স্পঞ্জ ক্ল্যাথ্রিয়া স্পেসি থেকে বিচ্ছিন্ন এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি SJ2 দ্বারা উৎপাদিত মাইক্রোবিয়াল বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টি-টারমাইট কার্যকলাপ।

কৃত্রিম কীটনাশকের ব্যাপক ব্যবহারের ফলে অনেক সমস্যা দেখা দিয়েছে, যার মধ্যে রয়েছে প্রতিরোধী জীবাণুর উত্থান, পরিবেশগত অবক্ষয় এবং মানব স্বাস্থ্যের ক্ষতি। অতএব, নতুন জীবাণুকীটনাশকমানব স্বাস্থ্য এবং পরিবেশের জন্য নিরাপদ এমন ওষুধ জরুরিভাবে প্রয়োজন। এই গবেষণায়, Enterobacter cloacae SJ2 দ্বারা উৎপাদিত rhamnolipid biosurfactant মশা (Culex quinquefasciatus) এবং উইপোকা (Odontotermes obesus) লার্ভার বিষাক্ততা মূল্যায়নের জন্য ব্যবহার করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে চিকিত্সার মধ্যে একটি ডোজ-নির্ভর মৃত্যুহার ছিল। উইপোকা এবং মশার লার্ভা বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের জন্য 48 ঘন্টায় LC50 (50% প্রাণঘাতী ঘনত্ব) মান একটি নন-লিনিয়ার রিগ্রেশন কার্ভ ফিটিং পদ্ধতি ব্যবহার করে নির্ধারণ করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টিটারমাইট কার্যকলাপের 48-ঘন্টা LC50 মান (95% আত্মবিশ্বাস ব্যবধান) যথাক্রমে 26.49 mg/L (পরিসীমা 25.40 থেকে 27.57) এবং 33.43 mg/L (পরিসীমা 31.09 থেকে 35.68) ছিল। হিস্টোপ্যাথোলজিকাল পরীক্ষা অনুসারে, বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে চিকিৎসার ফলে লার্ভা এবং উইপোকার অর্গানেল টিস্যুর মারাত্মক ক্ষতি হয়েছে। এই গবেষণার ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি SJ2 দ্বারা উৎপাদিত মাইক্রোবিয়াল বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট Cx নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি চমৎকার এবং সম্ভাব্য কার্যকর হাতিয়ার। quinquefasciatus এবং O. obesus।
গ্রীষ্মমন্ডলীয় দেশগুলিতে প্রচুর পরিমাণে মশাবাহিত রোগ দেখা দেয়। মশাবাহিত রোগের প্রাসঙ্গিকতা ব্যাপক। প্রতি বছর ৪০০,০০০ এরও বেশি মানুষ ম্যালেরিয়ায় মারা যায় এবং কিছু বড় শহর ডেঙ্গু, হলুদ জ্বর, চিকুনগুনিয়া এবং জিকার মতো গুরুতর রোগের মহামারীতে ভুগছে। ২. ভেক্টর-বাহিত রোগ বিশ্বব্যাপী ছয়টি সংক্রমণের মধ্যে একটির সাথে সম্পর্কিত, যার মধ্যে মশা সবচেয়ে উল্লেখযোগ্য ঘটনা ঘটায় ৩,৪. কিউলেক্স, অ্যানোফিলিস এবং এডিস হল তিনটি মশার প্রজাতি যা সাধারণত রোগ সংক্রমণের সাথে যুক্ত ৫. এডিস এজিপ্টি মশা দ্বারা সংক্রামিত ডেঙ্গু জ্বরের প্রাদুর্ভাব গত দশকে বৃদ্ধি পেয়েছে এবং এটি একটি উল্লেখযোগ্য জনস্বাস্থ্য হুমকি তৈরি করেছে ৪,৭,৮. বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থার (WHO) মতে, বিশ্বের ৪০% এরও বেশি জনসংখ্যা ডেঙ্গু জ্বরের ঝুঁকিতে রয়েছে, ১০০ টিরও বেশি দেশে বার্ষিক ৫০-১০০ মিলিয়ন নতুন কেস দেখা দেয় ৯,১০,১১. ডেঙ্গু জ্বর বিশ্বব্যাপী একটি প্রধান জনস্বাস্থ্য সমস্যা হয়ে দাঁড়িয়েছে, কারণ এর প্রকোপ বিশ্বব্যাপী বৃদ্ধি পেয়েছে। অ্যানোফিলিস গাম্বিয়া, যা সাধারণত আফ্রিকান অ্যানোফিলিস মশা নামে পরিচিত, গ্রীষ্মমন্ডলীয় এবং উপ-ক্রান্তীয় অঞ্চলে মানব ম্যালেরিয়ার সবচেয়ে গুরুত্বপূর্ণ বাহক। পশ্চিম নীল ভাইরাস, সেন্ট লুইস এনসেফালাইটিস, জাপানি এনসেফালাইটিস এবং ঘোড়া ও পাখির ভাইরাল সংক্রমণ কিউলেক্স মশা দ্বারা সংক্রামিত হয়, যাকে প্রায়শই সাধারণ ঘরের মশা বলা হয়। এছাড়াও, তারা ব্যাকটেরিয়া এবং পরজীবী রোগের বাহকও। বিশ্বে 3,000 টিরও বেশি প্রজাতির উইপোকা রয়েছে এবং তারা 150 মিলিয়ন বছরেরও বেশি সময় ধরে রয়েছে। বেশিরভাগ কীটপতঙ্গ মাটিতে বাস করে এবং সেলুলোজযুক্ত কাঠ এবং কাঠের পণ্য খায়। ভারতীয় উইপোকা ওডোন্টোটারমেস ওবেসাস একটি গুরুত্বপূর্ণ কীটপতঙ্গ যা গুরুত্বপূর্ণ ফসল এবং বৃক্ষরোপণ গাছের মারাত্মক ক্ষতি করে। কৃষিক্ষেত্রে, বিভিন্ন পর্যায়ে উইপোকার আক্রমণ বিভিন্ন ফসল, গাছের প্রজাতি এবং নির্মাণ সামগ্রীর ব্যাপক অর্থনৈতিক ক্ষতি করতে পারে। উইপোকা মানুষের স্বাস্থ্য সমস্যাও সৃষ্টি করতে পারে।
