DELLA প্রোটিনগুলি সংরক্ষিতবৃদ্ধি নিয়ন্ত্রকযা অভ্যন্তরীণ এবং বাহ্যিক সংকেতের প্রতিক্রিয়ায় উদ্ভিদের বিকাশে একটি কেন্দ্রীয় ভূমিকা পালন করে। ট্রান্সক্রিপশনাল নিয়ন্ত্রক হিসাবে, DELLA-গুলি তাদের GRAS ডোমেনের মাধ্যমে ট্রান্সক্রিপশন ফ্যাক্টর (TF) এবং হিস্টোন H2A-এর সাথে আবদ্ধ হয় এবং প্রোমোটারগুলিতে কাজ করার জন্য নিযুক্ত হয়। সাম্প্রতিক গবেষণায় দেখা গেছে যে DELLA-এর স্থায়িত্ব দুটি প্রক্রিয়ার মাধ্যমে অনুবাদ-পরবর্তী পর্যায়ে নিয়ন্ত্রিত হয়: উদ্ভিদ হরমোন দ্বারা প্ররোচিত পলিউবিকুইটিনেশন।গিবেরেলিনযা তাদের দ্রুত অবক্ষয় ঘটায়, এবং স্মল ইউবিকুইটিন-লাইক মডিফায়ার (SUMO)-এর সাথে সংযুক্তি, যা তাদের সঞ্চয় বৃদ্ধি করে। অধিকন্তু, DELLA-এর কার্যকলাপ দুটি স্বতন্ত্র গ্লাইকোসিলেশন প্রক্রিয়া দ্বারা গতিশীলভাবে নিয়ন্ত্রিত হয়: O-ফিউকোসিলেশন DELLA-TF মিথস্ক্রিয়াকে উন্নত করে, যেখানে O-লিঙ্কড N-অ্যাসিটাইলগ্লুকোসামিন (O-GlcNAc) মডিফিকেশন DELLA-TF মিথস্ক্রিয়াকে বাধা দেয়। তবে, DELLA ফসফোরাইলেশনের ভূমিকা অস্পষ্ট, কারণ পূর্ববর্তী গবেষণায় পরস্পরবিরোধী ফলাফল দেখা গেছে; কিছু গবেষণায় বলা হয়েছে যে ফসফোরাইলেশন DELLA-এর অবক্ষয়কে উৎসাহিত বা দমন করে এবং অন্য গবেষণায় বলা হয়েছে যে ফসফোরাইলেশন তাদের স্থিতিশীলতাকে প্রভাবিত করে না। এখানে, আমরা ভর বর্ণালিবীক্ষণ (mass spectrometry) দ্বারা অ্যারাবিডোপসিস থ্যালিয়ানা থেকে বিশুদ্ধকৃত GA1-3 রিপ্রেসর (RGA), AtDELLA-এর ফসফোরাইলেশন স্থানগুলি শনাক্ত করেছি এবং দেখিয়েছি যে PolyS এবং PolyS/T অঞ্চলে দুটি RGA পেপটাইডের ফসফোরাইলেশন H2A বাইন্ডিং এবং টার্গেট প্রোমোটারের সাথে RGA-এর সংযোগকে উৎসাহিত করার মাধ্যমে RGA-এর কার্যকলাপ বৃদ্ধি করে। উল্লেখযোগ্যভাবে, ফসফোরাইলেশন RGA-TF মিথস্ক্রিয়া বা RGA-এর স্থিতিশীলতাকে প্রভাবিত করেনি। আমাদের গবেষণা এমন একটি আণবিক প্রক্রিয়া উন্মোচন করে, যার মাধ্যমে ফসফোরাইলেশন DELLA-এর সক্রিয়তা বৃদ্ধি করে।
আমাদের ভর বর্ণালিবীক্ষণিক বিশ্লেষণে দেখা গেছে যে GA-বিহীন Ga1 পটভূমিতে RGA-তে Pep1 এবং Pep2 উভয়ই উচ্চ মাত্রায় ফসফোরাইলেটেড ছিল। এই গবেষণা ছাড়াও, ফসফোপ্রোটিওমিক গবেষণায়ও RGA-তে Pep1 ফসফোরাইলেশনের বিষয়টি প্রকাশ পেয়েছে, যদিও এর ভূমিকা এখনও অধ্যয়ন করা হয়নি৫৩,৫৪,৫৫। এর বিপরীতে, Pep2 ফসফোরাইলেশন পূর্বে বর্ণিত হয়নি কারণ এই পেপটাইডটি শুধুমাত্র RGAGKG ট্রান্সজিন ব্যবহার করে সনাক্ত করা সম্ভব হয়েছিল। যদিও m1A মিউটেশন, যা Pep1 ফসফোরাইলেশনকে বিলুপ্ত করে, উদ্ভিদে RGA কার্যকলাপ সামান্যই হ্রাস করেছিল, কিন্তু m2A-এর সাথে মিলিত হলে RGA কার্যকলাপ হ্রাসে এর একটি সংযোজনমূলক প্রভাব ছিল (পরিপূরক চিত্র ৬)। গুরুত্বপূর্ণভাবে, ga1-এর তুলনায় GA-বর্ধিত sly1 মিউট্যান্টে Pep1 ফসফোরাইলেশন উল্লেখযোগ্যভাবে হ্রাস পেয়েছিল, যা ইঙ্গিত দেয় যে GA, RGA-এর ডিফসফোরাইলেশনকে উৎসাহিত করে, যার