সিডিসি বোতল বায়োঅ্যাসে ব্যবহার করে সাইপারমেথ্রিনের প্রতি ভারতে ভিসারাল লেইশম্যানিয়াসিসের বাহক ফ্লেবোটোমাস আর্জেন্টিপসের সংবেদনশীলতা পর্যবেক্ষণ করা | কীটপতঙ্গ এবং বাহক

ভারতীয় উপমহাদেশে কালা-আজার নামে পরিচিত ভিসারাল লেইশম্যানিয়াসিস (ভিএল) হল ফ্ল্যাজেলেটেড প্রোটোজোয়ান লেইশম্যানিয়া দ্বারা সৃষ্ট একটি পরজীবী রোগ যা দ্রুত চিকিৎসা না করা হলে মারাত্মক হতে পারে। দক্ষিণ-পূর্ব এশিয়ায় স্যান্ডফ্লাই ফ্লেবোটোমাস আর্জেন্টিপস হল ভিএল-এর একমাত্র নিশ্চিত বাহক, যেখানে এটি একটি সিন্থেটিক কীটনাশক ইনডোর রেসিডিউল স্প্রে (IRS) দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়। ভিএল নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচিতে ডিডিটি ব্যবহারের ফলে বালিমাছিদের মধ্যে প্রতিরোধ ক্ষমতা তৈরি হয়েছে, তাই ডিডিটি কীটনাশক আলফা-সাইপারমেথ্রিন দ্বারা প্রতিস্থাপিত হয়েছে। তবে, আলফা-সাইপারমেথ্রিন ডিডিটির মতোই কাজ করে, তাই এই কীটনাশকের বারবার সংস্পর্শে আসার ফলে চাপের মধ্যে বালিমাছিদের মধ্যে প্রতিরোধের ঝুঁকি বৃদ্ধি পায়। এই গবেষণায়, আমরা সিডিসি বোতল বায়োঅ্যাসে ব্যবহার করে বন্য মশা এবং তাদের F1 বংশধরদের সংবেদনশীলতা মূল্যায়ন করেছি।
আমরা ভারতের বিহারের মুজাফফরপুর জেলার ১০টি গ্রাম থেকে মশা সংগ্রহ করেছি। আটটি গ্রাম উচ্চ-ক্ষমতা ব্যবহার অব্যাহত রেখেছেসাইপারমেথ্রিনঘরের ভেতরে স্প্রে করার জন্য, একটি গ্রাম ঘরের ভেতরে স্প্রে করার জন্য উচ্চ-ক্ষমতা সম্পন্ন সাইপারমেথ্রিন ব্যবহার বন্ধ করে দিয়েছে, এবং একটি গ্রাম কখনও ঘরের ভেতরে স্প্রে করার জন্য উচ্চ-ক্ষমতা সম্পন্ন সাইপারমেথ্রিন ব্যবহার করেনি। সংগৃহীত মশাগুলিকে একটি নির্দিষ্ট সময়ের জন্য পূর্ব-নির্ধারিত ডায়াগনস্টিক ডোজ (৪০ মিনিটের জন্য ৩ μg/ml) দেওয়া হয়েছিল, এবং সংস্পর্শের ২৪ ঘন্টা পরে নকডাউন হার এবং মৃত্যুর হার রেকর্ড করা হয়েছিল।
বন্য মশার মৃত্যুর হার ছিল ৯১.১৯% থেকে ৯৯.৪৭%, এবং তাদের F1 প্রজন্মের মৃত্যুর হার ছিল ৯১.৭০% থেকে ৯৮.৮৯%। সংস্পর্শে আসার চব্বিশ ঘন্টা পরে, বন্য মশার মৃত্যুর হার ছিল ৮৯.৩৪% থেকে ৯৮.৯৩%, এবং তাদের F1 প্রজন্মের মৃত্যুর হার ছিল ৯০.১৬% থেকে ৯৮.৩৩%।
