DELLA প্রোটিন সংরক্ষণ করা হয়বৃদ্ধি নিয়ন্ত্রকযা অভ্যন্তরীণ এবং বাহ্যিক সংকেতের প্রতিক্রিয়ায় উদ্ভিদ বিকাশে কেন্দ্রীয় ভূমিকা পালন করে। ট্রান্সক্রিপশনাল নিয়ন্ত্রক হিসাবে, DELLA তাদের GRAS ডোমেনের মাধ্যমে ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর (TFs) এবং হিস্টোন H2A এর সাথে আবদ্ধ হয় এবং প্রবর্তকদের উপর কাজ করার জন্য নিয়োগ করা হয়। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে DELLA স্থিতিশীলতা অনুবাদ-পরবর্তীভাবে দুটি প্রক্রিয়া দ্বারা নিয়ন্ত্রিত হয়: উদ্ভিদ হরমোন দ্বারা প্ররোচিত পলিউবিকুইটিনেশনজিব্বেরেলিন, যা তাদের দ্রুত অবক্ষয়ের দিকে পরিচালিত করে এবং ছোট ইউবিকুইটিন-সদৃশ সংশোধক (SUMO) এর সাথে সংযোজন করে, যা তাদের সঞ্চয় বৃদ্ধি করে। তাছাড়া, DELLA কার্যকলাপ দুটি স্বতন্ত্র গ্লাইকোসিলেশন প্রক্রিয়া দ্বারা গতিশীলভাবে নিয়ন্ত্রিত হয়: O-fucosylation DELLA-TF মিথস্ক্রিয়া বৃদ্ধি করে, যেখানে O-লিঙ্কড N-acetylglucosamine (O-GlcNAc) পরিবর্তন DELLA-TF মিথস্ক্রিয়াকে বাধা দেয়। যাইহোক, DELLA ফসফোরাইলেশনের ভূমিকা অস্পষ্ট কারণ পূর্ববর্তী গবেষণায় পরস্পরবিরোধী ফলাফল দেখানো হয়েছে, কিছু পরামর্শ দিয়েছে যে ফসফোরাইলেশন DELLA অবক্ষয়কে উৎসাহিত করে বা দমন করে এবং অন্যরা পরামর্শ দিয়েছে যে ফসফোরাইলেশন তাদের স্থায়িত্বকে প্রভাবিত করে না। এখানে, আমরা GA1-3 রিপ্রেসার (RGA), AtDELLA-তে ফসফোরাইলেশন সাইটগুলি সনাক্ত করি, যা ভর স্পেকট্রোমেট্রি দ্বারা অ্যারাবিডোপসিস থালিয়ানা থেকে বিশুদ্ধ করা হয় এবং দেখাই যে PolyS এবং PolyS/T অঞ্চলে দুটি RGA পেপটাইডের ফসফোরাইলেশন লক্ষ্য প্রবর্তকদের সাথে H2A বাঁধাই এবং RGA সংযোগ প্রচার করে RGA কার্যকলাপ বৃদ্ধি করে। উল্লেখযোগ্যভাবে, ফসফোরাইলেশন RGA-TF মিথস্ক্রিয়া বা RGA স্থিতিশীলতাকে প্রভাবিত করেনি। আমাদের গবেষণায় একটি আণবিক প্রক্রিয়া প্রকাশ পেয়েছে যার মাধ্যমে ফসফোরাইলেশন DELLA কার্যকলাপকে প্ররোচিত করে।
আমাদের ভর স্পেকট্রোমেট্রিক বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে GA-ঘাটতিপূর্ণ Ga1 পটভূমিতে RGA-তে Pep1 এবং Pep2 উভয়ই অত্যন্ত ফসফোরাইলেটেড ছিল। এই গবেষণার পাশাপাশি, ফসফোপ্রোটিওমিক গবেষণায় RGA-তে Pep1 ফসফোরাইলেশনও প্রকাশ পেয়েছে, যদিও এর ভূমিকা এখনও অধ্যয়ন করা হয়নি53,54,55। বিপরীতে, Pep2 ফসফোরাইলেশন পূর্বে বর্ণনা করা হয়নি কারণ এই পেপটাইডটি শুধুমাত্র RGAGKG ট্রান্সজিন ব্যবহার করে সনাক্ত করা যেতে পারে। যদিও m1A মিউটেশন, যা Pep1 ফসফোরাইলেশন বাতিল করে, প্ল্যান্টায় RGA কার্যকলাপকে সামান্য হ্রাস করেছে, RGA কার্যকলাপ হ্রাসে m2A এর সাথে মিলিত হলে এটি একটি সংযোজন প্রভাব ফেলেছিল (পরিপূরক চিত্র 6)। গুরুত্বপূর্ণভাবে, ga1-এর তুলনায় GA-বর্ধিত স্লাই1 মিউট্যান্টে Pep1 ফসফোরাইলেশন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছে, যা পরামর্শ দেয় যে GA RGA ডিফসফোরাইলেশনকে উৎসাহিত করে, এর কার্যকলাপ হ্রাস করে। GA