আজকের ওষুধ ও কৃষিক্ষেত্রে অণুজীব এবং কীটপতঙ্গের বিরুদ্ধে প্রতিরোধের বিষয়টি জটিল 20,21। অতএব, উভয় কোম্পানিরই নতুন সাশ্রয়ী অ্যান্টিমাইক্রোবিয়াল এবং নিরাপদ জৈব কীটনাশক সন্ধান করা উচিত। কৃত্রিম কীটনাশক এখন পাওয়া যাচ্ছে এবং এগুলি সংক্রামক এবং অ-লক্ষ্য উপকারী পোকামাকড় তাড়াতে পারে বলে প্রমাণিত হয়েছে 22। সাম্প্রতিক বছরগুলিতে, বিভিন্ন শিল্পে তাদের প্রয়োগের কারণে জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্টগুলির উপর গবেষণা প্রসারিত হয়েছে। জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্টগুলি কৃষি, মাটির প্রতিকার, পেট্রোলিয়াম নিষ্কাশন, ব্যাকটেরিয়া এবং পোকামাকড় অপসারণ এবং খাদ্য প্রক্রিয়াকরণে খুবই কার্যকর এবং গুরুত্বপূর্ণ 23,24। জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্ট বা মাইক্রোবিয়াল সার্ফ্যাক্ট্যান্ট হল জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্ট রাসায়নিক যা উপকূলীয় আবাসস্থল এবং তেল-দূষিত এলাকায় ব্যাকটেরিয়া, ইস্ট এবং ছত্রাকের মতো অণুজীব দ্বারা উৎপাদিত হয় 25,26। রাসায়নিকভাবে প্রাপ্ত সার্ফ্যাক্ট্যান্ট এবং জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্ট দুটি ধরণের যা সরাসরি প্রাকৃতিক পরিবেশ থেকে পাওয়া যায় 27। সামুদ্রিক আবাসস্থল থেকে বিভিন্ন জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্ট পাওয়া যায় 28,29। অতএব, বিজ্ঞানীরা প্রাকৃতিক ব্যাকটেরিয়ার উপর ভিত্তি করে জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্ট উৎপাদনের জন্য নতুন প্রযুক্তি খুঁজছেন 30,31। এই ধরনের গবেষণার অগ্রগতি পরিবেশ সুরক্ষার জন্য এই জৈবিক যৌগগুলির গুরুত্ব প্রদর্শন করে। ব্যাসিলাস, সিউডোমোনাস, রোডোকোকাস, অ্যালকালিজিনস, কোরিনেব্যাকটেরিয়াম এবং এই ব্যাকটেরিয়া প্রজাতিগুলি সু-পণ্ডিত প্রতিনিধি 23,33।
বিভিন্ন ধরণের জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট রয়েছে যার বিস্তৃত প্রয়োগ রয়েছে34। এই যৌগগুলির একটি উল্লেখযোগ্য সুবিধা হল যে তাদের মধ্যে কিছুতে জীবাণুনাশক, লার্ভিসাইডাল এবং কীটনাশক কার্যকলাপ রয়েছে। এর অর্থ হল এগুলি কৃষি, রাসায়নিক, ওষুধ এবং প্রসাধনী শিল্পে ব্যবহার করা যেতে পারে35,36,37,38। যেহেতু বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টগুলি সাধারণত জৈব-জলীয় এবং পরিবেশগতভাবে উপকারী, তাই ফসল রক্ষার জন্য এগুলি সমন্বিত কীটপতঙ্গ ব্যবস্থাপনা কর্মসূচিতে ব্যবহার করা হয়39। সুতরাং, এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি SJ2 দ্বারা উত্পাদিত মাইক্রোবিয়াল বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টগুলির লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টি-টারমাইট কার্যকলাপ সম্পর্কে মৌলিক জ্ঞান অর্জন করা হয়েছে। আমরা র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের বিভিন্ন ঘনত্বের সংস্পর্শে আসার সময় মৃত্যুহার এবং হিস্টোলজিক্যাল পরিবর্তনগুলি পরীক্ষা করেছি। এছাড়াও, আমরা মাইক্রোএলগি, ড্যাফনিয়া এবং মাছের জন্য তীব্র বিষাক্ততা নির্ধারণের জন্য বহুল ব্যবহৃত পরিমাণগত কাঠামো-কার্যকলাপ (QSAR) কম্পিউটার প্রোগ্রাম ইকোলজিক্যাল স্ট্রাকচার-কার্যকলাপ (ECOSAR) মূল্যায়ন করেছি।
এই গবেষণায়, ৩০ থেকে ৫০ মিলিগ্রাম/মিলি (৫ মিলিগ্রাম/মিলি ব্যবধানে) বিভিন্ন ঘনত্বে পরিশোধিত বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের অ্যান্টিটারমাইট কার্যকলাপ (বিষাক্ততা) ভারতীয় উইপোকা, O. obesus এবং চতুর্থ প্রজাতির (quinquefasciatus) মূল্যায়নের বিরুদ্ধে পরীক্ষা করা হয়েছিল। ইনস্টার Cx এর লার্ভা। মশার কুইনকুইফ্যাসিয়াটাসের লার্ভা। O. obesus এবং Cx এর বিরুদ্ধে ৪৮ ঘন্টা ধরে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট LC50 ঘনত্ব। একটি নন-লিনিয়ার রিগ্রেশন কার্ভ ফিটিং পদ্ধতি ব্যবহার করে মশার লার্ভা সনাক্ত করা হয়েছিল। ফলাফলগুলি দেখায় যে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট ঘনত্ব বৃদ্ধির সাথে সাথে উইপোকার মৃত্যুহার বৃদ্ধি পেয়েছে। ফলাফলে দেখা গেছে যে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল অ্যাক্টিভিটি (চিত্র ১) এবং অ্যান্টি-টর্মাইট অ্যাক্টিভিটি (চিত্র ২) ছিল, ৪৮ ঘন্টার LC50 মান (৯৫% CI) যথাক্রমে ২৬.