্যান্য গবেষণায় লার্ভা পর্যায়ে ছত্রাকনাশকের মাঠপর্যায়ের প্রয়োগের কোনো প্রতিকূল প্রভাবের কথা জানা যায়নি৪৪। যদিও ডাইথিওকার্বামেট বায়োসাইডগুলির স্বল্প তীব্র বিষাক্ততা রয়েছে বলে দেখা গেছে৪৫, ম্যানকোজেবের মতো ইথিলিন বিসডাইথিওকার্বামেট (EBDCS) ভেঙে ইউরিয়া ইথিলিন সালফাইডে পরিণত হতে পারে। অন্যান্য প্রাণীদের মধ্যে এর মিউটাজেনিক প্রভাবের কারণে, এই ভাঙনজাত পদার্থটিই পর্যবেক্ষণকৃত প্রভাবগুলির জন্য দায়ী হতে পারে৪৬,৪৭। পূর্ববর্তী গবেষণায় দেখা গেছে যে ইথিলিন থায়োইউরিয়ার গঠন উচ্চ তাপমাত্রা৪৮, আর্দ্রতার মাত্রা৪৯ এবং পণ্য সংরক্ষণের সময়কাল৫০-এর মতো বিষয় দ্বারা প্রভাবিত হয়। বায়োসাইডের জন্য সঠিক সংরক্ষণ ব্যবস্থা এই পার্শ্ব প্রতিক্রিয়াগুলি প্রশমিত করতে পারে। এছাড়াও, ইউরোপীয় খাদ্য নিরাপত্তা কর্তৃপক্ষ পাইরিথিওপাইডের বিষাক্ততা নিয়ে উদ্বেগ প্রকাশ করেছে, যা অন্যান্য প্রাণীর পরিপাকতন্ত্রে কার্সিনোজেনিক (ক্যান্সার সৃষ্টিকারী) হিসেবে প্রমাণিত হয়েছে51।
ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন মুখে সেবন করালে ভুট্টার মাজরা পোকার লার্ভার মৃত্যুহার বৃদ্ধি পায়। এর বিপরীতে, মাইক্লোবুটানিল, সিপ্রোসাইক্লিন এবং ক্যাপটান মৃত্যুহারের উপর কোনো প্রভাব ফেলেনি। এই ফলাফলগুলো লাডুরনার এট আল.৫২-এর ফলাফলের থেকে ভিন্ন, যারা দেখিয়েছিলেন যে ক্যাপটান পূর্ণাঙ্গ ও. লিগনারিয়া এবং এপিস মেলিফেরা এল. (হাইমেনোপটেরা, এপিসিডি)-এর বেঁচে থাকার হার উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করে। এছাড়াও, ক্যাপটান এবং বসক্যালাইডের মতো ছত্রাকনাশক লার্ভার মৃত্যু৫২,৫৩,৫৪ ঘটাতে বা তাদের খাদ্যাভ্যাস পরিবর্তন করতে দেখা গেছে৫৫। এই পরিবর্তনগুলো, ফলস্বরূপ, পরাগরেণুর পুষ্টিগুণ এবং পরিশেষে লার্ভা পর্যায়ের শক্তি অর্জনকে প্রভাবিত করতে পারে। নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীতে পরিলক্ষিত মৃত্যুহার অন্যান্য গবেষণার ৫৬,৫৭ সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ ছিল।