এই গবেষণার ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে পি. আর্জেন্টিপেসে প্রতিরোধ গড়ে উঠতে পারে, যা নির্মূল অর্জনের পরে নিয়ন্ত্রণ বজায় রাখার জন্য অব্যাহত পর্যবেক্ষণ এবং সতর্কতার প্রয়োজনীয়তা নির্দেশ করে।
ভারতীয় উপমহাদেশে কালা-আজার নামে পরিচিত ভিসারাল লেইশম্যানিয়াসিস (ভিএল) হল একটি পরজীবী রোগ যা ফ্ল্যাজেলেটেড প্রোটোজোয়ান লেইশম্যানিয়া দ্বারা সৃষ্ট এবং সংক্রামিত স্ত্রী বালির মাছি (ডিপ্টেরা: মাইর্মেকোফাগা) এর কামড়ের মাধ্যমে সংক্রামিত হয়। দক্ষিণ-পূর্ব এশিয়ায় বালির মাছিই ভিএলের একমাত্র নিশ্চিত বাহক। ভারত ভিএল নির্মূলের লক্ষ্য অর্জনের কাছাকাছি। তবে, নির্মূলের পরে কম ঘটনা হার বজায় রাখার জন্য, সম্ভাব্য সংক্রমণ রোধ করার জন্য ভেক্টর জনসংখ্যা হ্রাস করা অত্যন্ত গুরুত্বপূর্ণ।
দক্ষিণ-পূর্ব এশিয়ায় মশা নিয়ন্ত্রণ সিন্থেটিক কীটনাশক ব্যবহার করে অভ্যন্তরীণ অবশিষ্টাংশ স্প্রে (IRS) এর মাধ্যমে সম্পন্ন করা হয়। সিলভারলেগের গোপন বিশ্রামের আচরণ এটিকে অভ্যন্তরীণ অবশিষ্টাংশ স্প্রে [1] এর মাধ্যমে কীটনাশক নিয়ন্ত্রণের জন্য একটি উপযুক্ত লক্ষ্য করে তোলে। ভারতে জাতীয় ম্যালেরিয়া নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচির অধীনে ডাইক্লোরোডাইফেনাইলট্রাইক্লোরোইথেন (DDT) এর অভ্যন্তরীণ অবশিষ্টাংশ স্প্রে মশার সংখ্যা নিয়ন্ত্রণে এবং VL কেস উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস করার ক্ষেত্রে উল্লেখযোগ্য প্রভাব ফেলেছে [2]। VL এর এই অপরিকল্পিত নিয়ন্ত্রণ ভারতীয় VL নির্মূল কর্মসূচিকে সিলভারলেগ নিয়ন্ত্রণের প্রাথমিক পদ্ধতি হিসাবে অভ্যন্তরীণ অবশিষ্টাংশ স্প্রে গ্রহণ করতে প্ররোচিত করেছিল। 2005 সালে, ভারত, বাংলাদেশ এবং নেপাল সরকার 2015 সালের মধ্যে VL নির্মূল করার লক্ষ্যে একটি সমঝোতা স্মারক স্বাক্ষর করে [3]। ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ এবং মানুষের ক্ষেত্রে দ্রুত রোগ নির্ণয় এবং চিকিৎসার সমন্বয়ে নির্মূল প্রচেষ্টার লক্ষ্য ছিল 2015 সালের মধ্যে একত্রীকরণ পর্যায়ে প্রবেশ করা, যা পরবর্তীতে 2017 এবং তারপর 2020 সালে সংশোধিত হয়। [4] অবহেলিত গ্রীষ্মমন্ডলীয় রোগ নির্মূল করার নতুন বিশ্বব্যাপী রোডম্যাপে 2030 সালের মধ্যে VL নির্মূল অন্তর্ভুক্ত রয়েছে। [5]