৪৯ মিলিগ্রাম/লি (২৫.৪০ থেকে ২৭.৫৭) এবং ৩৩.৪৩ মিলিগ্রাম/লি (চিত্র ৩১.০৯ থেকে ৩৫.৬৮) ছিল (সারণী ১)। তীব্র বিষাক্ততার (৪৮ ঘন্টা) পরিপ্রেক্ষিতে, বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টকে পরীক্ষিত জীবের জন্য "ক্ষতিকারক" হিসাবে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছে। এই গবেষণায় উৎপাদিত বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টটি চমৎকার লার্ভিসাইডাল অ্যাক্টিভিটি দেখিয়েছে এবং ২৪-৪৮ ঘন্টার মধ্যে ১০০% মৃত্যুহার দেখিয়েছে।
লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপের জন্য LC50 মান গণনা করুন। আপেক্ষিক মৃত্যুহার (%) এর জন্য নন-লিনিয়ার রিগ্রেশন কার্ভ ফিটিং (সলিড লাইন) এবং 95% কনফিডেন্স ইন্টারভাল (ছায়াযুক্ত এলাকা)।
তৃণ-বিরোধী কার্যকলাপের জন্য LC50 মান গণনা করুন। আপেক্ষিক মৃত্যুহার (%) এর জন্য নন-লিনিয়ার রিগ্রেশন কার্ভ ফিটিং (সলিড লাইন) এবং 95% কনফিডেন্স ইন্টারভাল (ছায়াযুক্ত এলাকা)।
পরীক্ষার শেষে, মাইক্রোস্কোপের নীচে রূপগত পরিবর্তন এবং অসঙ্গতিগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। নিয়ন্ত্রণ এবং চিকিত্সা করা গোষ্ঠীগুলিতে 40x বিবর্ধনে রূপগত পরিবর্তনগুলি পর্যবেক্ষণ করা হয়েছিল। চিত্র 3-তে দেখানো হয়েছে, বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে চিকিত্সা করা বেশিরভাগ লার্ভাতে বৃদ্ধির ব্যাঘাত ঘটেছে। চিত্র 3a একটি স্বাভাবিক Cx দেখায়। quinquefasciatus, চিত্র 3b একটি অস্বাভাবিক Cx দেখায়। পাঁচটি নেমাটোড লার্ভা সৃষ্টি করে।
কিউলেক্স কুইনকুইফ্যাসিয়াটাস লার্ভার বিকাশের উপর বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের সাবলেথাল (LC50) ডোজের প্রভাব। হালকা মাইক্রোস্কোপিক চিত্র (ক) 40× ম্যাগনিফিকেশনে একটি স্বাভাবিক Cx এর। কুইনকুইফ্যাসিয়াটাস (খ) অস্বাভাবিক Cx। পাঁচটি নেমাটোড লার্ভার কারণ।
বর্তমান গবেষণায়, চিকিৎসা করা লার্ভা (চিত্র ৪) এবং উইপোকা (চিত্র ৫) এর হিস্টোলজিক্যাল পরীক্ষায় পেটের অংশ হ্রাস এবং পেশী, এপিথেলিয়াল স্তর এবং ত্বকের ক্ষতি সহ বেশ কয়েকটি অস্বাভাবিকতা প্রকাশ পেয়েছে। হিস্টোলজি এই গবেষণায় ব্যবহৃত বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের প্রতিরোধমূলক কার্যকলাপের প্রক্রিয়া প্রকাশ করেছে।
স্বাভাবিক চিকিৎসা না করা চতুর্থ ইনস্টার Cx লার্ভা। কুইনকুয়েফ্যাসিয়াটাস লার্ভা (নিয়ন্ত্রণ: (a,b)) এবং বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে চিকিৎসা করা হয়েছে (চিকিৎসা: (c,d)) এর হিস্টোপ্যাথলজি। তীরচিহ্নগুলি চিকিৎসা করা অন্ত্রের এপিথেলিয়াম (epi), নিউক্লিয়াস (n), এবং পেশী (mu) নির্দেশ করে। বার = 50 µm।
স্বাভাবিক চিকিৎসা না করা O. obesus (নিয়ন্ত্রণ: (a,b)) এবং জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট চিকিৎসা (চিকিৎসা: (c,d)) এর হিস্টোপ্যাথলজি। তীরগুলি যথাক্রমে অন্ত্রের এপিথেলিয়াম (epi) এবং পেশী (mu) নির্দেশ করে। বার = 50 µm।
এই গবেষণায়, প্রাথমিক উৎপাদক (সবুজ শৈবাল), প্রাথমিক ভোক্তা (জলের মাছি) এবং গৌণ ভোক্তা (মাছ) এর ক্ষেত্রে র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট পণ্যের তীব্র বিষাক্ততার পূর্বাভাস দেওয়ার জন্য ECOSAR ব্যবহার করা হয়েছিল। এই প্রোগ্রামটি আণবিক কাঠামোর উপর ভিত্তি করে বিষাক্ততা মূল্যায়ন করার জন্য অত্যাধুনিক পরিমাণগত কাঠামো-কার্যকলাপ যৌগ মডেল ব্যবহার করে। মডেলটি জলজ প্রজাতির জন্য পদার্থের তীব্র এবং দীর্ঘমেয়াদী বিষাক্ততা গণনা করার জন্য কাঠামো-কার্যকলাপ (SAR) সফ্টওয়্যার ব্যবহার করে। বিশেষ করে, সারণি 2 বিভিন্ন প্রজাতির জন্য আনুমানিক গড় প্রাণঘাতী ঘনত্ব (LC50) এবং গড় কার্যকর ঘনত্ব (EC50) এর সংক্ষিপ্তসার করে। রাসায়নিকের বিশ্বব্যাপী সুরেলা শ্রেণীবিভাগ এবং লেবেলিং সিস্টেম (সারণী 3) ব্যবহার করে সন্দেহজনক বিষাক্ততাকে চারটি স্তরে শ্রেণীবদ্ধ করা হয়েছিল।