আমাদের গবেষণায় পরিলক্ষিত পুরুষ-প্রধান লিঙ্গ অনুপাতের কারণ হিসেবে অপর্যাপ্ত সঙ্গম এবং ফুল ফোটার সময়কার প্রতিকূল আবহাওয়ার মতো বিষয়গুলোকে ব্যাখ্যা করা যেতে পারে, যেমনটি পূর্বে ভিসেন্স এবং বোশ ও. কর্নুটা-র ক্ষেত্রে প্রস্তাব করেছিলেন। যদিও আমাদের গবেষণায় স্ত্রী ও পুরুষ মৌমাছিরা সঙ্গমের জন্য চার দিন সময় পেয়েছিল (এই সময়কাল সাধারণত সফল সঙ্গমের জন্য যথেষ্ট বলে মনে করা হয়), আমরা চাপ কমানোর জন্য ইচ্ছাকৃতভাবে আলোর তীব্রতা কমিয়ে দিয়েছিলাম। তবে, এই পরিবর্তনটি অনিচ্ছাকৃতভাবে সঙ্গম প্রক্রিয়ায় হস্তক্ষেপ করতে পারে৬১। এছাড়াও, মৌমাছিরা বেশ কয়েকদিন ধরে প্রতিকূল আবহাওয়ার সম্মুখীন হয়, যার মধ্যে বৃষ্টি এবং নিম্ন তাপমাত্রা (<৫°সে.) অন্তর্ভুক্ত, যা সঙ্গমের সাফল্যেও নেতিবাচক প্রভাব ফেলতে পারে৪,২৩।
যদিও আমাদের গবেষণাটি সম্পূর্ণ লার্ভার মাইক্রোবায়োমের উপর দৃষ্টি নিবদ্ধ করেছিল, আমাদের ফলাফলগুলি ব্যাকটেরিয়া সম্প্রদায়ের মধ্যে সম্ভাব্য সম্পর্ক সম্পর্কে অন্তর্দৃষ্টি প্রদান করে যা মৌমাছির পুষ্টি এবং ছত্রাকনাশকের সংস্পর্শের জন্য গুরুত্বপূর্ণ হতে পারে। উদাহরণস্বরূপ, অপরিশোধিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার তুলনায় ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার অণুজীব সম্প্রদায়ের গঠন এবং প্রাচুর্য উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল। অপরিশোধিত পরাগরেণু গ্রহণকারী লার্ভার মধ্যে, প্রোটিওব্যাকটেরিয়া এবং অ্যাক্টিনোব্যাকটেরিয়া ব্যাকটেরিয়া গোষ্ঠীগুলি প্রভাবশালী ছিল এবং প্রধানত বায়বীয় বা ঐচ্ছিকভাবে বায়বীয় ছিল। ডেলফট ব্যাকটেরিয়া, যা সাধারণত একাকী মৌমাছির প্রজাতির সাথে সম্পর্কিত, তাদের অ্যান্টিবায়োটিক কার্যকলাপ রয়েছে বলে জানা যায়, যা রোগজীবাণুর বিরুদ্ধে একটি সম্ভাব্য প্রতিরক্ষামূলক ভূমিকা নির্দেশ করে। আরেকটি ব্যাকটেরিয়া প্রজাতি, সিউডোমোনাস, অপরিশোধিত পরাগরেণু খাওয়ানো লার্ভার মধ্যে প্রচুর পরিমাণে ছিল, কিন্তু ম্যানকোজেব-চিকিৎসিত লার্ভার মধ্যে এটি উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল। আমাদের ফলাফলগুলি পূর্ববর্তী গবেষণাগুলিকে সমর্থন করে যা সিউডোমোনাসকে O. bicornis35 এবং অন্যান্য একাকী বোলতা34-এর মধ্যে সবচেয়ে প্রাচুর্যপূর্ণ গণগুলির মধ্যে একটি হিসাবে চিহ্নিত করেছে। যদিও ও. কর্নিফ্রন্স-এর স্বাস্থ্যে সিউডোমোনাস-এর ভূমিকার পরীক্ষামূলক প্রমাণ নিয়ে গবেষণা করা হয়নি, তবে এই ব্যাকটেরিয়াটি পেডেরাস ফাসিপেস নামক গুবরে পোকার মধ্যে প্রতিরক্ষামূলক টক্সিনের সংশ্লেষণকে উৎসাহিত করে এবং ইন ভিট্রো-তে আর্জিনিন বিপাককে ত্বরান্বিত করে বলে দেখা গেছে ৩৫, ৬৫। এই পর্যবেক্ষণগুলি ও. কর্নিফ্রন্স