যে প্রক্রিয়া দ্বারা RGA ফসফোরাইলেশনকে দমন করে তার আরও তদন্ত প্রয়োজন। একটি সম্ভাবনা হল এটি একটি অজ্ঞাত প্রোটিন কাইনেজ নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে অর্জন করা হয়। যদিও গবেষণায় দেখা গেছে যে ধানে GA দ্বারা CK1 প্রোটিন কাইনেজ EL1 এর প্রকাশ হ্রাস পেয়েছে, আমাদের ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে Arabidopsis EL1 হোমোলগ (AEL1-4) এর উচ্চ-ক্রমের মিউটেশন RGA ফসফোরাইলেশন হ্রাস করে না। আমাদের ফলাফলের সাথে একমত, Arabidopsis AEL ওভারএক্সপ্রেসিং লাইন এবং একটি ael ট্রিপল মিউট্যান্ট ব্যবহার করে সাম্প্রতিক একটি ফসফোপ্রোটোমিক গবেষণায় এই কাইনেজগুলির সাবস্ট্রেট হিসাবে কোনও DELLA প্রোটিন সনাক্ত করা হয়নি56। যখন আমরা পাণ্ডুলিপিটি প্রস্তুত করি, তখন জানা যায় যে GSK3, গমে GSK3/SHAGGY-সদৃশ কাইনেজ এনকোডিংকারী জিন (Triticum aestivum), DELLA (Rht-B1b)57 কে ফসফোরিলেট করতে পারে, যদিও Planta তে GSK3 দ্বারা Rht-B1b এর ফসফোরিলেশন নিশ্চিত করা হয়নি। GSK3 এর উপস্থিতিতে ইন ভিট্রো এনজাইমেটিক প্রতিক্রিয়া এবং ভর স্পেকট্রোমেট্রি বিশ্লেষণ Rht-B1b এর DELLA এবং GRAS ডোমেনের মধ্যে অবস্থিত তিনটি ফসফোরিলেশন সাইট প্রকাশ করে (পরিপূরক চিত্র 3)। তিনটি ফসফোরাইলেশন সাইটেই সেরিন থেকে অ্যালানাইন প্রতিস্থাপনের ফলে ট্রান্সজেনিক গমে Rht-B1b কার্যকলাপ হ্রাস পেয়েছে, যা আমাদের গবেষণার সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যে Pep2 RGA-তে অ্যালানাইন প্রতিস্থাপন RGA কার্যকলাপ হ্রাস করেছে। যাইহোক, ইন ভিট্রো প্রোটিন অবক্ষয় পরীক্ষা আরও দেখিয়েছে যে ফসফোরাইলেশন Rht-B1b57 কে স্থিতিশীল করতে পারে। এটি আমাদের ফলাফলের বিপরীতে যা দেখায় যে Pep2 RGA-তে অ্যালানাইন প্রতিস্থাপন প্ল্যান্টায় এর স্থায়িত্ব পরিবর্তন করে না। গমে GSK3 হল Arabidopsis 57-এ brassinosteroid-insensitive protein 2 (BIN2) এর একটি অর্থলগ। BIN2 হল BR সংকেতের একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রক, এবং BR BIN2 অবক্ষয় 58 ঘটানোর মাধ্যমে এর সংকেত পথ সক্রিয় করে। আমরা দেখিয়েছি যে BR চিকিত্সা Arabidopsis (পরিপূরক চিত্র 2) তে RGA স্থিতিশীলতা 59 বা ফসফোরাইলেশন স্তর হ্রাস করে না, যা পরামর্শ দেয় যে RGA BIN2 দ্বারা ফসফোরাইলেটেড হওয়ার সম্ভাবনা কম।
এক্সেল ব্যবহার করে সমস্ত পরিমাণগত তথ্য পরিসংখ্যানগতভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং স্টুডেন্টস টি-টেস্ট ব্যবহার করে উল্লেখযোগ্য পার্থক্য নির্ধারণ করা হয়েছিল। নমুনার আকার পূর্ব-নির্ধারণের জন্য কোনও পরিসংখ্যানগত পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়নি। বিশ্লেষণ থেকে কোনও তথ্য বাদ দেওয়া হয়নি; পরীক্ষাটি এলোমেলোভাবে করা হয়নি; এবং গবেষকরা পরীক্ষা এবং ফলাফল মূল্যায়নের সময় বরাদ্দ সম্পর্কে সচেতন ছিলেন। চিত্রের কিংবদন্তি এবং কাঁচা ডেটা ফাইলগুলিতে নমুনার আকার সরবরাহ করা হয়েছে।
পোস্টের সময়: এপ্রিল-১৫-২০২৫