ভারত যখন BCVD-এর নির্মূল-পরবর্তী পর্যায়ে প্রবেশ করছে, তখন বিটা-সাইপারমেথ্রিনের বিরুদ্ধে উল্লেখযোগ্য প্রতিরোধ গড়ে না ওঠা নিশ্চিত করা অত্যন্ত জরুরি। প্রতিরোধের কারণ হল DDT এবং সাইপারমেথ্রিন উভয়েরই কর্মের একই প্রক্রিয়া রয়েছে, অর্থাৎ, তারা VGSC প্রোটিনকে লক্ষ্য করে [21]। সুতরাং, অত্যন্ত শক্তিশালী সাইপারমেথ্রিনের নিয়মিত সংস্পর্শে আসার ফলে সৃষ্ট চাপের কারণে বালিমাছির মধ্যে প্রতিরোধ বিকাশের ঝুঁকি বাড়তে পারে। তাই এই কীটনাশকের প্রতি প্রতিরোধী সম্ভাব্য বালিমাছির সংখ্যা পর্যবেক্ষণ এবং সনাক্ত করা অপরিহার্য। এই প্রেক্ষাপটে, এই গবেষণার উদ্দেশ্য ছিল চৌবে এবং অন্যান্যদের দ্বারা নির্ধারিত ডায়াগনস্টিক ডোজ এবং এক্সপোজার সময়কাল ব্যবহার করে বন্য বালিমাছির সংবেদনশীলতা অবস্থা পর্যবেক্ষণ করা। [20] ভারতের বিহারের মুজাফফরপুর জেলার বিভিন্ন গ্রাম থেকে পি. আর্জেন্টিপস অধ্যয়ন করেছেন, যারা ক্রমাগত সাইপারমেথ্রিন (ক্রমাগত IPS গ্রাম) দিয়ে চিকিত্সা করা অভ্যন্তরীণ স্প্রে সিস্টেম ব্যবহার করে। যেসব গ্রাম সাইপারমেথ্রিন-চিকিৎসা করা অভ্যন্তরীণ স্প্রে সিস্টেম ব্যবহার বন্ধ করে দিয়েছে (পূর্বে আইপিএস গ্রাম) এবং যারা কখনও সাইপারমেথ্রিন-চিকিৎসা করা অভ্যন্তরীণ স্প্রে সিস্টেম ব্যবহার করেনি (আইপিএস নয় এমন গ্রাম) সেখানকার বন্য পি. আর্জেন্টিপসের সংবেদনশীলতার অবস্থা সিডিসি বোতল জৈব পরীক্ষা ব্যবহার করে তুলনা করা হয়েছিল।
গবেষণার জন্য দশটি গ্রাম নির্বাচন করা হয়েছিল (চিত্র ১; সারণি ১), যার মধ্যে আটটিতে সিন্থেটিক পাইরেথ্রয়েড (হাইপারমেথ্রিন; ক্রমাগত হাইপারমেথ্রিন গ্রাম হিসাবে মনোনীত) এর ক্রমাগত অভ্যন্তরীণ স্প্রে করার ইতিহাস ছিল এবং গত ৩ বছরে ভিএল কেস (কমপক্ষে একটি কেস) ছিল। গবেষণায় বাকি দুটি গ্রামের মধ্যে, একটি গ্রাম যা বিটা-সাইপারমেথ্রিন (অ-ইনডোর স্প্রে করার গ্রাম) এর অভ্যন্তরীণ স্প্রে প্রয়োগ করেনি তাকে নিয়ন্ত্রণ গ্রাম হিসাবে এবং অন্য গ্রাম যেখানে বিটা-সাইপারমেথ্রিনের (অন্তরঙ্গন অভ্যন্তরীণ স্প্রে করার