ভেক্টর-বাহিত রোগ, বিশেষ করে মশার প্রজাতি এবং এডিস মশার নিয়ন্ত্রণ। মিশরীয়রা এখন কঠিন কাজ 40,41,42,43,44,45,46। যদিও পাইরেথ্রয়েড এবং অর্গানোফসফেটের মতো কিছু রাসায়নিকভাবে উপলব্ধ কীটনাশক কিছুটা উপকারী, তবুও তারা ডায়াবেটিস, প্রজনন ব্যাধি, স্নায়বিক ব্যাধি, ক্যান্সার এবং শ্বাসযন্ত্রের রোগ সহ মানব স্বাস্থ্যের জন্য উল্লেখযোগ্য ঝুঁকি তৈরি করে। তাছাড়া, সময়ের সাথে সাথে, এই পোকামাকড়গুলি তাদের প্রতিরোধী হয়ে উঠতে পারে13,43,48। সুতরাং, কার্যকর এবং পরিবেশ বান্ধব জৈবিক নিয়ন্ত্রণ ব্যবস্থা মশা নিয়ন্ত্রণের একটি জনপ্রিয় পদ্ধতি হয়ে উঠবে49,50। বেনেলি51 পরামর্শ দিয়েছিলেন যে মশার বাহকদের প্রাথমিক নিয়ন্ত্রণ শহরাঞ্চলে আরও কার্যকর হবে, তবে তারা গ্রামাঞ্চলে লার্ভিসাইড ব্যবহারের সুপারিশ করেননি52। টম এট আল 53 আরও পরামর্শ দিয়েছিলেন যে অপরিণত পর্যায়ে মশা নিয়ন্ত্রণ করা একটি নিরাপদ এবং সহজ কৌশল হবে কারণ তারা নিয়ন্ত্রণ এজেন্টের প্রতি আরও সংবেদনশীল 54।
একটি শক্তিশালী স্ট্রেন (Enterobacter cloacae SJ2) দ্বারা জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট উৎপাদন ধারাবাহিক এবং আশাব্যঞ্জক কার্যকারিতা দেখিয়েছে। আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণায় জানা গেছে যে Enterobacter cloacae SJ2 ভৌত রাসায়নিক পরামিতি 26 ব্যবহার করে জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট উৎপাদনকে সর্বোত্তম করে তোলে। তাদের গবেষণা অনুসারে, একটি সম্ভাব্য E. cloacae আইসোলেট দ্বারা জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট উৎপাদনের জন্য সর্বোত্তম অবস্থা ছিল 36 ঘন্টার জন্য ইনকিউবেশন, 150 rpm এ আন্দোলন, pH 7.5, 37 °C, লবণাক্ততা 1 ppt, কার্বন উৎস হিসাবে 2% গ্লুকোজ, 1% ইস্ট। 2.61 g/L জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট পেতে নাইট্রোজেন উৎস হিসাবে নির্যাসটি ব্যবহার করা হয়েছিল। এছাড়াও, TLC, FTIR এবং MALDI-TOF-MS ব্যবহার করে জৈবসারফ্যাক্ট্যান্টগুলিকে চিহ্নিত করা হয়েছিল। এটি নিশ্চিত করেছে যে rhamnolipid একটি জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট। গ্লাইকোলিপিড জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট হল অন্যান্য ধরণের জৈবসারফ্যাক্ট্যান্টের মধ্যে সবচেয়ে নিবিড়ভাবে অধ্যয়ন করা শ্রেণী 55। এগুলিতে কার্বোহাইড্রেট এবং লিপিড অংশ থাকে, প্রধানত ফ্যাটি অ্যাসিড চেইন। গ্লাইকোলিপিডের মধ্যে, প্রধান প্রতিনিধি হল র‍্যামনোলিপিড এবং সোফোরোলিপিড56। র‍্যামনোলিপিডগুলিতে দুটি র‍্যামনোজ অংশ থাকে যা মনো- বা ডাই-β-হাইড্রোক্সিডেকানোয়িক অ্যাসিডের সাথে যুক্ত 57। চিকিৎসা ও ওষুধ শিল্পে র‍্যামনোলিপিডের ব্যবহার সুপ্রতিষ্ঠিত 58, কীটনাশক হিসেবে সাম্প্রতিক ব্যবহারের পাশাপাশি 59।
শ্বাসনালীর সাইফনের হাইড্রোফোবিক অঞ্চলের সাথে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের মিথস্ক্রিয়া জলকে তার স্টোম্যাটাল গহ্বরের মধ্য দিয়ে যেতে দেয়, যার ফলে জলজ পরিবেশের সাথে লার্ভার যোগাযোগ বৃদ্ধি পায়। বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের উপস্থিতি শ্বাসনালীকেও প্রভাবিত করে, যার দৈর্ঘ্য পৃষ্ঠের কাছাকাছি, যা লার্ভার জন্য পৃষ্ঠে হামাগুড়ি দিয়ে যাওয়া এবং শ্বাস নেওয়া সহজ করে তোলে। ফলস্বরূপ, জলের পৃষ্ঠের টান হ্রাস পায়। যেহেতু লার্ভা জলের পৃষ্ঠের সাথে সংযুক্ত হতে পারে না, তাই তারা ট্যাঙ্কের নীচে পড়ে যায়, হাইড্রোস্ট্যাটিক চাপ ব্যাহত করে, যার ফলে অতিরিক্ত শক্তি ব্যয় হয় এবং ডুবে মৃত্যু হয়38,60। ঘ্রিবি61 দ্বারা অনুরূপ ফলাফল পাওয়া গেছে, যেখানে ব্যাসিলাস সাবটিলিস দ্বারা উত্পাদিত একটি বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট এফেস্টিয়া কুয়েহনিয়েলার বিরুদ্ধে লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ প্রদর্শন করেছিল। একইভাবে, সিএক্স দাস এবং মুখার্জি23 এর লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ কুইনকুয়েফ্যাসিয়াটাস লার্ভার উপর চক্রীয় লিপোপেপটাইডের প্রভাবও মূল্যায়ন করেছে।