লার্ভার বিকাশের সময় ভাইরাস এবং ব্যাকটেরিয়া প্রতিরক্ষায় এর একটি সম্ভাব্য ভূমিকার ইঙ্গিত দেয়। মাইক্রোব্যাকটেরিয়াম হলো আমাদের গবেষণায় চিহ্নিত আরেকটি গণ, যা অনাহার পরিস্থিতিতে ব্ল্যাক সোলজার ফ্লাই লার্ভার মধ্যে প্রচুর পরিমাণে উপস্থিত থাকে বলে জানা গেছে৬৬। ও. কর্নিফ্রন্স লার্ভার ক্ষেত্রে, মাইক্রোব্যাকটেরিয়া চাপের পরিস্থিতিতে অন্ত্রের মাইক্রোবায়োমের ভারসাম্য এবং স্থিতিস্থাপকতা বজায় রাখতে অবদান রাখতে পারে। এছাড়াও, রোডোকক্কাস ও. কর্নিফ্রন্স লার্ভার মধ্যে পাওয়া যায় এবং এটি তার বিষমুক্তকরণ ক্ষমতার জন্য পরিচিত৬৭। এই গণটি এ. ফ্লোরিয়া-র অন্ত্রেও পাওয়া যায়, তবে খুব কম পরিমাণে৬৮। আমাদের ফলাফল অসংখ্য অণুজীবীয় ট্যাক্সার মধ্যে একাধিক জিনগত বৈচিত্র্যের উপস্থিতি প্রদর্শন করে, যা লার্ভার বিপাকীয় প্রক্রিয়াকে পরিবর্তন করতে পারে। তবে, O. cornifrons-এর কার্যকরী বৈচিত্র্য সম্পর্কে আরও ভালো ধারণা থাকা প্রয়োজন।
সারসংক্ষেপে, ফলাফলগুলি ইঙ্গিত করে যে ম্যানকোজেব, পাইরিথিওস্ট্রোবিন এবং ট্রাইফ্লক্সিস্ট্রোবিন ভুট্টার মাজরা পোকার লার্ভার দৈহিক ওজন বৃদ্ধি কমিয়ে দেয় এবং মৃত্যুহার বাড়িয়ে দেয়। যদিও পরাগায়ণকারীদের উপর ছত্রাকনাশকের প্রভাব নিয়ে উদ্বেগ বাড়ছে, এই যৌগগুলির অবশিষ্ট বিপাকের প্রভাব সম্পর্কে আরও ভালোভাবে বোঝার প্রয়োজন রয়েছে। এই ফলাফলগুলি সমন্বিত পরাগায়ণকারী ব্যবস্থাপনা কর্মসূচির সুপারিশে অন্তর্ভুক্ত করা যেতে পারে, যা কৃষকদের নির্দিষ্ট ছত্রাকনাশক নির্বাচন এবং প্রয়োগের সময় পরিবর্তন করে, অথবা কম ক্ষতিকর বিকল্পের ব্যবহারে উৎসাহিত করার মাধ্যমে ফল গাছের ফুল ফোটার আগে ও ফুল ফোটার সময় নির্দিষ্ট ছত্রাকনাশকের ব্যবহার এড়াতে সাহায্য করে। এই তথ্য কীটনাশক ব্যবহারের উপর সুপারিশ তৈরির জন্য গুরুত্বপূর্ণ, যেমন ছত্রাকনাশক নির্বাচনের সময় বিদ্যমান স্প্রে কর্মসূচি সামঞ্জস্য করা এবং স্প্রে করার সময় পরিবর্তন করা বা কম ঝুঁকিপূর্ণ বিকল্পের ব্যবহারকে উৎসাহিত করা। লিঙ্গ অনুপাত, খাদ্যাভ্যাস, অন্ত্রের মাইক্রোবায়োম এবং ভুট্টার মাজরা পোকার ওজন হ্রাস ও মৃত্যুর অন্তর্নিহিত আণবিক প্রক্রিয়াগুলির উপর ছত্রাকনাশকের প্রতিকূল প্রভাব সম্পর্কে আরও গবেষণা প্রয়োজন।