গ্রাম/পূর্বে অভ্যন্তরীণ স্প্রে করার গ্রাম) এর অভ্যন্তরীণ স্প্রে করা হয়েছিল তাকে নিয়ন্ত্রণ গ্রাম হিসাবে নির্বাচিত করা হয়েছিল। এই গ্রামগুলির নির্বাচন স্বাস্থ্য বিভাগ এবং অভ্যন্তরীণ স্প্রেিং টিমের সাথে সমন্বয় এবং মুজাফফরপুর জেলায় অভ্যন্তরীণ স্প্রেিং মাইক্রো অ্যাকশন প্ল্যানের বৈধতার উপর ভিত্তি করে করা হয়েছিল।
মুজাফফরপুর জেলার ভৌগোলিক মানচিত্রে গবেষণায় অন্তর্ভুক্ত গ্রামগুলির অবস্থান দেখানো হয়েছে (১-১০)। অধ্যয়নের অবস্থান: ১, মণিফুলকাহা; ২, রামদাস মাজৌলি; ৩, মধুবনী; ৪, আনন্দপুর হারুনী; ৫, পান্ডে; ৬, হিরাপুর; ৭, মাধোপুর হাজারী; ৮, হামিদপুর; ৯, নুনফারা; ১০, সিমারা। মানচিত্রটি QGIS সফ্টওয়্যার (সংস্করণ ৩.৩০.৩) এবং ওপেন অ্যাসেসমেন্ট শেপফাইল ব্যবহার করে প্রস্তুত করা হয়েছে।
এক্সপোজার পরীক্ষার জন্য বোতলগুলি চৌবে এবং ডেনলিঙ্গার উভয়ের পদ্ধতি অনুসারে প্রস্তুত করা হয়েছিল। [20] এবং ডেনলিঙ্গার এবং অন্যান্যদের [22]। সংক্ষেপে, পরীক্ষার একদিন আগে 500 মিলি কাচের বোতল প্রস্তুত করা হয়েছিল এবং বোতলগুলির ভিতরের দেয়ালে নির্দেশিত কীটনাশক (α-সাইপারমেথ্রিনের ডায়াগনস্টিক ডোজ ছিল 3 μg/mL) দিয়ে লেপা হয়েছিল, বোতলগুলির নীচে, দেয়াল এবং ঢাকনায় কীটনাশকের অ্যাসিটোন দ্রবণ (2.0 মিলি) প্রয়োগ করে। প্রতিটি বোতলকে 30 মিনিটের জন্য একটি যান্ত্রিক রোলারে শুকানো হয়েছিল। এই সময়ের মধ্যে, ধীরে ধীরে ঢাকনাটি খুলে ফেলুন যাতে অ্যাসিটোন বাষ্পীভূত হয়। 30 মিনিট শুকানোর পরে, ঢাকনাটি সরিয়ে বোতলটি ঘোরান যতক্ষণ না সমস্ত অ্যাসিটোন বাষ্পীভূত হয়। তারপর বোতলগুলি রাতারাতি শুকানোর জন্য খোলা রেখে দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি প্রতিলিপি পরীক্ষার জন্য, নিয়ন্ত্রণ হিসাবে ব্যবহৃত একটি বোতল 2.0 মিলি অ্যাসিটোন দিয়ে লেপা হয়েছিল। ডেনলিঙ্গার এবং অন্যান্যদের বর্ণিত পদ্ধতি অনুসারে যথাযথ পরিষ্কারের পরে সমস্ত বোতল পরীক্ষা জুড়ে পুনরায় ব্যবহার করা হয়েছিল। এবং বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা [22, 23]।