এই গবেষণার ফলাফল Cx-এর বিরুদ্ধে র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ নিয়ে উদ্বেগ প্রকাশ করে। কুইনকুয়েফ্যাসিয়াটাস মশা নিধন পূর্বে প্রকাশিত ফলাফলের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ। উদাহরণস্বরূপ, ব্যাসিলাস গণের বিভিন্ন ব্যাকটেরিয়া দ্বারা উৎপাদিত সার্ফ্যাক্টিন-ভিত্তিক বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট ব্যবহার করা হয়। এবং সিউডোমোনাস এসপিপি। কিছু প্রাথমিক প্রতিবেদনে 64,65,66 ব্যাসিলাস সাবটিলিস23 থেকে লিপোপেপটাইড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভা-হত্যাকারী কার্যকলাপ রিপোর্ট করা হয়েছে। দীপালি এবং অন্যান্যরা 63 দেখেছেন যে স্টেনোট্রোপোমোনাস ম্যালটোফিলিয়া থেকে বিচ্ছিন্ন র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের 10 মিলিগ্রাম/লিটার ঘনত্বে শক্তিশালী লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ ছিল। সিলভা এবং অন্যান্যরা 67 1 গ্রাম/লিটার ঘনত্বে Ae-এর বিরুদ্ধে র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ রিপোর্ট করেছেন। এডিস এজিপ্টি। কানাকডান্ডে এবং অন্যান্যরা। 68 রিপোর্ট করেছে যে ব্যাসিলাস সাবটিলিস দ্বারা উৎপাদিত লিপোপেপটাইড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টগুলি ইউক্যালিপটাসের লিপোফিলিক ভগ্নাংশের সাথে কিউলেক্স লার্ভা এবং উইপোকার সামগ্রিক মৃত্যু ঘটায়। একইভাবে, মাসেন্দ্র এবং অন্যান্যরা 69 রিপোর্ট করেছেন যে E. অপরিশোধিত নির্যাসের লিপোফিলিক n-হেক্সেন এবং EtOAc ভগ্নাংশে কর্মী পিঁপড়ার (ক্রিপ্টোটার্মিস সাইনোসেফালাস লাইট) মৃত্যুহার 61.7%।
পার্থিপান এট আল 70 ম্যালেরিয়া পরজীবী প্লাজমোডিয়ামের বাহক অ্যানোফিলিস স্টিফেনসির বিরুদ্ধে ব্যাসিলাস সাবটিলিস A1 এবং সিউডোমোনাস স্টুটজেরি NA3 দ্বারা উৎপাদিত লাইপোপেপটাইড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের কীটনাশক ব্যবহারের রিপোর্ট করেছেন। তারা দেখেছেন যে লার্ভা এবং পিউপা দীর্ঘকাল বেঁচে থাকে, ডিম্বাণু অবস্থানের সময়কাল কম থাকে, জীবাণুমুক্ত থাকে এবং বিভিন্ন ঘনত্বের বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে চিকিত্সা করা হলে তাদের আয়ুষ্কাল কম থাকে। বিভিন্ন লার্ভা অবস্থার (অর্থাৎ লার্ভা I, II, III, IV এবং পর্যায় পিউপা) জন্য B. সাবটিলিস বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট A1 এর পর্যবেক্ষণ করা LC50 মান যথাক্রমে 3.58, 4.92, 5.37, 7.10 এবং 7.99 mg/L ছিল। তুলনামূলকভাবে, সিউডোমোনাস স্টুটজেরি NA3 এর লার্ভা পর্যায় I-IV এবং পিউপাল পর্যায়ের জন্য জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট যথাক্রমে 2.61, 3.68, 4.48, 5.55 এবং 6.99 মিলিগ্রাম/লিটার ছিল। বেঁচে থাকা লার্ভা এবং পিউপা'র বিলম্বিত ফেনোলজি কীটনাশক চিকিৎসার কারণে সৃষ্ট উল্লেখযোগ্য শারীরবৃত্তীয় এবং বিপাকীয় ব্যাঘাতের ফলাফল বলে মনে করা হয়।
উইকারহ্যামোমাইসেস অ্যানোমালাস স্ট্রেন CCMA 0358 এডিস মশার বিরুদ্ধে ১০০% লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ সহ একটি জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট তৈরি করে। সিলভা এবং অন্যান্যদের রিপোর্টের চেয়ে aegypti 24-ঘন্টা ব্যবধান 38 বেশি ছিল। সূর্যমুখী তেলকে কার্বন উৎস হিসেবে ব্যবহার করে সিউডোমোনাস অ্যারুগিনোসা থেকে উৎপাদিত একটি জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট ৪৮ ঘন্টার মধ্যে ১০০% লার্ভা মেরে ফেলতে দেখা গেছে ৬৭। Abinaya এবং অন্যান্য.72 এবং Pradhan এবং অন্যান্য.73 এছাড়াও Bacillus গণের বেশ কয়েকটি আইসোলেট দ্বারা উৎপাদিত সার্ফ্যাক্ট্যান্টের লার্ভিসাইডাল বা কীটনাশক প্রভাব প্রদর্শন করেছেন। Senthil-Nathan এবং অন্যান্যদের দ্বারা পূর্বে প্রকাশিত একটি গবেষণায় দেখা গেছে যে উদ্ভিদের উপহ্রদের সংস্পর্শে আসা ১০০% মশার লার্ভা মারা যাওয়ার সম্ভাবনা রয়েছে। 74.
