জিবেরেলিন ও পটাশিয়াম নাইট্রেটের পারস্পরিক ক্রিয়া এবং আঙ্গুরের ভৌত-রাসায়নিক বৈশিষ্ট্যের উপর পরাগরেণুর উৎসের প্রভাব।

খাওয়ার উপযোগী আঙুরের ক্ষেত্রে, যার মধ্যে স্ত্রী জাত সিয়াহ-ই-সমরখন্দিও অন্তর্ভুক্ত, থোকার গঠন এবং ফলের আকার অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। তবে, এই আঙুর চাষে বেশ কিছু প্রতিবন্ধকতা রয়েছে, যেমন ফল ঝরে যাওয়া এবং বামনাকৃতির ফল, যার ফলে ফলন এবং বাজার মূল্য হ্রাস পায়। সিয়াহ-ই-সমরখন্দি জাতটির জন্য ফল ঝরে যাওয়া একটি প্রধান উদ্বেগের বিষয়। তাই, এই গবেষণায় উন্মুক্ত এবং নিয়ন্ত্রিত পরাগায়ন পরিস্থিতিতে সিয়াহ-ই-সমরখন্দি জাতের পরাগায়নের উপর ০, ৩০, ৬০, এবং ৯০ মিলিগ্রাম/লিটার⁻¹ GA₃ এবং ০ ও ১.৫% HKO₃-এর প্রভাব পরীক্ষা করা হয়েছে। এছাড়াও, আরেকটি পরীক্ষায় সিয়াহ-ই-সমরখন্দি জাতের পরাগায়নের উপর পরাগরেণুর উৎসসমূহের (সিয়াহ-ই-শিরাজ, আসকারি, রোতাবি, রিশবাবা, এবং আতাবাকি জাত) প্রভাব মূল্যায়ন করা হয়েছে। ফলাফলে দেখা গেছে যে, আতাবাকি জাতটি ছাড়া অন্যান্য জাতের পরাগরেণু সিয়াহ-এ-সমরখান্দি জাতটির ফল ও কাঁদি উভয়েরই ফলন বৃদ্ধি করেছে। সামগ্রিকভাবে, ৩০ মিলিগ্রাম/লিটার এর সংমিশ্রণজিবেরেলিন (GA₃)এবং ১.৫% পটাশিয়াম নাইট্রেট (KNO₃) ফল ও কাঁদির গুণমান এবং ফলনের উপর সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য উদ্দীপক প্রভাব ফেলেছিল।
এর সতেজতা এবং উচ্চ অ্যান্থোসায়ানিন উপাদানের জন্য এই জাতটি ইরান এবং ফার্স প্রদেশে বিশেষভাবে গুরুত্বপূর্ণ। সিয়াহ-ই-সমরখান্দি আঙ্গুর শুষ্ক জলবায়ুতে জন্মায়, যেখানে প্রদেশের বিভিন্ন অঞ্চলে গড় বৃষ্টিপাত ৩০০ থেকে ৪৫০ মিমি পর্যন্ত হয়ে থাকে। যেহেতু আঙ্গুরের থোকার চেহারা এবং ফলের আকার সতেজতার জন্য অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ, তাই ফলের আকারের অসামঞ্জস্যতা, থোকার নিম্নমান এবং প্রতি থোকায় ফলের সংখ্যা কম (ফল ঝরে যাওয়ার কারণে) এর মতো বেশ কিছু সমস্যা দেখা দেয়, যা ফলন কমিয়ে দেয়।³ ভোজ্য আঙ্গুরের বীজের নির্যাস প্রাকৃতিক অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট, প্রিজারভেটিভ এবং খাদ্য জীবাণুমুক্তকারী হিসেবে কাজ করাসহ বিভিন্ন জৈবিক প্রভাব ফেলতে পারে, যার ফলে এটি ক্ষতিকারক অণুজীব দ্বারা খাদ্য দূষণ প্রতিরোধ করে।

আঙুরের জাতের সামঞ্জস্যের ক্ষেত্রে, বেশিরভাগ জাতই স্ব-পরাগায়ণক্ষম এবং স্ব-পরাগায়নকারী। আঙুরের ক্ষেত্রে বদ্ধ উদ্ভিদকুলে নিষেক একটি সাধারণ ঘটনা। যদিও এর ব্যতিক্রম আছে, তবে তা বিরল; কিছু জাত স্ব-অসঙ্গায়ক। ফলের ফলন এবং গুণমান অনেক কারণের দ্বারা প্রভাবিত হয়। এর অন্যতম মৌলিক কারণ হলো আঙুরের জাতের প্রজনন জীববিদ্যা। উর্বরতা নিশ্চিত করার জন্য ফুলের অঙ্গের পূর্ণ বিকাশ এবং উচ্চ অঙ্কুরোদগম হারসহ উপযুক্ত পরাগরেণু উৎপাদন অপরিহার্য। পরাগরেণুর অঙ্কুরোদগম জাত, পুষ্টির অবস্থা এবং পরিবেশগত কারণের উপর নির্ভর করে এবং পরাগরেণুর অঙ্কুরোদগমের জন্য সর্বোত্তম পরিস্থিতি বিভিন্ন রকম হয়ে থাকে।
তাজা বীজহীন আঙুরে জিবেরেলিনের ব্যবহার ফল ধরার সময় ফলের আকার বাড়াতে পারে। ৮.