কীটনাশক তৈরির পরের দিন, ৩০-৪০টি বন্য-ধরা মশা (ক্ষুধার্ত স্ত্রী) খাঁচা থেকে শিশিতে করে বের করে প্রতিটি শিশিতে আলতো করে ফুঁ দিয়ে ঢেলে দেওয়া হয়েছিল। প্রতিটি কীটনাশক-প্রলেপযুক্ত বোতলের জন্য, নিয়ন্ত্রণ সহ প্রায় একই সংখ্যক মাছি ব্যবহার করা হয়েছিল। প্রতিটি গ্রামে কমপক্ষে পাঁচ থেকে ছয় বার এটি পুনরাবৃত্তি করুন। কীটনাশকের সংস্পর্শে আসার ৪০ মিনিট পর, কতগুলি মাছি মারা গেছে তা রেকর্ড করা হয়েছিল। সমস্ত মাছি একটি যান্ত্রিক অ্যাসপিরেটর দিয়ে ধরা হয়েছিল, সূক্ষ্ম জাল দিয়ে আবৃত পিন্ট কার্ডবোর্ডের পাত্রে রাখা হয়েছিল এবং একই আর্দ্রতা এবং তাপমাত্রার পরিস্থিতিতে একই খাদ্য উৎস (৩০% চিনির দ্রবণে ভিজিয়ে রাখা তুলোর বল) দিয়ে একটি পৃথক ইনকিউবেটরে রাখা হয়েছিল। কীটনাশকের সংস্পর্শে আসার ২৪ ঘন্টা পরে মৃত্যুহার রেকর্ড করা হয়েছিল। প্রজাতির পরিচয় নিশ্চিত করার জন্য সমস্ত মশা কেটে পরীক্ষা করা হয়েছিল। F1 বংশধর মাছিদের ক্ষেত্রেও একই পদ্ধতি সম্পাদন করা হয়েছিল। সংস্পর্শের ২৪ ঘন্টা পরে নকডাউন এবং মৃত্যুর হার রেকর্ড করা হয়েছিল। যদি নিয়ন্ত্রণ বোতলে মৃত্যুহার ৫% এর কম হয়, তাহলে প্রতিলিপিগুলিতে কোনও মৃত্যুহার সংশোধন করা হয়নি। যদি নিয়ন্ত্রণ বোতলে মৃত্যুহার ≥ 5% এবং ≤ 20% হয়, তাহলে অ্যাবটের সূত্র ব্যবহার করে সেই প্রতিলিপির পরীক্ষার বোতলে মৃত্যুহার সংশোধন করা হয়েছিল। যদি নিয়ন্ত্রণ গ্রুপে মৃত্যুহার 20% ছাড়িয়ে যায়, তাহলে সম্পূর্ণ পরীক্ষা গ্রুপটি বাতিল করা হয়েছিল [24, 25, 26]।
বন্য-ধরা পি. আর্জেন্টিপস মশার গড় মৃত্যুহার। ত্রুটি বারগুলি গড়ের মানক ত্রুটিগুলি উপস্থাপন করে। গ্রাফের সাথে দুটি লাল অনুভূমিক রেখার ছেদ (যথাক্রমে 90% এবং 98% মৃত্যুহার) মৃত্যুহারের উইন্ডো নির্দেশ করে যেখানে প্রতিরোধ গড়ে উঠতে পারে। [25]
বন্য-ধরা P. argentipes-এর F1 বংশধরের গড় মৃত্যুহার। ত্রুটি বারগুলি গড়ের মানক ত্রুটিগুলি উপস্থাপন করে। দুটি লাল অনুভূমিক রেখা (যথাক্রমে 90% এবং 98% মৃত্যুহার) দ্বারা ছেদ করা বক্ররেখা মৃত্যুর পরিসরকে প্রতিনিধিত্ব করে যার উপর প্রতিরোধ গড়ে উঠতে পারে [25]।