চিত্র ১ এবং ২-এর উৎস ডেটা ১, ২ এবং ৩ ফিগশেয়ার ডেটা রিপোজিটরিতে DOI: https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996245 এবং https://doi.org/10.6084/m9.figshare.24996233-এর অধীনে জমা দেওয়া হয়েছে। বর্তমান গবেষণায় বিশ্লেষিত সিকোয়েন্সগুলো (চিত্র ৪, ৫) অ্যাকসেশন নম্বর PRJNA1023565-এর অধীনে এনসিবিআই এসআরএ রিপোজিটরিতে উপলব্ধ আছে।
বোশ, জে. এবং কেম্প, ডব্লিউপি. কৃষি ফসলের পরাগায়ণকারী হিসেবে মৌমাছি প্রজাতির উন্নয়ন ও প্রতিষ্ঠা: অস্মিয়া (হাইমেনোপটেরা: মেগাচিলিডি) গণ এবং ফল গাছের উদাহরণ। বুলেটিন এনটোমোর রিসোর্স ৯২, ৩–১৬ (২০০২)।
পার্কার, এম জি প্রমুখ। নিউ ইয়র্ক এবং পেনসিলভেনিয়ার আপেল চাষীদের মধ্যে পরাগায়ন পদ্ধতি এবং বিকল্প পরাগায়ক সম্পর্কে ধারণা। হালনাগাদ। কৃষি। খাদ্য ব্যবস্থা। ৩৫, ১–১৪ (২০২০)।
কোচ আই., লন্সডর্ফ ইডব্লিউ, আর্টজ ডিআর, পিটস-সিঙ্গার টিএল এবং রিকেটস টিএইচ, দেশীয় মৌমাছি ব্যবহার করে বাদামের পরাগায়নের বাস্তুবিদ্যা ও অর্থনীতি। জে. ইকোনমিক্স. নটমোর. ১১১, ১৬–২৫ (২০১৮)।
লি, ই., হে, ওয়াই., এবং পার্ক, ওয়াই.-এল.। ট্রাগোপানের জীবনচক্রের উপর জলবায়ু পরিবর্তনের প্রভাব: জনসংখ্যা ব্যবস্থাপনার জন্য এর তাৎপর্য। ক্লাইম্ব. চেঞ্জ ১৫০, ৩০৫–৩১৭ (২০১৮)।
আর্টজ, ডিআর এবং পিটস-সিঙ্গার, টিএল "দুটি পালিত একাকী মৌমাছির (Osmia lignaria এবং Megachile rotundata) বাসা তৈরির আচরণের উপর ছত্রাকনাশক এবং সহায়ক স্প্রে-র প্রভাব।" প্লস ওয়ান ১০, ই০১৩৫৬৮৮ (২০১৫)।
বোভে, এস. প্রমুখ। একটি স্বল্প-বিষাক্ত ফসলের ছত্রাকনাশক (ফেনবুকোনাজল) পুরুষ মৌমাছির প্রজননগত গুণগত সংকেতে হস্তক্ষেপ করে, যার ফলে বন্য একাকী মৌমাছির সঙ্গম সাফল্য হ্রাস পায়। জে. অ্যাপস. ইকোলজি. ৫৯, ১৫৯৬–১৬০৭ (২০২২)।
সগোলাস্ট্রা এফ. এট আল. নিওনিকোটিনয়েড কীটনাশক এবং আরগোস্টেরল জৈব সংশ্লেষণ তিনটি মৌমাছি প্রজাতির ক্ষেত্রে ছত্রাকনাশকের সমন্বিত মৃত্যুহার দমন করে। পেস্ট কন্ট্রোল. দ্য সায়েন্স. ৭৩, ১২৩৬–১২৪৩ (২০১৭)।
কুহনেমান জেজি, গিলুং জে, ভ্যান ডাইক এমটি, ফোর্ডাইস আরএফ এবং ড্যানফোর্থ বিএন। একাকী বোলতার লার্ভা কাণ্ডে বাসা বাঁধা মৌমাছি Osmia cornifrons (Megachilidae)-কে পরাগরেণু দ্বারা সরবরাহকৃত ব্যাকটেরিয়ার বৈচিত্র্য পরিবর্তন করে। ফ্রন্ট. মাইক্রোঅর্গানিজম. ১৩, ১০৫৭৬২৬ (২০২৩)।
ধরমপাল পিএস, ড্যানফোর্থ বিএন এবং স্টেফান এসএ। গাঁজানো পরাগরেণুতে থাকা বহিঃসহজীবী অণুজীবগুলো একাকী মৌমাছির বিকাশের জন্য পরাগরেণুটির মতোই গুরুত্বপূর্ণ। বাস্তুবিদ্যা। বিবর্তন। ১২. ই৮৭৮৮ (২০২২)।