উচ্চ মাত্রায় আঙুর চাষের পরিপ্রেক্ষিতে, এর গুণমান উন্নত করার জন্য উপযুক্ত সমাধান খুঁজে বের করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ। সিয়াহ-এ-শিরাজ এবং অন্যান্য জাতের উপর পরাগরেণু শোধন পদ্ধতি প্রয়োগ করা হয়েছিল, কারণ এই পদ্ধতিগুলোর ফলে উচ্চ অঙ্কুরোদগম হার সম্পন্ন পরাগরেণু পাওয়া যায় (তথ্য সরবরাহ করা হয়নি)। সিয়াহ-এ-সমরখন্দি জাতের গর্ভদণ্ডে এই পরাগরেণুগুলো (স্বাস্থ্যকর পরাগরেণু অক্সিন এবং GA3-এর একটি সমৃদ্ধ উৎস) স্থাপন করলে এবং তাদের অঙ্কুরোদগম ঘটলে তা ডিম্বাশয়ের বৃদ্ধিকে উদ্দীপিত করে, যার ফলে এই হরমোনগুলো অধিক পরিমাণে সংশ্লেষিত হয় এবং পরিশেষে ফল গঠিত হয়। ফলের মধ্যে স্বাস্থ্যকর পরাগরেণুর উপস্থিতি স্বাস্থ্যকর বীজ গঠনে সহায়তা করে (চিত্র ১এ-এফ)। এই পরীক্ষার প্রধান উদ্দেশ্য ছিল সিয়াহ-এ-সমরখন্দি জাতের আঙুরে ফল ফেটে যাওয়ার কারণ এবং এই সমস্যা প্রতিরোধ বা প্রশমনে জিবেরেলিন (GA3) ও পটাশিয়াম নাইট্রেট (KNO3)-এর মিথস্ক্রিয়া এবং পর-পরাগায়নের মতো পদ্ধতির কার্যকারিতা অনুসন্ধান করা।
এই পরীক্ষাটি দুই বছর ধরে (২০২১-২০২২) ইরানের শিরাজ শহরের উত্তর-পশ্চিমে অবস্থিত খোরাল গ্রামের একটি বাণিজ্যিক বৃষ্টি-নির্ভর আঙুর বাগানে পরিচালিত হয়েছিল (শিরাজ থেকে ৩৫ কিমি উত্তর-পশ্চিমে, ২৯°৫৭′ উত্তর, ৫২°১৪′ দক্ষিণ)। এই অঞ্চলের জলবায়ু মৃদু ও শীতল, গড় বার্ষিক বৃষ্টিপাত ৪৫০ মিমি এবং মাটি এঁটেল-দোআঁশ। আঙুর গাছগুলো সারিতে ৩.৫ মিটার এবং প্রতিটি গাছের মধ্যে ৪ মিটার দূরত্বে রোপণ করা হয়েছিল। আঙুর বাগানটিতে কোনো সেচ দেওয়া হয়নি (বৃষ্টি-নির্ভর কৃষি)। উদ্ভিদ উপাদান সংগ্রহ প্রাসঙ্গিক প্রাতিষ্ঠানিক, জাতীয় এবং আন্তর্জাতিক নির্দেশিকা ও নিয়মকানুন মেনে করা হয়েছিল এবং শিরাজ বিশ্ববিদ্যালয়ের সহযোগিতায় একটি বাণিজ্যিক উদ্যানপালন সংস্থা কর্তৃক অনুমোদিত হয়েছিল।
প্রথম ও দ্বিতীয় পরীক্ষায় র‍্যান্ডমাইজড ব্লক ডিজাইনের উপর ভিত্তি করে একটি ফ্যাক্টোরিয়াল ডিজাইন ব্যবহার করা হয়েছিল এবং এগুলো চারবার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছিল।
তৃতীয় পরীক্ষাটিতে পাঁচটি জাতের (রোতাবি, রিশবাবা, আসকারি, আতাবাকি এবং সিয়াহ-এ-শিরাজ) পরাগরেণু ব্যবহার করে সিয়াহ-এ-সমরঘান্ডি জাতটির পর-পরাগায়ণ (নিয়ন্ত্রিত পরাগায়ণ) করা হয়েছিল। এই পরীক্ষাটিতে সিয়াহ-এ-সমরঘান্ডি জাতটির স্ব-পরাগায়ণের জন্য এর পরাগরেণু ব্যবহার করা হয়েছিল, যা নিয়ন্ত্রক হিসেবে কাজ করে।