নিয়ন্ত্রণ/আইআরএস-বহির্ভূত গ্রামের (মণিফুলকাহা) মশা কীটনাশকের প্রতি অত্যন্ত সংবেদনশীল বলে প্রমাণিত হয়েছে। ছিটকে পড়ার এবং সংস্পর্শে আসার ২৪ ঘন্টা পরে বন্য-ধরা মশার গড় মৃত্যুহার (±SE) যথাক্রমে ৯৯.৪৭ ± ০.৫২% এবং ৯৮.৯৩ ± ০.৬৫% এবং F1 বংশধরদের গড় মৃত্যুহার যথাক্রমে ৯৮.৮৯ ± ১.১১% এবং ৯৮.৩৩ ± ১.১১% ছিল (সারণী ২, ৩)।
এই গবেষণার ফলাফল থেকে জানা যায় যে, যেসব গ্রামে পাইরেথ্রয়েড (SP) α-সাইপারমেথ্রিন নিয়মিতভাবে ব্যবহৃত হয়, সেখানে রূপালী-পায়যুক্ত বালির মাছি কৃত্রিম পাইরেথ্রয়েড (SP) α-সাইপারমেথ্রিনের বিরুদ্ধে প্রতিরোধ গড়ে তুলতে পারে। বিপরীতে, IRS/নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচির আওতায় নেই এমন গ্রাম থেকে সংগৃহীত রূপালী-পায়যুক্ত বালির মাছি অত্যন্ত সংবেদনশীল বলে প্রমাণিত হয়েছে। ব্যবহৃত কীটনাশকের কার্যকারিতা পর্যবেক্ষণের জন্য বন্য বালির মাছিদের সংখ্যার সংবেদনশীলতা পর্যবেক্ষণ করা গুরুত্বপূর্ণ, কারণ এই তথ্য কীটনাশক প্রতিরোধ ব্যবস্থা পরিচালনা করতে সাহায্য করতে পারে। এই কীটনাশক ব্যবহার করে IRS-এর ঐতিহাসিক নির্বাচন চাপের কারণে বিহারের স্থানীয় অঞ্চল থেকে বালির মাছিগুলিতে DDT প্রতিরোধের উচ্চ মাত্রা নিয়মিতভাবে রিপোর্ট করা হয়েছে [1]।
আমরা পাইরেথ্রয়েডের প্রতি P. argentipes-কে অত্যন্ত সংবেদনশীল বলে মনে করেছি, এবং ভারত, বাংলাদেশ এবং নেপালে মাঠ পরীক্ষণে দেখা গেছে যে সাইপারমেথ্রিন বা ডেল্টামেথ্রিনের সাথে ব্যবহার করলে IRS-এর উচ্চ কীটতাত্ত্বিক কার্যকারিতা ছিল [19, 26, 27, 28, 29]। সম্প্রতি, রয় এবং অন্যান্যরা [18] রিপোর্ট করেছেন যে নেপালে P. argentipes পাইরেথ্রয়েডের বিরুদ্ধে প্রতিরোধ গড়ে তুলেছে। আমাদের ক্ষেত্রের সংবেদনশীলতা গবেষণায় দেখা গেছে যে IRS-এর সংস্পর্শে না আসা গ্রামগুলি থেকে সংগ্রহ করা রূপালী পায়ের বালির মাছিগুলি অত্যন্ত সংবেদনশীল ছিল, তবে বিরতিহীন/প্রাক্তন IRS এবং ক্রমাগত IRS গ্রামগুলি থেকে সংগ্রহ করা মাছিগুলি (আনন্দপুর-হারুনি থেকে আসা বালির মাছি ছাড়া মৃত্যুহার 90% থেকে 97% পর্যন্ত ছিল, যার 24 ঘন্টা পরে এক্সপোজারে 89.34% মৃত্যুহার ছিল) অত্যন্ত কার্যকর সাইপারমেথ্রিনের প্রতি প্রতিরোধী ছিল [25]। এই প্রতিরোধের বিকাশের একটি সম্ভাব্য কারণ হল অভ্যন্তরীণ রুটিন স্প্রে (IRS) এবং কেস-ভিত্তিক স্থানীয় স্প্রে