কেল্ডারার এম, মানিসি এলএম, ক্যাপুটো এফ এবং থালহাইমার এম। আপেল বাগানে পুনঃবীজ বপনজনিত রোগ নিয়ন্ত্রণের জন্য সারির মধ্যবর্তী রোপণ: অণুজীবীয় সূচকের উপর ভিত্তি করে একটি ব্যবহারিক কার্যকারিতা সমীক্ষা। প্ল্যান্ট সয়েল ৩৫৭, ৩৮১–৩৯৩ (২০১২)।
মার্টিন পিএল, ক্রাভচিক টি., খোদাদাদি এফ., আচিমোভিচ এসজি এবং পিটার কেএ মার্কিন যুক্তরাষ্ট্রের মধ্য-আটলান্টিক অঞ্চলে আপেলের তিক্ত পচন রোগ: রোগ সৃষ্টিকারী প্রজাতির মূল্যায়ন এবং আঞ্চলিক আবহাওয়ার পরিস্থিতি ও জাতের সংবেদনশীলতার প্রভাব। ফাইটো প্যাথলজি ১১১, ৯৬৬–৯৮১ (২০২১)।
কুলেন এমজি, থম্পসন এলজে, ক্যারোলান জেকে, স্টাউট জেকে এবং স্ট্যানলি ডিএ ছত্রাকনাশক, আগাছানাশক এবং মৌমাছি: বিদ্যমান গবেষণা ও পদ্ধতির একটি পদ্ধতিগত পর্যালোচনা। পিএলওএস ওয়ান ১৪, ই০২২৫৭৪৩ (২০১৯)।
পিলিং, ইডি এবং জেপসন, পিসি "মৌমাছির (Apis mellifera) উপর EBI ছত্রাকনাশক এবং পাইরেথ্রয়েড কীটনাশকের সমন্বিত প্রভাব"। পেস্টস দ্য সায়েন্স। ৩৯, ২৯৩–২৯৭ (১৯৯৩)।
মুসেন, ইসি, লোপেজ, জেই এবং পেং, সিওয়াই "মৌমাছির লার্ভা Apis mellifera L. (Hymenoptera: Apidae)-এর বৃদ্ধি ও বিকাশের উপর নির্বাচিত ছত্রাকনাশকের প্রভাব"। ওয়েডনেসডে. এনটোমোর. ৩৩, ১১৫১-১১৫৪ (২০০৪)।
ভ্যান ডাইক, এম., মুলেন, ই., উইকস্টেড, ডি., এবং ম্যাকআর্ট, এস.। বৃক্ষ উদ্যানে পরাগায়ণকারী প্রাণীদের সুরক্ষার জন্য কীটনাশক ব্যবহারের সিদ্ধান্ত নির্দেশিকা (কর্নেল বিশ্ববিদ্যালয়, ২০১৮)।
ইওয়াসাকি, জেএম এবং হোগেনডর্ন, কে। মৌমাছির উপর অ-কীটনাশকের প্রভাব: পদ্ধতিসমূহ এবং প্রকাশিত ফলাফলের একটি পর্যালোচনা। কৃষি। বাস্তুতন্ত্র। বুধবার। ৩১৪, ১০৭৪২৩ (২০২১)।
কোপিট এএম, ক্লিঙ্গার ই, কক্স-ফস্টার ডিএল, রামিরেজ আরএ এবং পিটস-সিঙ্গার টিএল। ওসমিয়া লিগনারিয়া (হাইমেনোপটেরা: মেগাকিলিডি) এর লার্ভার বিকাশের উপর সরবরাহের ধরণ এবং কীটনাশকের সংস্পর্শের প্রভাব। ওয়েডনেসডে। এনটোমোর। ৫১, ২৪০–২৫১ (২০২২)।
কোপিট এএম এবং পিটস-সিঙ্গার টিএল, একাকী ও শূন্য-বাসার মৌমাছিদের কীটনাশক সংস্পর্শের পথসমূহ। ওয়েডনেসডে। এনটোমোর। ৪৭, ৪৯৯–৫১০ (২০১৮)।
প্যান, এনটি প্রমুখ। পূর্ণবয়স্ক জাপানি বাগান মৌমাছির (Osmia cornifrons) উপর কীটনাশকের বিষাক্ততা নির্ণয়ের জন্য একটি নতুন ভক্ষণ-জৈবপরীক্ষা প্রণালী। দ্য সায়েন্স রিপোর্টস ১০, ৯৫১৭ (২০২০)।