সমন্বিত কীটপতঙ্গ ব্যবস্থাপনা কর্মসূচির জন্য পোকামাকড়ের জীববিজ্ঞানের উপর কীটনাশকের অতি-মারাত্মক প্রভাব মূল্যায়ন করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ কারণ উপ-মারাত্মক মাত্রা/ঘনত্ব পোকামাকড়কে হত্যা করে না বরং জৈবিক বৈশিষ্ট্যগুলিকে ব্যাহত করে ভবিষ্যত প্রজন্মের মধ্যে পোকামাকড়ের সংখ্যা হ্রাস করতে পারে। সিকিরা এট আল 75 50 থেকে 300 মিলিগ্রাম/মিলি পর্যন্ত বিভিন্ন ঘনত্বে পরীক্ষা করার সময় র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের (300 মিলিগ্রাম/মিলি) সম্পূর্ণ লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপ (100% মৃত্যুহার) পর্যবেক্ষণ করেছেন। এডিস এজিপ্টি স্ট্রেনের লার্ভা পর্যায়। তারা লার্ভা বেঁচে থাকা এবং সাঁতারের কার্যকলাপের উপর মৃত্যুর সময় এবং অতি-মারাত্মক ঘনত্বের প্রভাব বিশ্লেষণ করেছেন। এছাড়াও, তারা 24-48 ঘন্টা জৈব-সারফ্যাক্ট্যান্টের অতি-মারাত্মক ঘনত্বের সংস্পর্শে আসার পরে (যেমন, 50 মিলিগ্রাম/মিলি এবং 100 মিলিগ্রাম/মিলি) সাঁতারের গতিতে হ্রাস লক্ষ্য করেছেন। যেসব বিষের আশাব্যঞ্জক উপ-মারাত্মক ভূমিকা রয়েছে সেগুলি উন্মুক্ত কীটপতঙ্গের একাধিক ক্ষতি করতে আরও কার্যকর বলে মনে করা হয়।
আমাদের ফলাফলের হিস্টোলজিক্যাল পর্যবেক্ষণ থেকে জানা যায় যে এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়াসি SJ2 দ্বারা উৎপাদিত বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট মশার (Cx. quinquefasciatus) এবং উইপোকা (O. obesus) লার্ভার টিস্যুতে উল্লেখযোগ্যভাবে পরিবর্তন আনে। An. gambiaes.s এবং An. arabica-তে তুলসী তেলের প্রস্তুতির কারণে একই রকম অসঙ্গতি দেখা গেছে, Ochola77 বর্ণনা করেছেন। Kamaraj et al.78 An.-তেও একই রূপগত অস্বাভাবিকতা বর্ণনা করেছেন। Stephansi-এর লার্ভা সোনার ন্যানো পার্টিকেলের সংস্পর্শে এসেছিল। Vasantha-Srinivasan et al.79 আরও রিপোর্ট করেছেন যে রাখালের পার্সের অপরিহার্য তেল Aedes albopictus-এর চেম্বার এবং এপিথেলিয়াল স্তরগুলিকে মারাত্মকভাবে ক্ষতিগ্রস্ত করেছে। Aedes aegypti। Raghavendran et al রিপোর্ট করেছেন যে মশার লার্ভাকে স্থানীয় Penicillium ছত্রাকের 500 mg/ml মাইসেলিয়াল নির্যাস দিয়ে চিকিৎসা করা হয়েছিল। Ae গুরুতর হিস্টোলজিক্যাল ক্ষতি দেখায়। aegypti এবং Cx। মৃত্যুর হার 80। পূর্বে, Abinaya et al. An-এর চতুর্থ ইনস্টার লার্ভা অধ্যয়ন করা হয়েছিল। Stephensi এবং Ae. Aegypti B. licheniformis exopolysaccharides দিয়ে চিকিৎসা করা Aedes aegypti-তে অসংখ্য হিস্টোলজিক্যাল পরিবর্তন লক্ষ্য করা গেছে, যার মধ্যে রয়েছে গ্যাস্ট্রিক সেকাম, পেশীর ক্ষয়, স্নায়ুতন্ত্রের গ্যাংলিয়ার ক্ষতি এবং বিশৃঙ্খলা72। রাঘবেন্দ্রন এবং অন্যান্যদের মতে, P. dalaee মাইসেলিয়াল নির্যাস দিয়ে চিকিৎসার পর, পরীক্ষিত মশার (৪র্থ ইনস্টার লার্ভা) মধ্যগর্ত কোষগুলিতে অন্ত্রের লুমেন ফুলে যাওয়া, আন্তঃকোষীয় উপাদান হ্রাস এবং নিউক্লিয়ার অবক্ষয়81 দেখা গেছে। echinacea পাতার নির্যাস দিয়ে চিকিৎসা করা মশার লার্ভাতেও একই হিস্টোলজিক্যাল পরিবর্তন লক্ষ্য করা গেছে, যা চিকিৎসাকৃত যৌগগুলির কীটনাশক সম্ভাবনা নির্দেশ করে50।
ECOSAR সফটওয়্যারের ব্যবহার আন্তর্জাতিক স্বীকৃতি পেয়েছে82। বর্তমান গবেষণায় দেখা গেছে যে ECOSAR বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের মাইক্রোএলজি (C. vulgaris), মাছ এবং জলের মাছি (D. magna) এর তীব্র বিষাক্ততা জাতিসংঘ দ্বারা সংজ্ঞায়িত "বিষাক্ততা" বিভাগের মধ্যে পড়ে83। ECOSAR ইকোটক্সিসিটি মডেল পদার্থের তীব্র এবং দীর্ঘমেয়াদী বিষাক্ততার পূর্বাভাস দেওয়ার জন্য SAR এবং QSAR ব্যবহার করে এবং প্রায়শই জৈব দূষণকারীর বিষাক্ততার পূর্বাভাস দেওয়ার জন্য ব্যবহৃত হয়82,84।
এই গবেষণায় ব্যবহৃত প্যারাফর্মালডিহাইড, সোডিয়াম ফসফেট বাফার (pH 7.4) এবং অন্যান্য সমস্ত রাসায়নিক পদার্থ ভারতের হাইমিডিয়া ল্যাবরেটরিজ থেকে কেনা হয়েছিল।
বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট উৎপাদন ৫০০ মিলি এরলেনমেয়ার ফ্লাস্কে করা হয়েছিল যেখানে ২০০ মিলি জীবাণুমুক্ত বুশনেল হাস মিডিয়াম ছিল এবং একমাত্র কার্বন উৎস হিসেবে ১% অপরিশোধিত তেল ব্যবহার করা হয়েছিল। এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি SJ2 (১.৪ × ১০৪ CFU/মিলি) এর একটি প্রিকালচার ৩৭°C তাপমাত্রায় ২০০ rpm তাপমাত্রায় ৭ দিনের জন্য একটি অরবিটাল শেকারে টিকা দেওয়া হয়েছিল এবং কালচার করা হয়েছিল। ইনকিউবেশন পিরিয়ডের পরে, ৪°C তাপমাত্রায় ২০ মিনিটের জন্য ৩৪০০×g তাপমাত্রায় কালচার মিডিয়াম সেন্ট্রিফিউজ করে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট বের করা হয়েছিল এবং ফলস্বরূপ সুপারনাট্যান্ট স্ক্রিনিংয়ের উদ্দেশ্যে ব্যবহার করা হয়েছিল। আমাদের পূর্ববর্তী গবেষণা থেকে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের অপ্টিমাইজেশন পদ্ধতি এবং বৈশিষ্ট্য গ্রহণ করা হয়েছিল।
কিউলেক্স কুইনকুইকফ্যাসিয়াটাসের লার্ভা পালাঞ্চিপেতাই, তামিলনাড়ু (ভারত) এর সেন্টার ফর অ্যাডভান্সড স্টাডি ইন মেরিন বায়োলজি (CAS) থেকে প্রাপ্ত করা হয়েছিল। লার্ভাগুলিকে ২৭ ± ২° সেলসিয়াস তাপমাত্রায় ডিআয়োনাইজড জলে ভরা প্লাস্টিকের পাত্রে লালন-পালন করা হয়েছিল এবং ১২:১২ (আলো: অন্ধকার) আলোক-সময়কাল ছিল। মশার লার্ভাকে ১০% গ্লুকোজ দ্রবণ খাওয়ানো হয়েছিল।
খোলা এবং অরক্ষিত সেপটিক ট্যাঙ্কে কিউলেক্স কুইনকুইফ্যাসিয়াটাসের লার্ভা পাওয়া গেছে। ল্যাবরেটরিতে লার্ভা শনাক্ত এবং কালচার করার জন্য স্ট্যান্ডার্ড ক্লাসিফিকেশন নির্দেশিকা ব্যবহার করুন85। বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থার সুপারিশ অনুসারে লার্ভিসাইডাল পরীক্ষা করা হয়েছিল 86। SH। কুইনকুইফ্যাসিয়াটাসের চতুর্থ ইনস্টার লার্ভা 25 মিলি এবং 50 মিলি গ্রুপে বন্ধ টিউবে সংগ্রহ করা হয়েছিল, যেখানে তাদের ধারণক্ষমতার দুই-তৃতীয়াংশ বায়ু ফাঁক ছিল। প্রতিটি টিউবে পৃথকভাবে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট (0-50 মিলিগ্রাম/মিলি) যোগ করা হয়েছিল এবং 25 ডিগ্রি সেলসিয়াসে সংরক্ষণ করা হয়েছিল। নিয়ন্ত্রণ টিউবে শুধুমাত্র পাতিত জল (50 মিলি) ব্যবহার করা হয়েছিল। মৃত লার্ভাগুলিকে বিবেচনা করা হয়েছিল যাদের ইনকিউবেশন পিরিয়ড (12-48 ঘন্টা) 87 চলাকালীন সাঁতার কাটার কোনও লক্ষণ দেখা যায়নি। সমীকরণটি ব্যবহার করে লার্ভা মৃত্যুর শতাংশ গণনা করুন। (1)88।
ওডোন্টোটার্মিটিডি পরিবারে ভারতীয় উইপোকা ওডোন্টোটার্মিস ওবেসাস অন্তর্ভুক্ত, যা কৃষি ক্যাম্পাসে (আন্নামালাই বিশ্ববিদ্যালয়, ভারত) পচা কাঠের মধ্যে পাওয়া যায়। এই জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট (০-৫০ মিলিগ্রাম/মিলি) পরীক্ষা করে দেখুন এটি ক্ষতিকারক কিনা তা নির্ধারণ করুন। ৩০ মিনিট ধরে ল্যামিনার বায়ু প্রবাহে শুকানোর পর, হোয়াটম্যান কাগজের প্রতিটি স্ট্রিপ ৩০, ৪০, অথবা ৫০ মিলিগ্রাম/মিলি ঘনত্বে বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে লেপা হয়েছিল। পেট্রি ডিশের কেন্দ্রে প্রি-কোটেড এবং আনকোটেড কাগজের স্ট্রিপ পরীক্ষা করা হয়েছিল এবং তুলনা করা হয়েছিল। প্রতিটি পেট্রি ডিশে প্রায় ত্রিশটি সক্রিয় উইপোকা O. obesus থাকে। খাদ্য উৎস হিসেবে নিয়ন্ত্রণ এবং পরীক্ষা উইপোকাকে ভেজা কাগজ দেওয়া হয়েছিল। ইনকিউবেশন সময়কাল জুড়ে সমস্ত প্লেট ঘরের তাপমাত্রায় রাখা হয়েছিল। উইপোকা ১২, ২৪, ৩৬ এবং ৪৮ ঘন্টা পরে মারা যায় ৮৯,৯০। এরপর সমীকরণ ১ ব্যবহার করে বিভিন্ন জৈবসারফ্যাক্ট্যান্ট ঘনত্বে উইপোকার মৃত্যুর শতাংশ অনুমান করা হয়েছিল। (২)।
নমুনাগুলি বরফের উপর রাখা হয়েছিল এবং ১০০ মিলি ০.১ এম সোডিয়াম ফসফেট বাফার (pH ৭.৪) ধারণকারী মাইক্রোটিউবে প্যাক করা হয়েছিল এবং রাজীব গান্ধী সেন্টার ফর অ্যাকোয়াকালচার (RGCA) এর সেন্ট্রাল অ্যাকোয়াকালচার প্যাথলজি ল্যাবরেটরিতে (CAPL) পাঠানো হয়েছিল। হিস্টোলজি ল্যাবরেটরি, সিরকালি, মায়িলাদুথুরাই। জেলা, তামিলনাড়ু, ভারত আরও বিশ্লেষণের জন্য নমুনাগুলি তাৎক্ষণিকভাবে ৪% প্যারাফর্মালডিহাইডে ৩৭°C তাপমাত্রায় ৪৮ ঘন্টার জন্য স্থির করা হয়েছিল।