প্রোগ্রামের চাপ, যা স্থানীয় এলাকা/ব্লক/গ্রামে কালাজ্বরের প্রাদুর্ভাব পরিচালনার জন্য আদর্শ পদ্ধতি (প্রাদুর্ভাব তদন্ত এবং ব্যবস্থাপনার জন্য স্ট্যান্ডার্ড অপারেটিং পদ্ধতি [30])। এই গবেষণার ফলাফল অত্যন্ত কার্যকর সাইপারমেথ্রিনের বিরুদ্ধে নির্বাচনী চাপের বিকাশের প্রাথমিক ইঙ্গিত প্রদান করে। দুর্ভাগ্যবশত, সিডিসি বোতল জৈব-পরীক্ষা ব্যবহার করে প্রাপ্ত এই অঞ্চলের জন্য ঐতিহাসিক সংবেদনশীলতা তথ্য তুলনার জন্য উপলব্ধ নয়; পূর্ববর্তী সমস্ত গবেষণায় WHO কীটনাশক-সংক্রামিত কাগজ ব্যবহার করে P. argentipes সংবেদনশীলতা পর্যবেক্ষণ করা হয়েছে। WHO পরীক্ষার স্ট্রিপে কীটনাশকের ডায়াগনস্টিক ডোজ হল ম্যালেরিয়া বাহক (অ্যানোফিলিস গাম্বিয়া) এর বিরুদ্ধে ব্যবহারের জন্য কীটনাশকের প্রস্তাবিত সনাক্তকরণ ঘনত্ব, এবং বালি-মাছির উপর এই ঘনত্বের কার্যকরী প্রযোজ্যতা স্পষ্ট নয় কারণ বালি-মাছি মশার তুলনায় কম ঘন ঘন উড়ে বেড়ায় এবং বায়ো-পরীক্ষায় সাবস্ট্রেটের সংস্পর্শে বেশি সময় ব্যয় করে [23]।
১৯৯২ সাল থেকে নেপালের ভিএল স্থানীয় অঞ্চলে সিন্থেটিক পাইরেথ্রয়েড ব্যবহার করা হচ্ছে, বালির মাছি নিয়ন্ত্রণের জন্য এসপি আলফা-সাইপারমেথ্রিন এবং ল্যাম্বডা-সাইহালোথ্রিনের সাথে পর্যায়ক্রমে ব্যবহার করা হচ্ছে [31], এবং ডেল্টামেথ্রিনও বাংলাদেশে ২০১২ সাল থেকে ব্যবহার করা হচ্ছে [32]। যেসব অঞ্চলে দীর্ঘদিন ধরে সিন্থেটিক পাইরেথ্রয়েড ব্যবহার করা হচ্ছে সেখানে সিলভারলেগড স্যান্ডফ্লাইয়ের বন্য জনগোষ্ঠীতে ফেনোটাইপিক প্রতিরোধ ক্ষমতা সনাক্ত করা হয়েছে [18, 33, 34]। ভারতীয় স্যান্ডফ্লাইয়ের বন্য জনগোষ্ঠীতে একটি অ-সমার্থক মিউটেশন (L1014F) সনাক্ত করা হয়েছে এবং এটি ডিডিটি প্রতিরোধের সাথে যুক্ত, যা ইঙ্গিত দেয় যে পাইরেথ্রয়েড প্রতিরোধ আণবিক স্তরে দেখা দেয়, কারণ ডিডিটি এবং পাইরেথ্রয়েড (আলফা-সাইপারমেথ্রিন) উভয়ই পোকামাকড়ের স্নায়ুতন্ত্রের একই জিনকে লক্ষ্য করে [17, 34]। অতএব, নির্মূল এবং নির্মূল পরবর্তী সময়ে সাইপারমেথ্রিনের সংবেদনশীলতার পদ্ধতিগত মূল্যায়ন এবং মশার প্রতিরোধের পর্যবেক্ষণ অপরিহার্য।