ফলে এর কার্যকলাপ হ্রাস পায়। যে প্রক্রিয়ায় GA, RGA ফসফোরাইলেশনকে দমন করে, তার জন্য আরও তদন্তের প্রয়োজন। একটি সম্ভাবনা হলো, এটি একটি অজ্ঞাত প্রোটিন কাইনেজের নিয়ন্ত্রণের মাধ্যমে সম্পন্ন হয়। যদিও গবেষণায় দেখা গেছে যে ধানে GA দ্বারা CK1 প্রোটিন কাইনেজ EL1-এর এক্সপ্রেশন ডাউনরেগুলেটেড হয়⁴¹, আমাদের ফলাফল ইঙ্গিত দেয় যে অ্যারাবিডোপসিস EL1 হোমোলগের (AEL1-4) উচ্চতর মিউটেশন RGA ফসফোরাইলেশন কমায় না। আমাদের ফলাফলের সাথে সঙ্গতি রেখে, অ্যারাবিডোপসিস AEL ওভারএক্সপ্রেসিং লাইন এবং একটি ael ট্রিপল মিউট্যান্ট ব্যবহার করে করা একটি সাম্প্রতিক ফসফোপ্রোটিওমিক গবেষণায় এই কাইনেজগুলির সাবস্ট্রেট হিসাবে কোনও DELLA প্রোটিন শনাক্ত করা যায়নি⁵⁶। যখন আমরা পাণ্ডুলিপিটি প্রস্তুত করছিলাম, তখন জানা যায় যে গমে (Triticum aestivum) GSK3/SHAGGY-সদৃশ কাইনেজ এনকোডিংকারী জিন GSK3, DELLA (Rht-B1b)-কে ফসফোরাইলেট করতে পারে⁵⁷, যদিও উদ্ভিদে GSK3 দ্বারা Rht-B1b-এর ফসফোরাইলেশন নিশ্চিত করা হয়নি। GSK3-এর উপস্থিতিতে ইন ভিট্রো এনজাইমেটিক বিক্রিয়া এবং তারপরে ভর বর্ণালিবীক্ষণ বিশ্লেষণ Rht-B1b-এর DELLA এবং GRAS ডোমেনের মধ্যে অবস্থিত তিনটি ফসফোরাইলেশন সাইট প্রকাশ করেছে (পরিপূরক চিত্র ৩)। তিনটি ফসফোরাইলেশন সাইটেই সেরিনকে অ্যালানিনে প্রতিস্থাপন করার ফলে ট্রান্সজেনিক গমে Rht-B1b-এর কার্যকারিতা হ্রাস পেয়েছে, যা আমাদের এই আবিষ্কারের সাথে সামঞ্জস্যপূর্ণ যে Pep2 RGA-তে অ্যালানিন প্রতিস্থাপন RGA-এর কার্যকারিতা হ্রাস করে। তবে, ইন ভিট্রো প্রোটিন ডিগ্রেডেশন পরীক্ষা আরও দেখিয়েছে যে ফসফোরাইলেশন Rht-B1b-কে স্থিতিশীলও করতে পারে। এটি আমাদের সেই ফলাফলের বিপরীত, যেখানে দেখা গেছে যে Pep2 RGA-তে অ্যালানিন প্রতিস্থাপন ইন প্ল্যান্টা-তে এর স্থিতিশীলতা পরিবর্তন করে না। গমের GSK3 হলো অ্যারাবিডোপসিসের ব্র্যাসিনোস্টেরয়েড-ইনসেনসিটিভ প্রোটিন 2 (BIN2)-এর একটি অর্থোলগ। BIN2 হলো BR সিগন্যালিং-এর একটি নেতিবাচক নিয়ন্ত্রক, এবং BR, BIN2-এর ডিগ্রেডেশন ঘটিয়ে এর সিগন্যালিং পথকে সক্রিয় করে। আমরা দেখিয়েছি যে BR প্রয়োগ অ্যারাবিডোপসিসে RGA-এর স্থিতিশীলতা বা ফসফোরাইলেশনের মাত্রা কমায় না (পরিপূরক চিত্র 2), যা থেকে বোঝা যায় যে RGA-এর BIN2 দ্বারা ফসফোরাইলেটেড হওয়ার সম্ভাবনা কম।
সমস্ত পরিমাণগত ডেটা এক্সেল ব্যবহার করে পরিসংখ্যানগতভাবে বিশ্লেষণ করা হয়েছিল এবং স্টুডেন্ট'স টি-টেস্ট ব্যবহার করে তাৎপর্যপূর্ণ পার্থক্য নির্ধারণ করা হয়েছিল। নমুনার আকার পূর্বনির্ধারণের জন্য কোনো পরিসংখ্যানগত পদ্ধতি ব্যবহার করা হয়নি। বিশ্লেষণ থেকে কোনো ডেটা বাদ দেওয়া হয়নি; পরীক্ষাটি এলোমেলোভাবে করা হয়নি; এবং গবেষকরা পরীক্ষা চলাকালীন ও ফলাফল মূল্যায়নের সময় বরাদ্দ সম্পর্কে অবগত ছিলেন। নমুনার আকার চিত্রের বিবরণে এবং কাঁচা ডেটা ফাইলগুলিতে প্রদান করা হয়েছে।
পোস্ট করার সময়: ১৫-এপ্রিল-২০২৫