স্থিরকরণ পর্বের পর, উপাদানটি 0.1 M সোডিয়াম ফসফেট বাফার (pH 7.4) দিয়ে তিনবার ধৌত করা হয়, ধাপে ধাপে ইথানলে ডিহাইড্রেট করা হয় এবং LEICA রজনে 7 দিন ভিজিয়ে রাখা হয়। এরপর পদার্থটি রজন এবং পলিমারাইজার দিয়ে ভরা একটি প্লাস্টিকের ছাঁচে রাখা হয় এবং তারপর 37°C তাপমাত্রায় উত্তপ্ত একটি চুলায় রাখা হয় যতক্ষণ না পদার্থটি ধারণকারী ব্লকটি সম্পূর্ণরূপে পলিমারাইজ করা হয়।
পলিমারাইজেশনের পর, ব্লকগুলি LEICA RM2235 মাইক্রোটোম (র‍্যাঙ্কিন বায়োমেডিকেল কর্পোরেশন 10,399 এন্টারপ্রাইজ ডক্টর ডেভিসবার্গ, MI 48,350, USA) ব্যবহার করে 3 মিমি পুরুত্বে কাটা হয়েছিল। অংশগুলিকে স্লাইডে গোষ্ঠীবদ্ধ করা হয়েছিল, প্রতিটি স্লাইডে ছয়টি অংশ ছিল। স্লাইডগুলি ঘরের তাপমাত্রায় শুকানো হয়েছিল, তারপর 7 মিনিটের জন্য হেমাটোক্সিলিন দিয়ে দাগ দেওয়া হয়েছিল এবং 4 মিনিটের জন্য প্রবাহিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলা হয়েছিল। এছাড়াও, 5 মিনিটের জন্য ত্বকে ইওসিন দ্রবণ প্রয়োগ করুন এবং 5 মিনিটের জন্য প্রবাহিত জল দিয়ে ধুয়ে ফেলুন।
বিভিন্ন গ্রীষ্মমন্ডলীয় স্তরের জলজ জীব ব্যবহার করে তীব্র বিষাক্ততার পূর্বাভাস দেওয়া হয়েছিল: ৯৬-ঘন্টা মাছ LC50, ৪৮-ঘন্টা D. magna LC50, এবং ৯৬-ঘন্টা সবুজ শৈবাল EC50। মার্কিন পরিবেশ সুরক্ষা সংস্থা কর্তৃক তৈরি উইন্ডোজের জন্য ECOSAR সফ্টওয়্যার সংস্করণ 2.2 ব্যবহার করে মাছ এবং সবুজ শৈবালের প্রতি র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের বিষাক্ততা মূল্যায়ন করা হয়েছিল। (https://www.epa.gov/tsca-screening-tools/ecological-struct-activity-relationships-ecosar-predictive-model-এ অনলাইনে উপলব্ধ)।
লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টিটারমাইট কার্যকলাপের জন্য সমস্ত পরীক্ষা তিনটি প্রতিলিপিতে করা হয়েছিল। লার্ভা এবং উইপোকার মৃত্যুর তথ্যের নন-লিনিয়ার রিগ্রেশন (ডোজ রেসপন্স ভেরিয়েবলের লগ) 95% আত্মবিশ্বাস ব্যবধানের সাথে মধ্যম প্রাণঘাতী ঘনত্ব (LC50) গণনা করার জন্য সঞ্চালিত হয়েছিল এবং প্রিজম® (সংস্করণ 8.0, গ্রাফপ্যাড সফটওয়্যার) ইনকর্পোরেটেড, মার্কিন যুক্তরাষ্ট্র) 84, 91 ব্যবহার করে ঘনত্ব প্রতিক্রিয়া বক্ররেখা তৈরি করা হয়েছিল।
বর্তমান গবেষণায় মশার লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টিটারমাইট এজেন্ট হিসেবে এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি এসজে২ দ্বারা উৎপাদিত মাইক্রোবিয়াল বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের সম্ভাব্যতা প্রকাশ পেয়েছে এবং এই কাজটি লার্ভিসাইডাল এবং অ্যান্টিটারমাইট ক্রিয়ার প্রক্রিয়া সম্পর্কে আরও ভালভাবে বুঝতে অবদান রাখবে। বায়োসারফ্যাক্ট্যান্ট দিয়ে চিকিৎসা করা লার্ভার হিস্টোলজিক্যাল গবেষণায় দেখা গেছে যে পাচনতন্ত্র, মধ্যগঠন, সেরিব্রাল কর্টেক্স এবং অন্ত্রের এপিথেলিয়াল কোষের হাইপারপ্লাসিয়ার ক্ষতি হয়েছে। ফলাফল: এন্টারোব্যাক্টর ক্লোয়েসি এসজে২ দ্বারা উৎপাদিত র‍্যামনোলিপিড বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের অ্যান্টিটারমাইট এবং লার্ভিসাইডাল কার্যকলাপের বিষাক্ত মূল্যায়ন থেকে জানা গেছে যে এই আইসোলেটটি মশার ভেক্টর-বাহিত রোগ (Cx quinquefasciatus) এবং উইপোকা (O. obesus) নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি সম্ভাব্য জৈব কীটনাশক। বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের অন্তর্নিহিত পরিবেশগত বিষাক্ততা এবং তাদের সম্ভাব্য পরিবেশগত প্রভাব বোঝার প্রয়োজন। এই গবেষণাটি বায়োসারফ্যাক্ট্যান্টের পরিবেশগত ঝুঁকি মূল্যায়নের জন্য একটি বৈজ্ঞানিক ভিত্তি প্রদান করে।