এই গবেষণার একটি সম্ভাব্য সীমাবদ্ধতা হল আমরা সংবেদনশীলতা পরিমাপের জন্য CDC ভায়াল বায়োঅ্যাসে ব্যবহার করেছি, কিন্তু সমস্ত তুলনা WHO বায়োঅ্যাসে কিট ব্যবহার করে পূর্ববর্তী গবেষণার ফলাফল ব্যবহার করেছে। দুটি বায়োঅ্যাসে থেকে প্রাপ্ত ফলাফল সরাসরি তুলনাযোগ্য নাও হতে পারে কারণ CDC ভায়াল বায়োঅ্যাসে ডায়াগনস্টিক পিরিয়ডের শেষে নকডাউন পরিমাপ করে, যেখানে WHO কিট বায়োঅ্যাসে 24 বা 72 ঘন্টা পরে এক্সপোজারের পরে মৃত্যুহার পরিমাপ করে (ধীর-কার্যকর যৌগের জন্য পরবর্তী) [35]। আরেকটি সম্ভাব্য সীমাবদ্ধতা হল এই গবেষণায় একটি নন-IRS এবং একটি নন-IRS/প্রাক্তন IRS গ্রামের তুলনায় IRS গ্রামের সংখ্যা। আমরা ধরে নিতে পারি না যে একটি জেলার পৃথক গ্রামে পরিলক্ষিত মশার ভেক্টর সংবেদনশীলতার মাত্রা বিহারের অন্যান্য গ্রাম এবং জেলায় সংবেদনশীলতার স্তরের প্রতিনিধিত্ব করে। ভারত যখন লিউকেমিয়া ভাইরাস নির্মূলের পরবর্তী পর্যায়ে প্রবেশ করছে, তখন প্রতিরোধের উল্লেখযোগ্য বিকাশ রোধ করা অপরিহার্য। বিভিন্ন জেলা, ব্লক এবং ভৌগোলিক অঞ্চল থেকে বালিমাছির জনসংখ্যার প্রতিরোধের দ্রুত পর্যবেক্ষণ প্রয়োজন। এই গবেষণায় উপস্থাপিত তথ্য প্রাথমিক এবং বিশ্ব স্বাস্থ্য সংস্থা [35] দ্বারা প্রকাশিত শনাক্তকরণ ঘনত্বের সাথে তুলনা করে যাচাই করা উচিত যাতে এই অঞ্চলগুলিতে P. argentipes-এর সংবেদনশীলতার অবস্থা সম্পর্কে আরও সুনির্দিষ্ট ধারণা পাওয়া যায়, কম স্যান্ডফ্লাই জনসংখ্যা বজায় রাখার জন্য এবং লিউকেমিয়া ভাইরাস নির্মূলে সহায়তা করার জন্য ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ কর্মসূচি পরিবর্তন করার আগে।
লিউকোসিস ভাইরাসের বাহক, পি. আরজেন্টিপস মশা, অত্যন্ত কার্যকর সাইপারমেথ্রিনের বিরুদ্ধে প্রতিরোধের প্রাথমিক লক্ষণ দেখাতে শুরু করতে পারে। ভেক্টর নিয়ন্ত্রণ হস্তক্ষেপের মহামারী সংক্রান্ত প্রভাব বজায় রাখার জন্য পি. আরজেন্টিপসের বন্য জনগোষ্ঠীতে কীটনাশক প্রতিরোধের নিয়মিত পর্যবেক্ষণ করা প্রয়োজন। কীটনাশক প্রতিরোধ পরিচালনা এবং ভারতে লিউকোসিস ভাইরাস নির্মূলে সহায়তা করার জন্য বিভিন্ন ধরণের কর্মপদ্ধতি এবং/অথবা নতুন কীটনাশকের মূল্যায়ন এবং নিবন্ধন সহ কীটনাশকগুলির আবর্তন প্রয়োজনীয় এবং সুপারিশ করা হয়।