সিয়াহ-এ-সমরঘান্ডি আঙ্গুরের প্রতিটি জাতের ফুল ফোটার সময়কালে, এই জাতগুলো থেকে পরাগরেণু নিয়ে চারটি নির্বাচিত পুষ্পমঞ্জরিতে প্রয়োগ করা হয়েছিল। ফুল ফোটার এক থেকে তিন দিন আগে, নির্বাচিত পুষ্পমঞ্জরিগুলোকে কাগজের ব্যাগে রাখা হয়েছিল। পরাগায়নকারী জাতের পঁচিশ শতাংশ ফুল ব্যাগগুলোতে রাখা হয়েছিল। ফুল ফোটার দশ থেকে চৌদ্দ দিন পর, পুষ্পমঞ্জরিগুলো থেকে সমস্ত কাগজের ব্যাগ সরিয়ে ফেলা হয়েছিল।
ফল পাকার পর (দ্রবণীয় কঠিন পদার্থের পরিমাণ ≥১৬%), প্রতিটি আঙুরের ফলন আলাদাভাবে পরিমাপ করা হয়েছিল। এরপর লতাটির চারপাশ থেকে দৈবচয়নের ভিত্তিতে আটটি থোকা (চারটি ব্যাগে ভরা, বাকিগুলো খোলা) নির্বাচন করে পরিমাণগত ও গুণগত বৈশিষ্ট্য নির্ণয়ের জন্য ইরানের শিরাজ বিশ্ববিদ্যালয়ের কৃষি অনুষদের উদ্যানতত্ত্ব বিভাগের শারীরবৃত্তীয় গবেষণাগারে স্থানান্তর করা হয়।
ফুল ফোটার ১০ দিন আগে ফুলের সংখ্যা এবং ফুল ফোটার ১০ দিন পরে গঠিত ফলের সংখ্যা গণনা করে নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে ফল ধরার হার গণনা করা হয়।
প্রথম দুটি পরীক্ষায়, প্রতিটি কাঁদি থেকে দৈবচয়ন পদ্ধতিতে ১০টি ফল নির্বাচন করা হয়েছিল; তৃতীয় পরীক্ষায়, ৫০টি ফল নির্বাচন করা হয়েছিল। প্রতিটি ফলের মধ্যে বীজের সংখ্যা গণনা করা হয়েছিল এবং প্রতিটি পরীক্ষামূলক দলে ফলপ্রতি বীজের গড় সংখ্যা নির্ণয় করা হয়েছিল।
ফেনোলিক যৌগ নির্ণয় করার জন্য, ফলের রসের নির্যাসকে ৮০% মিথানলের সাথে ১:১ অনুপাতে লঘু করা হয়েছিল। এরপর, ১০০ μl ইথানল নির্যাসের সাথে ৪০০ μl ফসফেট বাফার এবং ২.৫ ml ফলিন-সিওকালটিউ রিএজেন্ট (সিগমা-অলড্রিচ) মেশানো হয়েছিল। ১ মিনিট পর, মিশ্রণটিতে ২ ml ৭.৫% সোডিয়াম কার্বনেট দ্রবণ যোগ করা হয় এবং নমুনাটিকে ২৫°C তাপমাত্রায় ৫ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করা হয়। এরপর একটি স্পেকট্রোফটোমিটার (বায়োটেক ইন্সট্রুমেন্টস, ইনক., ইউএসএ) ব্যবহার করে ৭৬০ nm-এ শোষণমাত্রা পরিমাপ করা হয়। ফলাফল প্রতি ১০০ গ্রাম তাজা ওজনে মিলিগ্রাম গ্যালিক অ্যাসিড হিসাবে প্রকাশ করা হয়েছে, যেখানে ব্যবহৃত গ্যালিক অ্যাসিড^asএকটি মান।
দুটি ভিন্ন বাফার ব্যবহার করে ডিফারেনশিয়াল পিএইচ পদ্ধতিতে অ্যান্থোসায়ানিনের পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল: পিএইচ ১.০-এ ২৫ mM KCl বাফার এবং পিএইচ ৪.৫-এ ০.৪ M সোডিয়াম অ্যাসিটেট বাফার। প্রতিটি নমুনা উভয় বাফারে ১৫ মিনিটের জন্য ইনকিউবেট করা হয়েছিল এবং প্রতিটি নমুনার জন্য পাঁচটি পুনরাবৃত্তি সহ ৫১০ nm এবং ৭০০ nm-এ অ্যাবজর্বেন্স পরিমাপ করা হয়েছিল। সাবির প্রমুখের পদ্ধতি অনুসারে মোট অ্যান্থোসায়ানিনের পরিমাণ নির্ণয় করা হয়েছিল।
অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ^{নির্ধারিত ছিল}১,১-ডাইফিনাইল-২-ট্রাইনাইট্রোফিনাইলহাইড্রাজিন (DPPH) পদ্ধতি ব্যবহার করে। নির্দিষ্ট পদ্ধতিটি ছিল নিম্নরূপ: ১০০ মিলি ফলের রস মিথানল এবং জল দিয়ে ১:১০০ অনুপাতে মিশ্রিত করা হয়েছিল। এরপর নির্যাসটি মিথানলে প্রস্তুতকৃত ০.১ mM DPPH দ্রবণের ২ মিলির সাথে মেশানো হয়েছিল। ৩০ মিনিট পর, একটি Cecil 2010 UV স্পেকট্রোফটোমিটার ব্যবহার করে প্রাপ্ত দ্রবণের শোষণমাত্রা ৫১৭ nm-এ পরিমাপ করা হয়েছিল। নির্যাস ছাড়া DPPH-এর মুক্ত মূলক শোষণমাত্রাকে নিয়ন্ত্রক হিসেবে ব্যবহার করা হয়েছিল। অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ নিম্নলিখিত সূত্র ব্যবহার করে গণনা করা হয়েছিল:
এই পরীক্ষায় একটি সম্পূর্ণ এলোমেলো নকশা ব্যবহার করা হয়েছে, যা তিনবার পুনরাবৃত্তি করা হয়েছে (প্রতিটি পুনরাবৃত্তিতে চারটি ক্লাস্টার ছিল)। SAS 9.1 সফটওয়্যার ব্যবহার করে ডেটা বিশ্লেষণ করা হয়েছে এবং ০.০৫ তাৎপর্য স্তরে গড় তুলনা করার জন্য ট্যুকির পরীক্ষা ব্যবহার করা হয়েছে। বহুচলকীয় বিশ্লেষণের জন্য R সফটওয়্যার ব্যবহার করে ক্লাস্টার হিটম্যাপ তৈরি করা হয়েছে।
স্ব-পরাগায়ণ পদ্ধতির (১৪.৯৭%) তুলনায় আতাবাকুই পদ্ধতিতে পর-পরাগায়ণের ক্ষেত্রে টিএসএস-এর মান ছিল ১৬.৯৩%, যা একটি উল্লেখযোগ্য পার্থক্য। অন্যান্য পদ্ধতি এবং স্ব-পরাগায়ণ পদ্ধতির মধ্যে কোনো উল্লেখযোগ্য পার্থক্য পরিলক্ষিত হয়নি (চিত্র ৪বি)।
সর্বোচ্চ অ্যান্টিঅক্সিডেন্ট কার্যকলাপ স্ব-পরাগায়নে (৫৫.৭৮%) পরিলক্ষিত হয়েছে, যেখানে সর্বনিম্ন ছিল আটাবাকা পরাগরেণু (১৮.৮৮%) এবং আসকারি পরাগরেণু (৩১.৫৪%)। অন্যান্য পদ্ধতিগুলো নিয়ন্ত্রণ গোষ্ঠীর থেকে উল্লেখযোগ্যভাবে ভিন্ন ছিল না।